风味蛋白酶

摘要： 选用风味蛋白酶对环颈雉骨蛋白进行水解,在风味蛋白酶的最适温度50°C和pH值7.0条件下,以水解度(DH)和氮回收率为指标,优化出风味蛋白酶最适的水解条件:底物浓度为2 g/100 mL,[E]/[S]为2∶100,水解时间4 h。研究表明:在此条件下骨蛋白水解液的水解度和氮收率较为合理,为后续的美拉德反应产生风味物质提供丰富的反应原料,打下良好的基础。

摘要： 为提高小麦副产物综合利用附加值,研究采用风味蛋白酶酶解麦胚制备风味活性肽,以感官评分和麦胚肽得率为衡量指标优化酶解工艺,测定酶解物中风味物质含量、肽分子量分布及其体外抗氧化活性。结果表明,麦胚最佳酶解条件为pH7,底物浓度2%,酶解温度50°C,酶添加量4%。此时,麦胚肽得率为(8.17±0.70)%,酶解物具有一定咸鲜滋味并伴有清淡香气。麦胚酶解物中挥发性物质以烃类、酸类和醇类物质为主;呈鲜物质主要为天冬氨酸、5'-鸟嘌呤核苷酸和琥珀酸;肽分子量主要分布小于3000 Da,其DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率和羟自由基清除率的IC50值分别为10.327、0.448、0.574 mg/mL,具有较好的体外抗氧化活性。

摘要： 为探究冰温(-2°C)条件下风味蛋白酶对腌制鳜Siniperca chuatsi鱼肉理化性质、滋味及气味的影响,以不同添加量的风味蛋白酶(25、50、100 U/g)为试验组,不添加酶为对照组,研究腌制过程中鱼肉的质构、感官、氨基酸态氮、三氯乙酸(TCA)-可溶性肽、游离氨基酸、呈味核苷酸及挥发性物质等的变化。结果表明:冰温条件下风味蛋白酶的添加对腌制鳜鱼肉滋味及风味有显著性影响(P<0.05),且风味蛋白酶添加量越高影响越大,但风味蛋白酶添加量过高会引起鱼肉硬度及口感下降;风味蛋白酶添加量为50 U/g时,鱼肉品质指标最佳,腌制10 d时,TCA含量达347.22 mg/100 g,为对照组的1.5倍,鲜味氨基酸含量在第6天时达到最高值(60.78 mg/100 g),次黄嘌呤核苷酸(IMP)含量在第6天时为133.83 mg/100 g,为对照组的1.3倍,味精当量在第6天时达到最高值(7.06 g MSG/100 g),为对照组的2.8倍,该组鱼肉中挥发性物质种类更丰富,总量为2625.11μg/100 g,为对照组的2.7倍。研究表明,冰温下添加风味蛋白酶可显著改善腌制鳜鱼肉品质及风味,最佳工艺条件为添加50 U/g风味蛋白酶腌制6 d。

摘要： 以高浓度玉米浆为原料,研究米曲霉种曲和风味蛋白酶协同水解玉米浆制备植物蛋白调味液的工艺,并分析产物的氨基酸态氮含量、可溶性蛋白含量和呈味氨基酸的组成,检测食品安全性。首先采用米曲霉种曲单独水解玉米浆,得到第一阶段水解液,第一段水解的适宜条件为pH5.5~6.0、水解时间3 h、加曲量质量分数为1.86%、温度50°C;再加入风味蛋白酶进行菌酶协同作用,适宜水解条件为pH7.0、水解时间3 h、加酶量1000 U/g、温度50°C。玉米浆原液、第一阶段水解液和菌酶协同水解液的氨基酸态氮含量分别为1.44、1.55、1.80 g/100 mL;可溶性蛋白含量分别为102.94、108.94、138.57 mg/mL;呈味氨基酸含量分别为3.74%、4.34%、4.80%。制备的植物蛋白调味液符合食品安全标准。

摘要： 通过风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白,以蛋白水解率为指标,采用单因素实验探究水解pH、水解温度、料液比、酶浓度、水解时间五个因素对牦牛血液蛋白水解效果的影响.在此基础上以五因素三水平正交试验(L18 (37))优化水解工艺,发现较佳水解工艺参数为A1B2C3D3E3,即最适pH为6.0、最适温度为50°C、料液比为1∶9.0g·mL-1、酶浓度1.25％、水解时间6h,此时蛋白水解率为33.42±0.44％,水解液氨基酸总量是牦牛原血氨基酸总量的174倍.本实验为牦牛屠宰场血液废弃物资源利用提供理论基础,从而提高牦牛的综合使用价值.

