反相高效液相色谱法同时测定鲜牛乳中的乳清蛋白

摘要

文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.