长链非编码RNA LINC00222对肺腺癌细胞增殖、 迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制的研究

摘要

目的 检测肺腺癌组织及细胞系中LncRNA LINC00222表达,探究其对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和相关作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和Western blot实验检测肺腺癌组织及细胞中LINC00222表达;构建LINC00222过表达载体,验证其转染效率;采用CCK-8法、Hoechst 33342/PI染色法、划痕实验及Transwell实验分别检测过表达LINC00222对肺腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响;采用Western blot法检测肺腺癌细胞中P-GSK-3β,GSK-3β蛋白及β-catenin核蛋白表达;采用荧光霉素基因实验及RIP实验验证探究LINC00222影响肺腺癌生物学行为的相关作用机制.结果 肺腺癌组织中LINC00222 mRNA和蛋白表达明显低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(t=7.388,15.100,均P<0.001);肺腺癌细胞系中LINC00222表达明显低于人正常肺胚细胞(F=21.926,P<0.001).过表达LINC00222后,肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力明显抑制,细胞凋亡数目明显增多(P<0.01).过表达LINC00222后,GSK-3β磷酸化明显降低,GSK-3β催化活性明显增强,β-catenin核转位受到抑制(P<0.01).LINC00222靶向调控结合GSK-3β和GSK-3β蛋白共沉淀中LINC00222表达显著高于IgG蛋白共沉淀(P<0.05).结论 肺腺癌中LncRNA LINC00222低表达,其过表达可抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡,可能与其调控GSK-3β催化活性,抑制β-catenin核转位有关.