黄体细胞

摘要： 本试验旨在探究褪黑素(melatonin,MT)对牦牛黄体细胞生长、抗氧化性及功能的影响。本试验以健康牦牛二代黄体细胞为研究对象,比较了不同浓度MT(0(Control组)、25、125、250、500 pg·mL^(-1))对牦牛黄体细胞生长和功能的影响。通过CCK-8法检测黄体细胞的生长情况,并采用qRT-PCR检测增殖相关基因PCNA,凋亡相关基因BCL-2、BAX、FAS,抗氧化相关基因SOD1、SOD2、GPX1和CAT以及孕酮合成相关基因HSD3β、STAR和CYP11A1 mRNA的表达水平,应用ELISA检测黄体细胞ROS和孕酮水平。结果显示,添加不同浓度的MT培养能促进细胞增殖,加速黄体细胞进入平台期。MT能促进黄体细胞增殖基因PCNA和抑凋亡基因BCL-2 mRNA的表达并抑制促凋亡基因BAX、FAS的表达。同时,MT能显著降低黄体细胞中的ROS水平并促进黄体细胞分泌孕酮,且浓度在250 pg·mL^(-1)时上述作用最明显。在此浓度作用下,黄体细胞中抗氧化相关基因SOD2、GPX1及CAT和孕酮合成相关基因STAR、CYP11A1 mRNA的表达量明显上调。与仅添加MT相比,应用MT及MT受体抑制剂Luzindole联合处理黄体细胞可显著升高黄体细胞的ROS水平并抑制SOD2、GPX1及CAT的表达,孕酮水平及STAR和CYP11A1表达量均显著下调。综上表明,MT可能通过上调PCNA、BCL-2,下调BAX、FAS mRNA表达量进而促进黄体细胞增殖。MT可能通过受体介导调控了黄体细胞的ROS和孕酮水平。本研究为MT治疗黄体异常引发的生殖疾病以及其在提高牦牛繁殖性能上的应用提供了一定的理论基础。

摘要： 卵巢卵泡膜细胞瘤(ovarian thecoma,OT)属于卵巢性索间质肿瘤,仅占卵巢实性肿瘤的0.5%~1.0%[1],研究表明该肿瘤混合有卵泡膜、黄体细胞以及不同含量的成纤维细胞,并在1932年进行了首次报道[2]。该肿瘤多见良性,少数OT可有癌变,有报道其恶性率为1%~5%[3]。临床表现无特异性,术前诊断不易。磁共振成像(MRI)的多参数扫描能提供软组织分辨率,为明确病变性质提供更多信息,对卵巢病变的诊断效能较高。本研究通过12例OT的临床与MRI影像学结果分析,以加深对OT的认识。

摘要： 本实验旨在研究过表达miR-665对绵羊黄体细胞类固醇激素调节基因StAR、3β-HSD表达水平以及孕酮(P4)分泌水平的影响。通过miR-665模拟物及阴性对照物与绵羊黄体细胞共转染,设置空白对照组,48h后在不同转染组中分别检测miR-665的表达水平和StAR、3β-HSD的mRNA、蛋白表达水平及P4分泌水平变化。结果表明:与空白对照组和阴性对照组相比,miR-665模拟物组中miR-665的表达量极显著升高;同时,孕酮合成关键基因StAR、3β-HSD的mRNA和蛋白表达量极显著增加,分泌水平极显著升高。综上,过表达miR-665能够促进黄体细胞内StAR、3β-HSD基因表达和P4分泌,其在绵羊黄体内分泌功能调控过程中发挥重要作用。

摘要： 肝素结合性表皮生长因子(heparin-binding epithelial growth factor,HB-EGF)是表皮生长因子家族中的一员,是一种跨膜蛋白膜固定型HB-EGF(proHB-EGF).proHB-EGF在特殊的金属蛋白酶作用下可水解产生可溶性HB-EGF (sHB-EGF).proHB-EGF不仅是sHB-EGF的前体,而且本身也是生物活性分子.proHB-EGF与膜蛋白形成复合体,此复合体定位于细胞间连接区,暗示proHB-EGF可能是通过近分泌机制实现其在细胞间的信号传导功能.在一个试管模型中,proHB-EGF表达为生长抑制活性,而sHB-EGF表达为生长激活活性.这些特性指出proHB-EGF和sHB-EGF是通过不同的通路发挥作用.proHB-EGF和sHB-EGF在人体内的功能尚不明确,但他们在许多生理过程中起重要作用,HB-EGF在生殖内分泌领域的研究受到极大关注,如黄体细胞的分裂与凋亡、卵泡发育、胚胎移植等.%Heparin-binding epithelial growth factor (HB-EGF),a member of the EGF family,is synthesized as a membrane-anchored precursor (proHB-EGF).ProHB-EGF is then cleaved to yield a soluble HB-EGF (sHB-EGF) by specific metalloproteases.ProHB-EGF is not only the precursor molecule for sHB-EGF but also a biologically active molecule itself.ProHB-EGF forms a complex with membrane proteins,which is localized at the cell contact site,suggesting that proHB-EGF may function in cell-to-cell signaling by a juxtacrine mechanism.In an in vitro model,proHB-EGF showed a growth inhibitory activity while sHB-EGF a growth stimulatory activity,suggesting that proHB-EGF and sHB-EGF work in different ways.However,the in vivo functions of sHB-EGF and proHB-EGF have not been defined.Many recent studies suggested that they play an important role in various physiological processes.This review introduced the potential roles of HB-EGF in reproductive endocrine,including mitosis and apoptosis of the corpus lutein cells,follicular development and embryo transfer.

