表达载体pEGFP-C3-PENK的构建以及在NIH3T3细胞中的表达

摘要

目的:构建质粒pEGFP-C3-PENK,并观察其在真核细胞中表达的时效.方法:构建质粒pEGFP-C3-PENK;低浓度裸质粒、高浓度裸质粒、脂质体介导分别转染NIH3T3细胞,观察转染率、绿色荧光蛋白表达情况;放射免疫法和免疫细胞化学法检测脑啡肽的表达情况.结果:质粒pEGFP-C3-PENK成功构建;低浓度裸质粒转染率5%;高浓度裸质粒转染率8%,脂质体介导转染率为20%;转染5周后仍有绿色荧光蛋白表达.结论:成功构建质粒pEGFP-C3-PENK,可在NIH3T3细胞中表达超过5周.