摘要： 目的 探究碱性蛋白酶和风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白的工艺.方法 以蛋白水解率为指标,运用单因素与正交试验获得碱性蛋白酶水解工艺,在此基础上采用四因素三水平正交试验优化复合酶水解pH、水解温度、酶浓度、水解时间,获得碱性蛋白酶与风味蛋白酶分步水解工艺参数.结果 复合酶水解工艺为在底物浓度为1:6 g/mL、最适pH 9.0、最适温度为55°C、1.00％的碱性蛋白酶(w:w)水解1 h后,调节pH到7.0,添加0.75％的风味蛋白酶(w:w)继续水解5 h,可获得最高蛋白水解率为(30.77±0.18)％.结论 对研究酶水解牦牛血制备高附加值产品具有重要参考作用.

摘要： 试验以猪血为原料,利用风味蛋白酶水解猪血中的蛋白,以水解率为指标,得到酶解血液的最佳条件.通过单因素试验研究料液比、酶添加量、pH值、温度和水解时间对猪血蛋白水解率的影响;正交试验确定水解的较佳工艺条件为:料液比1 ∶ 10.5 g/mL、pH值6、水解温度50°C、酶浓度12 000 U/g蛋白、水解时间7 h.在此条件下,水解率为40.42％.

摘要： 为提高大豆蛋白资源的利用率,考察了不同蛋白酶(木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶)水解豆清液制备多肽,并选择风味蛋白酶进行工艺优化.以多肽得率为评价指标,探讨酶用量、酶解温度、初始pH和酶解时间对多肽产率的影响,并通过响应面优化提取工艺参数,确定了豆清液水解的最佳工艺条件为:酶用量0.09 g、温度54°C、pH 4.4、时间4 h,在此条件下多肽产率为71.10％;最后进行DPP H自由基清除率的测定.抗氧化实验结果表明,通过风味蛋白酶酶解制得的豆清多肽具有较好的抗氧化性,是优质抗氧化肽的良好来源.

摘要： 为降低芝麻血管紧张素Ⅰ转换酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽的苦味并明确其营养结构特性,在碱性蛋白酶(alcalase)水解基础上添加风味蛋白酶(flavourzyme),采用两步酶解芝麻粕蛋白的方法制备ACE抑制肽,评价其苦味强度及氨基酸组成,并进行质谱结构鉴定.结果表明,alcalalse/flavourzyme两步水解制备的ACE抑制肽得率和活性分别为77.88％和88.10％,高活性ACE抑制肽的分子质量主要集中于3 kDa以下,与单独alcalase水解相比,其苦味强度明显降低,必需氨基酸含量增加,营养价值较高,其中Trp-Gly-Gly-Leu(WGGL),Leu-Pro-Ser-Leu(LPSL)和Leu-Pro-Gly-Gly-Tyr(LPGGY)对ACE抑制活性的提高具有主要贡献作用.该研究为芝麻来源的高活性、低苦味降压肽的开发提供理论依据.

摘要： 以水解度、蛋白回收率和感官评价为指标,探究不同蛋白酶、酶解温度、pH及时间对豌豆蛋白酶解效率的影响,并对其酶解工艺进行优化,同时对最优酶解条件下获得的豌豆蛋白酶解产物的肽分子量分布和氨基酸组成进行分析.结果表明:豌豆蛋白最优酶解条件为采用风味蛋白酶酶解,温度50°C,pH 7.0,酶解时间24 h,在此条件下,豌豆蛋白水解度为22.63％,蛋白回收率为58.08％,且该酶解产物中小分子肽(<1 kDa)约为65.60％.豌豆蛋白酶解产物中必需氨基酸含量为39.16％,鲜味氨基酸含量为36.79％,甜味氨基酸含量为15.03％.

摘要： 本文选用了风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解,研究了pH、温度、酶浓度及反应时间对酶解反应的影响,并且系统的研究了酶解反应对大豆分离蛋白功能特性的影响.实验结果表明:风味蛋白酶的最佳水解条件为pH8.5,水解温度为50°C,加酶量为0.7％,水解时间为3h时,此条件下水解度为17.42％,且通过酶解反应大豆分离蛋白的各功能特性得到了良好的改善和提升.

