趋化作用

摘要： 【目的】探究细菌对代谢型趋化物的代谢速率对其趋化作用强弱的影响,同时为选育高效植物根际促生菌(Plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)菌株开辟新路径。【方法】采用基因克隆得到4种含不同强弱启动子序列的基因片段,将其连至表达载体pBBR1MCS-2,通过三菌杂交接合转移成功构建出生长速率基本一致的4种目标菌株。【结果】ACC脱氨酶活性及AcdS基因表达量测定结果说明AcdS基因表达量、ACC脱氨酶活与启动子强弱之间呈现正相关关系;定性趋化结果表明菌株的ACC代谢速率越高,其对ACC的趋化能力也越强;各菌株在小麦根际定殖数量及对小麦生物量影响结果显示:UW4△AcdS+Bra20A菌株定殖数量最多,UW4△AcdS和UW4△AcdS+Bra1A菌株定殖数量较少;UW4△AcdS+Bra20A菌株处理后小麦茎干及根部重量均最重,UW4△AcdS+Bra1A和UW4△AcdS菌株处理后的小麦茎干较轻,UW4△AcdS菌株处理后的小麦根部重量也最轻。【结论】ACC脱氨酶活性基本与启动子序列强弱呈正相关。菌株的ACC脱氨酶活性越高,其对ACC代谢速率越高,ACC代谢速率越高,其趋化作用越强,对植株的促生效果也越好。

摘要： 颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)包括原发性损伤和继发性质损伤,其中原发性损伤是损伤即刻造成的,没有有效的干预措施,而继发性损伤发生在原发性损伤之后,对病人的病情转归产生重要影响,损伤机制包括血脑屏障破坏、脑代谢紊乱、能量代谢异常、脑水肿和兴奋性毒性等,这些改变都与炎症反应有关[1]。

摘要： 收集吉林省人参主产区锈腐病病样,对其进行病原菌的分离鉴定,确定优势病原菌。采用菌丝生长速率法、孢子萌发法、菌丝干质量测量法3种方法相结合,测定Rg1不同质量浓度条件下对人参锈腐病菌(Ilyonectria robusta)的致病力影响。通过测定施加不同质量浓度Rg1后人参粗壮柱孢菌(I.robusta)侵染相关酶活力测定试验确定最佳Rg1添加量。开展了Rg1最适质量浓度条件下,pH值以及碳氮源对人参锈腐病菌菌丝生长的影响。研究结果表明,当Rg1质量浓度为2 mg/L时对粗壮柱孢菌的生长具有较强的促进作用。在此条件下,病原菌最适生长pH值为5.0,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为硝酸钾。明确了Rg1对人参锈腐病菌(I.robusta)具有明显的趋化性。

摘要： 亲环蛋白A(cyclophilin A,CypA)是人类细胞中首个发现具有肽基脯氨酸顺反异构酶活性的折叠酶,具有强大的促炎作用;CD147可以作为CypA的信号受体;二者通过细胞表面肝素结合,相互作用后可启动巨噬细胞中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)和核因子κB(nuclear factor kappa⁃B,NF⁃κB)信号途径,增加基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及其他炎症因子的表达。CypA/CD147的相互作用对炎症有调节作用,包括促进炎症反应和骨质吸收,并可参与多种全身疾病的病理过程。CypA和CD147可参与炎症细胞的趋化作用,增加炎症组织中白细胞的浸润,在牙周炎牙龈组织及龈沟液中的CypA及CD147表达随着炎症加重而增多,提示二者的相互作用促进牙周炎的进展,但该信号通路在牙周炎中的具体作用机制还有待进一步研究。

摘要： 为明确种子分泌物中酚酸是否影响大豆疫霉生长发育及侵染行为,文章采用高效液相色谱(HPLC)技术分析大豆疫霉抗病品种Williams82、感病品种Sloan及非寄主菜豆紫花油豆、玉米绥玉23种子分泌物中酚酸种类及含量,测定外源单一酚酸对大豆疫霉菌丝生长和游动孢子囊形成、游动孢子趋化性及成囊的影响.结果表明,不同作物和品种种子分泌物中酚酸种类及总含量存在差异,酚酸总量菜豆>大豆感病品种≥玉米≥大豆抗病品种;酚酸对大豆疫霉菌的影响与浓度相关,对菌丝生长和游动孢子囊形成抑制程度与浓度呈正相关;低浓度(<0.1μg·mL-1)下各酚酸吸引游动孢子,而高浓度(≥0.1μg·mL-1)下排斥游动孢子;浓度越高越刺激游动孢子成囊.种子分泌物中酚酸可作为信号分子被大豆疫霉识别,在高浓度下可排斥游动孢子从而保护作物,研究为防治大豆疫霉根腐病提供理论依据.