摘要： 奶牛黄体合成的孕酮对于维持妊娠至关重要.机体感染后产生的抗炎活性成分干扰素α(IFN-α)对奶牛妊娠产生不利影响.文章旨在研究干扰素α对奶牛黄体细胞合成孕酮功能的影响.奶牛中期黄体经机械分离和酶消化处理后分离出黄体细胞,在体外培养条件下,添加IFN-α对黄体细胞基础孕酮和促黄体素(LH)刺激后的孕酮合成水平进行研究.结果表明,IFN-α可降低牛黄体细胞基础孕酮合成水平,还减弱LH对黄体细胞孕酮合成的刺激作用.结果显示,体内的IFN-α可通过直接作用于黄体细胞影响奶牛黄体孕酮分泌水平.

摘要： This study aims to establish a method of isolation and primary culture of corpus luteum cells from Bactrian camel during pregnancy by using percoll,in order to observe the biological characteristics of large luteal cells and small luteal cells.Luteal cells were obtained by collagenase digestion from corpus lute-um of pregnant Bactrian camel.The results showed that the majority of Bactrian camel corpus luteum cells with good growth status could be obtained by collagenase digestion,and the number of small luteal cells was more incredible than the number of large luteal cells.The amplification cells showed representative morphological and biological characteristics of steroid secretory cells.It is suggested that the method of iso-lation and primary culture of Bactrian camel luteal cells in vitro is established successfully.The luteal cells are suitable for experiment in vitro for its high purity and stable biological characteristics,and provided the basis for further research on corpus luteum cells of Bactrian camel breeding mechanism.%为了探索双峰驼黄体细胞的 percoll 液分离及体外培养方法，观察黄体细胞的生物学特性，采用胶原酶消化法从双峰驼黄体组织中分离并获得妊娠期双峰驼黄体细胞，通过形态学观察确定了大小黄体细胞的生长特性。结果表明：胶原酶消化可获得数量较多，生长状态良好的双峰驼黄体细胞，而小黄体细胞的数量远远多于大黄体细胞，其形态学和生物学特性具有典型类固醇分泌细胞的特征。试验建立的体外双峰驼黄体细胞原代培养的方法，所获细胞生物学特征稳定，纯度较高，适用于体外试验研究。

摘要： 目的 探讨低温暴露对大鼠黄体细胞环磷酸腺苷(cAMP)生成量的影响及人参多糖的调节作用.方法 采用体外细胞培养法分离培养大鼠卵巢黄体细胞,设人参多糖组和实验组,进行37°C、0°C、-10°C环境温度多次暴露,观察黄体细胞cAMP生成量的变化;采用放射免疫分析方法测定cAMP生成含量.结果 0°C第1次低温暴露,cAMP生成量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);第2、3次低温暴露,cAMP均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);-10°C第1次低温暴露,cAMP生成量升高,差异有统计学意义(P＜0.05),第2、3次低温暴露均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).人参多糖组增高和下降幅度明显减少,第2、3次0 °C冷暴露后及第3次-10°C冷暴露后,cAMP生成量明显高于实验组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 寒冷程度及暴寒次数对大鼠卵巢黄体细胞产生cAMP功能有影响,人参多糖对其有良好的调节作用.

