犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要

为建立方便快捷的犬瘟热病毒(CDV)检测方法,本实验运用杂交瘤细胞融合技术,建立了4株分泌抗CDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F7、H4和G12.相加ELISA试验显示4株MAb作用于CDV不同的抗原表位。选取相加指数较高的两株MAb G12和A2分别作为捕获抗体和酶标抗体,建立检测CDV的夹心ELISA检测方法,并对实验条件进行了优化。结果显示,该方法与CPV、CPIV、CAV-1、CCV等犬类病毒无交叉反应,敏感度为5μg/mL,变异系数小于6％。用该方法与RT-PCR方法同时检测57份临床样品,两种方法的符合率为100％。本实验建立的单抗夹心ELISA方法具有特异、敏感、方便快捷等优点,适用于大批量临床样品检测。