摘要： 亲环蛋白A(cyclophilin A,CypA)是人类细胞中首个发现具有肽基脯氨酸顺反异构酶活性的折叠酶,具有强大的促炎作用;CD147可以作为CypA的信号受体;二者通过细胞表面肝素结合,相互作用后可启动巨噬细胞中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)和核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号途径,增加基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及其他炎症因子的表达.CypA/CD147的相互作用对炎症有调节作用,包括促进炎症反应和骨质吸收,并可参与多种全身疾病的病理过程.CypA和CD147可参与炎症细胞的趋化作用,增加炎症组织中白细胞的浸润,在牙周炎牙龈组织及龈沟液中的CypA及CD147表达随着炎症加重而增多,提示二者的相互作用促进牙周炎的进展,但该信号通路在牙周炎中的具体作用机制还有待进一步研究.

摘要： G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)主要负责介导细胞内外跨膜信号转导功能,是重要的药物靶点.β-arrestin作为GPCRs行使功能的重要途径之一,其对调节GPCRs信号转导过程有重要意义.但目前对于β-arrestin如何与GPCRs相互作用并调控其信号转导功能尚不十分清楚.本文以趋化因子受体3(CC chemokine receptor 3,CCR3)为研究对象,构建了β-arrestin与CCR3的共表达体系,利用激光共聚焦荧光成像与荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术研究了β-arrestin与CCR3在活细胞水平的相互作用,利用RNAi和趋化实验考察了p-arrestin对CCR3稳转细胞趋化行为的调控作用,并在体外利用石英晶体微天平(quartz crystal microbalance,QCM)技术测定了β-arrestin突变体(R169E)与CCR3之间结合常数.结果显示,趋化因子CCL 11 (chemokine C-C motif ligand 11)刺激CCR3表达细胞,会使β-arrestin与CCR3在胞内的距离发生变化,β-arrestin蛋白被募集到细胞膜处,证明β-arrestin参与了CCR3介导的信号转导过程,二者存在显著相互作用.通过转染β-arrestin-siRNA将β-arrestin沉默后,CCL 11、CCL24诱导CCR3稳转细胞迁移数明显降低,而CCL5对CCR3稳转细胞的迁移效率未受到显著影响,表明不同趋化因子对CCR3与β-arrestin相互作用具有不同的调控效果,体外结合实验进一步证实β-arrestin与CCR3相互作用,β-arrestin突变体与CCR3的体外结合常数(KD)为1.35×10-7.综上所述,β-arrestin可以与CCR3发生相互作用,在CCR3介导的细胞跨膜信号转导及细胞趋化过程中发挥着重要作用.

摘要： 细胞能完成令人难以置信的“旅行”,有时甚至可以穿越整个身体。一般情況下,细胞依靠趋化作用(chemotaxis)导航,这是一种根据特定化学物质的浓度变化定位目标区域的方法。但是浓度梯度不能跨越很长的距离,因此科学家想知道,是什么引导细胞在长距离的旅行中,经过化学物质浓度的“高峰低谷”后不偏离方向。对这一过程的了解,或许能帮助研究人员更好地预测癌症扩散至全身的方式,或解释细胞如何在发育的胚胎内到达正确的位置。

摘要： 本文采用趋化试验的方法,将PrP106-126倍比稀释作用于巨噬细胞，计算趋化指数来研究PrP106-126对巨噬细胞的趋化活性，确定PrP106-126对巨噬细胞的最佳趋化浓度。结果发现PrP106-126对巨噬细胞有明显的趋化作用，趋化浓度在160ng/mL～640ng/ml之间，最佳趋化浓度是640ng/mL。用不同的激酶抑制剂作用于细胞，同时与巨噬细胞趋化因子fMLP和P物质进行比较，结果表明PrP106-126作用于巨噬细胞引发多种信号转导途径，这些作用途径与P物质作用途径相似。这些研究结果揭示了异常朊蛋白在从外周向中枢传播的过程中，巨噬细胞在朊蛋白病的发病过程中具有一定作用，PrP106-126诱导巨噬细胞的信号转导路径可能与P物质相关。这为传染性海绵状脑病的发病机制研究提供了新的思路和研究数据。

