牛口蹄疫病毒VP2结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立

摘要

为建立牛口蹄疫(FMD)抗体的检测方法,本研究将口蹄疫病毒(FMDV)的VP2基因,通过pPROEX<'TM>HTb表达载体在大肠杆菌DH5α中表达,获得大小为35 ku的重组VP2蛋白(rVP2),western blot证实rVP2可与FMDV 5种血清型的牛阳性血清发生特异性反应.以纯化复性的rVP2为抗原建立了FMDV rVP2间接ELISA方法.重复性试验证实批内、批间变异系数均小于10%.特异性交叉试验表明,该抗原不与常见的其他7种牛病阳性血清发生交叉反应.检测非免疫无口蹄疫国家牛阴性血清的特异性为100%;检测感染血清敏感性为97.3%;检测O-Asia Ⅰ的二价苗免疫牛血清,与4种商品化试剂盒比较,其符合率分别为69.0%、95.0%、90.4%和86.8%.实验结果表明建立的ELISA方法可以用于口蹄疫感染和免疫抗体检测.