摘要： 采用藏系绵羊血清为原料提取血清蛋白,用风味蛋白酶对其进行水解,研究反应时间、温度、PH和加酶量四个因素对水解过程的影响;以水解度(DH)为评价指标,在单因素试验的基础上,采用正交分析法,优化风味蛋白酶水解藏系绵羊血清蛋白的工艺条件.结果表明,在加酶量为1400U时,最佳的水解条件为:温度为60°C、pH为6、水解反应时间4h,水解度为29.20％.

摘要： 本实验利用风味蛋白酶(Flavourzyme)对浓缩乳清蛋白粉(WPC)进行水解,通过单因素实验和响应面法对酶解方法、酶解时间、酶添加量和底物浓度进行研究。最终确定采用振荡酶解方法,酶解时间6.19 h,酶与底物(蛋白质)比为0.07,底物浓度6.28％,得到的酶解度为46.77％。

摘要： 本文通过对蛋白酶的水解及其特性的研究,旨在开发一种新型的风味蛋白酶,应用到酱油等调味品中,提高氨基酸态氮含量,并赋予其特殊的鲜美滋味.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 采用Alcalase和Flavourzyme两种酶分别及协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物,并对其进行分离纯化.结果表明:Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的水解度为21.03％,可溶性蛋白含量为45.44mg/mL,比其它三种酶水解方式所得水解物可溶性蛋白含量高.在5mg/mL时,Alcalase+Flavourzyme水解所得水解物对DPPH·、·OH和O2-·的清除率分别为75.64％、63.05％和53.77％.Alcalase+Flavourzyme水解玉米蛋白所得水解物经离子交换层析、凝胶层析与HPLC等色谱方法分离获得三个新的抗氧化活性肽,它们的序列分别为Cys-Ser-Gln-Ala-Pro-Leu-Ala、Tyr-Pro-Lys-Leu-Ala-Pro-Asn-Glu和Tyr-Pro-Gln-Leu-Leu-Pro-Asn-Glu.

摘要： 本发明提供新型蛋白酶、编码该蛋白酶的DNA、蛋白酶的制备方法。蛋白酶具有以下①和②所示的性质：①分子量为21,000±1,000(SDS-PAGE测定)，②具有将含有以下所示的氨基酸序列(1)的肽或蛋白质在Gly-Phe位点切断，将含有氨基酸序列(2)的肽或蛋白质在Gly-Phe位点切断，将含有氨基酸序列(3)的肽或蛋白质在Ser-Leu位点切断的特异性蛋白酶活性。Pro-Gln-

摘要： 提供一种用于抑制弹性蛋白酶的口服组合物及其应用、弹性蛋白酶抑制剂、以及口服摄入弹性蛋白酶抑制剂的弹性蛋白酶活性抑制方法，所述口服组合物用于使因紫外线、活性氧等外在因素、生物体的代谢功能降低等而产生的生物体组织中的弹性蛋白的降低恢复、改善皮肤的衰老症状等。一种用于抑制弹性蛋白酶的组合物，其特征在于，含有咖啡黄葵(Abelmoschusesculentus)的种子的加工物或来源于咖啡黄葵的种子的特定化合物作为有效成分。

摘要： 本发明公开了一种测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，本发明以酪蛋白为底物，分别加入各酶催化，用三氯乙酸终止酶催化反应并与剩余底物相互作用形成缔合微粒使得共振散射强度急剧加强，据此建立了一个测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法，酶活力浓度——共振散射校正值曲线算出。本发明的优点在于：与现有的方法相比，本方法将酶催化反应与共振散射光谱结合起来，分析灵敏度高，选择性好，检测限低，操作简便，并且所用试剂无毒安全。

摘要： 本发明涉及获得单体形式的重组凝血酶原激活蛋白酶(rLopap)的方法；重组凝血酶原激活蛋白酶(rLOPAP)及其氨基酸序列。此外，本发明还涉及这种蛋白酶用于消除血液纤维蛋白原以及用作凝血酶原血异常诊断试剂盒的用途。本发明描述了21kDa的重组形式的凝血酶原激活蛋白酶的获得和表征，该蛋白酶被命名为rLopap(Lonomiaobliqua凝血酶原激活蛋白酶)，具有丝氨酸蛋白酶特征，不过它显示出如同lipocalin家族的保守氨基酸序列。该蛋白表现出促凝血活性，消除血液中的血纤维蛋白原并延长人血液/血浆的凝固时间。本发明介绍了重组形式的rLopap的获得，该rLopap显示出足够的活性以便进行临床药理学测定。

