DSN法直接获得差异表达基因全长cDNA的改良消减杂交方法

摘要

本发明公开了一种DSN法直接获得差异表达基因全长cDNA的改良消减杂交方法，属于基因工程领域，其主要方法是：利用Cap-finder法来合成双链cDNA，实验组和对照组分别进行反转录，实验组用3′poly A尾和5′-GGG帽结构分别在cDNA两端加上序列相同的锚定引物，对照组用普通反转录方法反转录，反转录后的cDNA与实验组的cDNA进行杂交，杂交结束后加入DSN酶进行消化，再进行纯化即获得实验组的差异表达cDNA，利用锚定引物进行PCR扩增，扩增产物分级分离后收集大片段连接T载体，进行转化获得阳性克隆，然后进行斑点杂交，本发明能够一次获取全长差异cDNA。