摘要： To explore the discipline on species distribution and value variation of periodic corpus luteum, HE staining method was adopted to measure the volumes,sizes and total number of luteal cells.The re-sults indicated a parabolic rule of luteal cells in different estrous cycle,of which,the total number of luteal cells in the Ⅳ period were at least,while,the sizes of luteal cells in Ⅰ,Ⅱand Ⅲ period were always bigger than the same cells in Ⅳ period.The data showed a dynamic relationship between the ovary,corpus luteum and estrous cycle in the mice through amounts of static data,thus,we brought forward a new theoretical basis for the classification of luteal cells,in the meantime,facilitated the establishment of computer model of corpus luteum in three-dimensional way.%为探索发情周期黄体中细胞的形态分布及数量变化规律，采用 HE染色法对发情周期中小鼠黄体的体积大小、黄体细胞的形态分布特征、细胞大小及不同大小细胞所占比例、细胞数量以及卵巢的体积大小等变化规律进行了较系统的研究。结果表明，黄体Ⅰ期中，细胞总数较多，体积中等的黄体细胞比例较高；黄体Ⅱ期中，细胞总数最多，体积中等的黄体细胞比例较高；黄体Ⅲ期中，细胞总数较多，体积中等的黄体细胞比例较高；而黄体Ⅳ期中，细胞总数最少，体积偏小的黄体细胞数量最多。通过静态数据分析，得出小鼠卵巢、黄体发育及其与小鼠发情周期阶段之间的动态关系，并为新的黄体细胞分类体系的建立和计算机模拟构建周期性黄体的三维立体构象提供了依据。

摘要： 采用体外黄体细胞培养,观察中药紫草的水溶成分——紫草多糖对hCG诱导的黄体细胞分泌孕酮影响,并探讨其可能机制.选取未成年雌性SD大鼠,分离黄体细胞,分为基础组和hCG组,分别添加不同浓度紫草多糖,放射免疫检测各组细胞内和培养液中的孕酮( Progesterone,P4)含量；将细胞悬液分为4组:空白对照组、1.50g·L-1紫草多糖组、2×104 U/L hCG组以及hCG(2×104 U/L)+紫草多糖(1.50g· L-1)组,在培养的不同时间点(0、0.5、1、2h时),分别测P4产量,观察紫草多糖对培养黄体细胞作用的起效时间和动力学变化.此外,上述4组培养0.5h后离心分离细胞和培养液,分别测得细胞内和培养液中的cAMP和cGMP含量,将细胞内和培养液中的含量之和作为总量,并计算其cAMP/cGMP比值.结果表明:1.紫草多糖呈剂量依赖性地抑制hCG刺激下黄体细胞P4的生成.2.加大剂量(＞3.00g· L-1)紫草多糖亦可抑制基础P4的生成.3.1.50 g· L-1紫草多糖组从作用0.5h起,即显著抑制黄体细胞hCG刺激下的P4生成(P＜0.01).4.hCG可明显增加黄体细胞cAMP含量,导致cAMP/cGMP增加.添加1.50 g· L-1紫草多糖可增加cAMP、cGMP含量,但cAMP/cGMP比值下降.结论:紫草多糖可直接作用于促性腺激素的靶细胞——黄体细胞,并抑制hCG诱导黄体细胞分泌功能,该抑制作用起效快,并可能通过cGMP介导.%The effects of the water-soluble ingredients of lithospermum-lithosperman,on progesterone secretion induced by hCG in rat luteal cells Utilizing the in vitro cultured luteal cells was studied, through the in vitro cultured luteal cells. The related mechanisms were investigated, too. The Luteal cells were isolated from immature female SD rats selected and divided into control and hCG group. Different concentrations of lithosperman were added into each group. Afterwards, the contents of both intercellular progesterone and the progesterone in culture solution were detected by radioimmunity. In order to reveal the onset time and kinetic features of lithosperman on hCG secretion,the cell suspension was divided into four groups:control group,1. 50 g ? L~' lithosperman group,2X1O4 U/L hCG group and hCG(2X104 U/D+lithosperman (1. 50 g ? L"1) group. The contents of progesterone were then examined at different cultured time points (0, 0. 5,1 or 2 h) in each group. In addition,the cells after 0. 5 h culture were centrifuged and separated from the culture solutions. The total cAMP and cGMP were obtained by summing up the contents in cells and solutions,and the cAMP/cGMP ratios was calculated. The results showed: 1. Lithosperman suppressed the hcG-induced progesterone production in luteal cells in a dose-dependent manner. 2. Lithosperman in high dose (>3. 00 g ? L"1) could inhibit the basic progesterone generation in the controlled group. 3. In the con-centration of 1. 50 g ? L ' group,lithosperman started to significantly inhibit the hCG-induced progesterone generation after 0. 5 h incubation. 4. hCG obviously increased the cAMP content in luteal cells,resulting in the elevation of cAMP/cGMP ratio. However, the net effect was that cAMP/cGMP ratio decreased although the addition of 1. 50 g ? L"1 lithosperman increased the contents of both cAMP and cGMP. Conclusions: Lithosperman could inhibit the hCG-induced hormone secretion in luteal cells, which are the targets of gonadotropins. Furthermore,the quick effect of lithosperman hints that it might be mediated by cGMP.