摘要： 本发明涉及弹性蛋白酶活性抑制剂、弹性蛋白酶活性抑制外用剂及弹性蛋白酶活性抑制饮食用组合物，其中，以担子菌X(Basidiomycetes‑X)FERM BP‑10011的干燥粉末或其提取组合物为有效成分。

摘要： 本发明涉及碱性蛋白酶高产菌株及碱性蛋白酶，其中菌株的分类命名为嗜碱芽孢杆菌Bacillus alcalophilus，保藏编号为：CGMCC No.5313，保藏日期：2011年9月30日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，酶由碱性蛋白酶高产菌株发酵得到。本发明中诱变获得的产碱性蛋白酶菌株是由嗜碱芽孢杆菌经过低能N+离子注入诱变而得的碱性蛋白酶高产菌株，有效地提高了菌株的产酶能力，其碱性蛋白酶的摇瓶活力最大值到30700U/mL，较出发菌株提高了37.7％。

摘要： 本发明提供新型蛋白酶、编码该蛋白酶的DNA、蛋白酶的制备方法。蛋白酶具有以下①和②所示的性质：①分子量为21,000±1,000(SDS－PAGE测定)②具有将含有以下所示的氨基酸序列(1)的肽或蛋白质在Gly－Phe位点切断，将含有氨基酸序列(2)的肽或蛋白质在Gly－Phe位点切断，将含有氨基酸序列(3)的肽或蛋白质在Ser－Leu位点切断的特异性蛋白酶活性。Pro－Gln－Gly－Phe－Gln－Gly－Pro(1)；Pro－Ala－Gly－Phe－Ala－Gly－Pro(2)；Gln－Thr－Gln－Ser－Leu－Val－Thr－Pro(3)。本发明公开了编码该蛋白酶的DNA、含有该DNA的转化体、使用该转化体的蛋白酶的制备方法。

摘要： 本发明公开了一种利用风味蛋白酶制作风味抗氧化中式香肠的方法，包括选料、切块、绞碎、拌料、腌制、灌肠、扎孔排气、束绳、漂洗、烘烤、成品整理和真空包装步骤；其中，中式香肠的配料为：肉100kg、食盐1.5~2.5kg、白砂糖8~12kg、大曲酒1~3kg、亚硝酸盐8~15g、水0~2kg、风味蛋白酶1~2g；烘烤条件为：45~55°C，80~90%RH，3h；45~55°C，70~80%RH，3h；45~55°C，40~60%RH，42h。本发明的利用风味蛋白酶制作风味抗氧化中式香肠的方法，通过在香肠制备过程中，添加1~2g/100kg肉的风味蛋白酶，在不延长加工周期的基础上，改善了中式香肠的质构，增强了中式香肠的香气和滋味，增强了其抗氧化能力和营养易吸收性，使产品老少咸宜。

摘要： 本发明公开了一种利用风味蛋白酶制作风味抗氧化中式香肠的方法，包括选料、切块、绞碎、拌料、腌制、灌肠、扎孔排气、束绳、漂洗、烘烤、成品整理和真空包装步骤；其中，中式香肠的配料为：肉100kg、食盐1.5~2.5kg、白砂糖8~12kg、大曲酒1~3kg、亚硝酸盐8~15g、水0~2kg、风味蛋白酶1~2g；烘烤条件为：45~55°C，80~90%RH，3h；45~55°C，70~80%RH，3h；45~55°C，40~60%RH，42h。本发明的利用风味蛋白酶制作风味抗氧化中式香肠的方法，通过在香肠制备过程中，添加1~2g/100kg肉的风味蛋白酶，在不延长加工周期的基础上，改善了中式香肠的质构，增强了中式香肠的香气和滋味，增强了其抗氧化能力和营养易吸收性，使产品老少咸宜。

摘要： 一种风味蛋白酶酶解制备ACE抑制肽的方法，将魔芋蛋白溶液的pH值调节为5‑7后，在温度为40‑60°C下加入风味蛋白酶，酶解3‑6h，得到酶解液；再将酶解液灭酶、冷却、调节pH值至魔芋蛋白等电点，经过离心后收集上清液；上清液经冷冻干燥后纯化得到ACE抑制肽。本发明采用风味蛋白酶酶解制备ACE抑制肽，缩减了成本，工艺简单，可进行产业化生产。该魔芋ACE抑制肽来源于天然植物蛋白，分子量小，稳定、安全、人体易吸收。