嗜人按蚊雌蚊差异表达基因的鉴定及全长cDNA的克隆

摘要

目的 鉴定和克隆嗜人按蚊雌蚊差异表达基因并对基因序列进行分析.方法 以嗜人按蚊为试验模型,根据差异表达基因EST序列(GenBankTM接受号:EX916923)设计引物,采用实时定量PCR(real-time PCR)和RACE(rapid amplification of cDNA end)技术对雌蚊差异表达基因进行鉴定并扩增其cDNA序列.结果 利用F=2~(-△△CT)公式计算出雌蚊差异表达基因在雌蚊和雄蚊中的表达比值为267.49;差异表达基因全长mRNA序列为364bp,开放阅读框(ORF)编码的氨基酸序列经BLAST分析与致倦库纹(Culex quinquefasciatus)结构蛋白(tectin)及其他物种蛋白序列具有相似性.序列发送至NCBI获得接受号:FJ907236.结论 该基因为雌蚊差异表达的基因,其全长mRNA序列的获得为进一步研究其生物学功能奠定了基础.