摘要： 经证实,神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYP)、五羟色胺(5-HT)和S100B蛋白(S100B)这四种弥散性神经内分泌细胞标志物在山羊黄体细胞中有一定量的表达,然而这四种物质在黄体中发挥的作用,以及它们之间的相互联系尚不清楚,本实验运用细胞培养法、RNA干扰技术、MTT法、免疫细胞化学法、免疫荧光细胞化学法以及实时荧光定量PCR对干扰前后永生化山羊黄体细胞的增殖情况以及这四种弥散性神经内分泌细胞标志物的表达进行检测.结果表明干扰后的永生化黄体细胞增殖受到抑制;NSE干扰实验组中,NSE的表达量下降且集中于细胞核周围,S100B和SYP只有部分细胞微量表达,而5-HT的表达量增加;SYP和S100B的mRNA在干扰前后的永生化黄体细胞中都有微量表达,且表达量没有差异性变化.结果显示干扰永生化山羊黄体细胞NSE基因后,永生化黄体细胞的生长受到抑制,表明NSE在黄体细胞中可能发挥了支持、营养等非糖酵解功能,其表达促进了黄体细胞的增殖.NSE的敲除,导致个别细胞中5-HT的表达异常,而S100B和SYP的表达没有明显变化,表明5-HT的表达与NSE存在着某种联系,S100B和SYP可能在黄体细胞生长中起到了支持作用.

摘要： 本文旨在探讨IFN-α是否具有调节黄体细胞的功能以及是否通过调节VEGF的表达促进黄体形成。表明IFN-α在黄体的发生中起一定的作用，促进VEGF对黄体的退化的转化过程。

摘要： 本研究旨在建立山羊黄体细胞的分离培养纯化方法,观察黄体细胞的生物学特点.研究采用组织块法和胶原酶消化法从山羊黄体中分离并获得纯化的发情期山羊黄体细胞,通过形态学、免疫细胞化学染色以及细胞增殖曲线,确定细胞的生长特性.结果表明不同类型胶原酶消化均可获得数量较多,生长状态良好的山羊黄体细胞,3β-HSD、P450scc及SYP免疫细胞化学染色呈阳性,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃,其形态学和生物学特性具有典型类固醇分泌细胞的特征.本研究建立了体外山羊黄体细胞原代培养的方法,所获细胞生物学特征稳定,纯度高,适用于体外实验研究.

摘要： [目的]为了探讨醋酸棉酚对小鼠黄体细胞凋亡的影响。[方法]将25-30日龄昆明系雌性小鼠80只，称重后随机分为5组，分别为空白对照组，乙醇对照组，染毒低、中、高剂量组，每组16只。取卵巢黄体进行以下研究：黄体组织切片观察，卵巢黄体MDA含量和SOD活性及血液中孕激素的含量的测定，Tunel法检测小鼠卵巢黄体细胞凋亡，RT-PCR法测定Bcl-2，Bax和P53基因表达。[结果]醋酸棉酚可以直接损伤小鼠黄体细胞，产生明显的细胞毒性、且这种毒性作用呈正相关；SOD活性与孕激素的含量随着棉酚剂量的增高而降低，而MDA含量变化趋势与此相反，各染毒组小鼠的卵巢黄体细胞凋亡率明显升高，与对照组相比差异极显著(P<0.01)。Bax和P53基因表达水平明显上升，Bcl-2基因表达水平明显下降。[结论]棉酚能有效地诱导小鼠黄体细胞发生凋亡。

摘要： 研究单纯性子宫切除后,卵巢功能及黄体细胞凋亡变化情况.制成单纯性子宫切除的大鼠模型,应用放免、TUNEL及电镜方法研究卵巢激素水平和黄体颗粒细胞凋亡变化趋势.子宫切除后大鼠的卵巢激素水平呈更年期样变化,黄体颗粒细胞凋亡指数呈增高趋势,黄体颗粒细胞凋亡符合细胞凋亡的一般形态学特征.单纯子宫切除后,卵巢功能下降,黄体细胞凋亡指数增高;卵巢黄体颗粒细胞凋亡与卵巢激素的周期性变化密切相关;卵巢激素可能参与了凋亡基因调控过程.

