长链非编码RNA TPT1-AS1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用研究

摘要

目的研究肿瘤蛋白翻译调节因子1反义-RNA1(TPT1-AS1)在肝细胞和肝癌细胞中表达的差异,及其对肝细胞癌增殖、迁移、侵袭、上皮细胞间质化(EMT)的影响。方法2018年9月—2020年6月于西安交通大学实验室进行细胞实验,使用qRT-PCR分别检测92例经手术切除的肝癌组织与对应癌旁肝组织,肝癌细胞HepG2、SNU-182和人肝永生化细胞THLE-3中TPT1-AS1相对表达量。根据qRT-PCR测得肝癌组织中TPT1-AS1表达量中位数(3.38),将患者分为TPT1-AS1高表达组(n=46)和低表达组(n=46)。使用Kaplan-Meier法分析比较2组患者5年生存率的差异。使用siRNA转染HepG2和SNU-182细胞以沉默TPT1-AS1表达,以阴性对照siRNA(si-NC)转染相同细胞作为对照。比较siRNA和si-NC转染HepG2和SNU-182细胞后的增殖、迁移、侵袭、EMT能力差异。结果与对应癌旁组织比较,肝癌组织中TPT1-AS1相对表达水平升高(t/P=54.065/0.000)。高表达组患者BCLC分期C期比例、淋巴结转移比例更高(χ^(2)/P=15.187/0.001,7.379/0.007)。高表达组患者5年生存率低于低表达组(χ^(2)/P=7.354/0.007)。使用siRNA转染的HepG2和SNU-182细胞较si-NC转染对应细胞的细胞集落数量明显减少,G0/G1期细胞比例升高(P均=0.000),S期细胞比例显著降低(P均=0.000),相对迁移距离降低(t/P=25.153/0.000),穿透基底膜的细胞数量减少,G1/S期转换及EMT相关蛋白CDK4、N-cadherin和Vimentin的相对表达量降低(P均=0.000),而p21和E-cadherin蛋白相对表达量升高(P均=0.000)。结论长链非编码RNA TPT1-AS1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,TPT1-AS1有可能作为肝细胞癌的治疗靶点。