摘要： 本文以AM真菌一紫穗槐共生体为研究材料，测定AM真菌(AMF)与根瘤菌对寄主植物的菌根侵染顺序、侵染率，以及对二者趋化性进行模拟试验验证。通过对紫穗槐进行非接种(AM-+Rh-)、单接种(Rh+)、单接种(AM+)和双接种(AM++Rh+)，研究菌根真菌、根瘤菌对寄主植物侵染的时空变化;并采用根部微生物趋化试验手段研究AM真菌与根瘤菌间的关系。实验结果表明：在共生体形成期间，AMF与根瘤菌之间存在着一定的信号物质，彼此之间存在协尉促进作用;在25°C、28°C、31°C的不同处理条件下，通过对非接种(AM-+Rh-)、单接种(AM+)、双接种(AM++Rh+)三种情况下的侵染顺序、侵染率的变化及其根部分泌物对根瘤菌趋化性的研究分析可以得出，外界环境(温度)对AMF-寄主植物一根瘤菌三者共生体初始识别信号起到一定的调控作用。

摘要： 本发明公开了一个人类细胞来源的具有细胞趋化活性和促进细胞增殖作用的趋化素样因子CKLF1及其变异体，编码CKLF1及其变异体的核苷酸序列，以基因重组技术生产趋化素样因子的方法和抗CKLF1的抗体和拮抗剂。本发明进一步公开了含有有效剂量趋化素样因子和药学上可接受载体或赋形剂的药物组合，以及所趋化素样因子及其核酸编码序列在制备用于诊断或治疗免疫细胞功能异常疾病、多种原发性肿瘤、造血功能低下、肌肉萎缩、肌肉病变、脱发等病症等疾病的药物中的应用。

摘要： 叙述了以一般式(I)表示的N-(2-芳基丙酰基)-酰胺。本发明还叙述了其制备方法及其药物制剂。本发明的酰胺用于预防和治疗由于多形核白细胞(白细胞PMN)在发炎部位急剧补充而造成的组织损伤。具体的是，本发明涉及以一般式(I)表示的N-(2-芳基-丙酰基)酰胺的R对映体，其用于抑制由白介素8(IL-8)诱导的中性粒细胞趋化性。本发明的化合物用于治疗银屑病、溃疡性胆结石炎、肾小球性肾炎、急性呼吸功能不全、自发性纤维化和类风湿性关节炎。

摘要： 本发明公开了一个人类细胞来源的具有细胞趋化活性和促进细胞增殖作用的趋化素样因子CKLF1及其变异体,编码CKLF1及其变异体的核苷酸序列,以基因重组技术生产趋化素样因子的方法和抗CKLF1的抗体和拮抗剂。本发明进一步公开了含有有效剂量趋化素样因子和药学上可接受载体或赋形剂的药物组合,以及所趋化素样因子及其核酸编码序列在制备用于诊断或治疗免疫细胞功能异常疾病、多种原发性肿瘤、造血功能低下、肌肉萎缩、肌肉病变、脱发等病症等疾病的药物中的应用。

摘要： 叙述了以一般式(I)表示的N－(2－芳基丙酰基)－酰胺。本发明还叙述了其制备方法及其药物制剂。本发明的酰胺用于预防和治疗由于多形核白细胞(白细胞PMN)在发炎部位急剧补充而造成的组织损伤。具体的是，本发明涉及以一般式(I)表示的N－(2－芳基－丙酰基)酰胺的R对映体，其用于抑制由白介素8(IL－8)诱导的中性粒细胞趋化性。本发明的化合物用于治疗银屑病、溃疡性胆结石炎、肾小球性肾炎、急性呼吸功能不全、自发性纤维化和类风湿性关节炎。