摘要： 本发明涉及一种通过直接重编程由其中引入有编码Oct4蛋白的核酸分子的人体细胞或用Oct4蛋白处理的人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法。用低分子量物质处理Oct4过表达人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法可以通过不经由神经干细胞而直接重编程在短时间内高效地建立少突胶质细胞前体细胞，因此少突胶质细胞前体细胞作为治疗难治性脱髓鞘疾病的细胞治疗剂是有用的。

摘要： 一种改进的核移植方法，采用长期培养的体细胞作为供体细胞并采用去核卵母细胞作为受体细胞得到可分裂胞质杂合体。所述胞质杂合体在合适的宿主环境中培养时中可用于培养活体动物克隆。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及石龙芮体细胞胚诱导方法与体细胞胚介导遗传转化的方法。本发明的石龙芮体细胞胚诱导方法包括：石龙芮无菌苗的培养；体细胞胚诱导培养基SE‑M于暗培养条件下诱导石龙芮根、茎(无腋芽)和叶产生体细胞胚；体细胞胚于生根培养基RO‑M上诱导生根、成苗等步骤。本发明可为石龙芮体细胞胚发生的分子机制研究，石龙芮抗逆与土壤修复新种资创制等提供稳定的受体系统和验证平台。

摘要： 本发明提供一种功能性肝(前体)细胞或功能性小肠上皮(前体)细胞的制备方法，其包括在抗生素存在下培养包含肝(前体)细胞或者小肠上皮(前体)细胞的分离细胞群的步骤。另外，本发明还提供一种包含功能性肝前体细胞的实质上均匀的分离细胞群，其中，CYP3A4在所述功能性肝前体细胞中的表达水平与其在HepaRG(注册商标)细胞株中的表达水平相比至少增大5倍。

摘要： 本发明涉及一种通过直接重编程由其中引入有编码Oct4蛋白的核酸分子的人体细胞或用Oct4蛋白处理的人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法。用低分子量物质处理Oct4过表达人体细胞诱导少突胶质细胞前体细胞的方法可以通过不经由神经干细胞而直接重编程在短时间内高效地建立少突胶质细胞前体细胞，因此少突胶质细胞前体细胞作为治疗难治性脱髓鞘疾病的细胞治疗剂是有用的。

摘要： 一种改进的核移植方法，采用长期培养的体细胞作为供体细胞并采用去核卵母细胞作为受体细胞得到可分裂胞质杂合体。所述胞质杂合体在合适的宿主环境中培养时中可用于培养活体动物克隆。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及石龙芮体细胞胚诱导方法与体细胞胚介导遗传转化的方法。本发明的石龙芮体细胞胚诱导方法包括：石龙芮无菌苗的培养；体细胞胚诱导培养基SE‑M于暗培养条件下诱导石龙芮根、茎(无腋芽)和叶产生体细胞胚；体细胞胚于生根培养基RO‑M上诱导生根、成苗等步骤。本发明可为石龙芮体细胞胚发生的分子机制研究，石龙芮抗逆与土壤修复新种资创制等提供稳定的受体系统和验证平台。

摘要： 本发明提供一种诱导体细胞重编程至多能性干细胞的因子，该因子含有下述四种基因：Jdp2，Nanog，Essrb和Sall4。本发明还提供一种诱导体细胞重编程制备多能性干细胞的方法，该方法包括：将上述诱导体细胞重编程至多能性干细胞的因子导入体细胞。进一步地，本发明提供由上述方法培养得到的多能性干细胞以及该多能性干细胞在中的应用。

摘要： 本发明提供了一种改善猪体外原代黄体细胞功能的方法，所述方法通过在体外原代黄体细胞培养液中添加褪黑素，从而提高黄体分泌孕酮水平。本发明所述方法中添加浓度10‑9M～10‑5M的褪黑素可以提高黄体分泌孕酮水平，有利于改善黄体功能，为褪黑素在大家畜上的应用推广，为达到提高母猪繁殖力的目的研究中提供理论参考。

摘要： 本发明属于生物动物细胞系领域，具体涉及一种妊娠早期萨能奶山羊黄体细胞系的建立方法。本发明利用怀孕6-8周的健康萨能奶山羊的黄体组织为细胞来源，用胶原酶消化黄体组织从而得到离散的黄体细胞，并在体外进行扩大培养和纯化。利用脂质体把人端粒酶逆转录酶基因转染纯化后的黄体细胞内，并用抗性基因进行筛选，挑取单克隆进行扩大培养。然后通过组织细胞化学染色进行鉴定。本发明黄体细胞系细胞呈多角型或梭型，3β-羟基类固醇脱氢酶染色呈阳性，此外还保持了原代黄体细胞的一些重要特征。