姜黄素在糖基化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞脂质聚积中的作用机制研究

摘要

目的 研究姜黄素在糖基化低密度脂蛋白(AGE-LDL)诱导的血管平滑肌细胞脂质聚积中的作用机制.方法 体外制备并检测AGE-LDL,将AGE-LDL及不同浓度的姜黄素作用于大鼠血管平滑肌细胞系A7r5,分别设置空白对照组、AGE-LDL处理组、10μmol/L姜黄素处理组、20μmol/L姜黄素处理组和10、20μmol/L姜黄素+3-MA处理组;Western blot检测B类I型清道夫受体(SRB1)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin和SQSTM1/p62蛋白表达水平;油红O染色检测脂质聚积程度.结果 体外糖基化修饰的LDL硫代巴比妥反应显著降低、电泳迁移率明显增加,表明AGE-LDL构建成功.Western blot实验结果显示,与空白对照组相比,姜黄素处理组明显上调AGE-LDL诱导的SRB1的表达,并具有一定的浓度依赖效应.姜黄素还能够抑制p-GSK3β和p-mTOR的表达水平,增加细胞的自噬水平(beclin表达升高和p62表达下降).油红O染色实验证实,AGE-LDL处理组脂质聚积明显,而姜黄素各处理组脂质聚积减弱,但3-MA各处理组脂质聚积进一步增加.结论 姜黄素可促进血管平滑肌细胞SRB1表达,抑制其脂质聚积,机制可能与通过GSK-3β/mTOR途径增加自噬相关蛋白表达有关.