大剂量维生素E、C补补充大鼠生物大分子氧化损伤及细胞功能影响的研究

摘要

目的:观察不同剂量维生素E、C(VE、VC)补充对大鼠生物大分子氧化损伤及细胞功能的影响。rn 方法:采用Wistar大鼠随机分成8组，4组VE干预：对照组、VE1、VE2和VE3，对照组给予普通饲料，三个干预组均喂饲添加维生素E的饲料，剂量分别为500 IU/kg、2000 IU/kg、7500IU/kg饲料。4组VC干预：在基础饲料的基础上分别添加不同剂量的维生素C(分别为0，2000，5000，10000mg/kg饲料)，实验期为8周。定期称大鼠体重，第6-7周留取尿液；实验结束后腹主动脉取血进行以下指标的检测分析。①采用单细胞凝胶电泳法检测DNA自发及诱导氧化损伤的情况；②采用荧光偏振法测定红细胞膜流动件；③采用毛细管电泳法测定尿巾06-甲基鸟嘌呤的含量；④测定大鼠血清中维生素E、C的含量；⑤采用试剂盒测定血清中SOD、MDA和13SH-Px以及红细胞膜中的MDA和GSH-Px。⑥采用MTT法测定大鼠外周血淋巴坌}H胞增贿活性。rn 结果:三个干预组血浆VE、VC水平较对照组明显升高(P<0.05)；①500IU/kg维生素E可以增强血清、细胞膜GSH-PX、SOD等抗氧化酶的活性，降低血清中脂质过氧化终产物MDA水平；同时，补充该剂量维生素E可降低DNA诱发氧化损伤及自发烷化损伤水平；提高大鼠红细胞膜流动性和淋巴细胞转化率。②饲料中维生素E为2000IU/kg、7500IU/kg时，可降低血清SOD活性，并且加重较大剂量过氧化氧诱发的DNA氧化损伤；而GSH-PX、MDA、红细胞膜流动性等则未见改善；7500IU/kgVE可降低淋巴细胞转化率。③补充2000mg/kg饲料的VC可使大鼠血清SOD含量明显增高，使MDA含昔明显降低，而补充10000mg/kg饲料的VC可减少大鼠血清SOD含量。增加血清MDA含量。各VC剂量组埘血清GSH-Px含量没有影响。④补充2000mg/kg饲料的VC可明显降低红细胞膜MDA的含量，增加大鼠的红细胞膜流动性；补充10000mg/kg饲料的VC可降低膜GSH-Px含量。⑤5000、10000mg/kg饲料VC埘DNA自发损伤及低和高剂量H2O2(5、25μmol/L)诱导的DNA损伤尤影响。而对中剂量的H202(10μmol/L)诱导损伤，补充的VC可加重DNA损伤。⑥给大鼠补充10000mg/kg饲料的VC可增加大鼠尿中06-甲基鸟嘌呤的含量。⑦补充2000mg/kg饲料的VC可增加大鼠外周血淋巴细胞的增殖活性。结论本实验揭示较大剂量维生素E、C可提高机体的抗氧化能力，并且改善细胞增殖及膜流动等细胞活性。但是，过大剂量维生素E、C未能进一步提高机体的抗氧化能力，改善细胞增殖及膜流动。