杂草稻nrDNA ITS片段的PCR扩增条件优化及测定

摘要

对杂草稻的nrDNA ITS片段的PCR扩增条件进行了优化并测定,建立的PCR最优体系为:20 μL反应体系含1 μL模板DNA,0.125 mmol/L dNTPs,0.5 μmol/L正反向引物,1 U Taq酶,2.0 μL 10 ×Taq PCR Buffer;退火温度为57℃.这样的条件下充分保证了ITS PCR产物的质量和纯度要求,直接测序结果为600 bp左右,与网上结果十分类似,表明结果准确可靠.这些ITS片段的系统学信息将为杂草稻的起源进化提供有力的分子水平证据.