摘要： 本发明公开了LAIR‑1分子与脂联素的相互作用对于T细胞活化作用影响的研究方法，包括步骤S1.探究APN与LAIR‑1之间的关系；S2.测定APN与LAIR‑1结合的结构域所在的位置；S3.探究APN球状区重组蛋白与LAIR‑1结合时，对于LAIR‑1下游SHP‑2的影响；S4.探究APN球状区重组蛋白对于T细胞活化作用的抑制影响；S5.T细胞抑制作用与T细胞中SHP‑2、ZAP‑70途径之间的关系；本研究证实：APN与LAIR‑1结合，结合位点在gAdp上；同时LAIR‑1与gAdp相互作用能够抑制T细胞活化，为脂联素在抗炎活性中的作用提供了研究基础。

摘要： 本发明属于微流控芯片领域，是一种利用层流和趋化作用分离细菌的微流控芯片装置。该装置包括分离细菌的微流控芯片和诱导试剂浓度控制系统两部分。其中微流控芯片是一种集成了诱导试剂入口、细菌入口、细菌分离通道、细菌收集出口和废液出口的近似“X”型的PDMS‑玻璃芯片；诱导试剂浓度控制系统由多组注射泵和注射器构成，可通过注射泵控制流量等参数，得到浓度随时间动态变化的诱导试剂。本发明，主要利用细菌在层流和化学诱导试剂作用下，趋向高吸引剂浓度和低驱斥剂浓度方向泳动的特性，以此实现从细菌混合液中分离感兴趣细菌的操作。本发明可用于食品安全、水质监测、制药工程、临床医学等领域的研究分析。

摘要： 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT-PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融合蛋白的甲醇诱导表达以及纯化鉴定等分子生物学技术和蛋白表达与纯化技术，实现人RANTES蛋白的分泌表达。为了便于人RANTES蛋白的分离纯化，在目的蛋白N端融合一个6×His纯化标签，并在His-tag和RANTES蛋白之间加入肠激酶(EK)酶切位点构建RANTES融合蛋白，然后通过亲和层析和EK酶切得到纯度较高、产量较大的人RANTES蛋白，该蛋白可用于制备治疗多发性硬化关节炎、类风湿性关节炎、器官移植排斥、心脑血管疾病、肿瘤以及HIV药物的用途。

摘要： 本发明涉及一种微流控芯片，一种实现白细胞趋化作用的微流控芯片，包括玻璃基板及胶体，所述胶体与玻璃基板紧密粘贴，形成一粘贴面，所述粘贴面上设置一细胞研究基本单元，所述细胞研究基本单元上设置纵向平行排列的第一、二主通道，所述第一主通道中内衬血管内皮细胞及加载悬浮白细胞、用于模拟人体内的中性粒细胞的微环境；所述第二主通道中加载趋化因子、用于模拟炎症病变组织；所述第一、二主通道中间设置横向平行排列的第一、二、三、四、五趋化通道，用于观察白细胞的趋化作用；本发明能够模拟人体毛细血管中的白细胞受到趋化因子刺激后发生的趋化现象，并且具有高通量、流动可控及实时追踪观察等优点，实现了对白细胞趋化作用进行快速、可视化的研究。

摘要： 本发明属于微流控芯片领域，是一种利用层流和趋化作用分离细菌的微流控芯片装置。该装置包括分离细菌的微流控芯片和诱导试剂浓度控制系统两部分。其中微流控芯片是一种集成了诱导试剂入口、细菌入口、细菌分离通道、细菌收集出口和废液出口的近似“X”型的PDMS-玻璃芯片；诱导试剂浓度控制系统由多组注射泵和注射器构成，可通过注射泵控制流量等参数，得到浓度随时间动态变化的诱导试剂。本发明，主要利用细菌在层流和化学诱导试剂作用下，趋向高吸引剂浓度和低驱斥剂浓度方向泳动的特性，以此实现从细菌混合液中分离感兴趣细菌的操作。本发明可用于食品安全、水质监测、制药工程、临床医学等领域的研究分析。

摘要： 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT－PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融合蛋白的甲醇诱导表达以及纯化鉴定等分子生物学技术和蛋白表达与纯化技术，实现人RANTES蛋白的分泌表达。为了便于人RANTES蛋白的分离纯化，在目的蛋白N端融合一个6×His纯化标签，并在His－tag和RANTES蛋白之间加入肠激酶(EK)酶切位点构建RANTES融合蛋白，然后通过亲和层析和EK酶切得到纯度较高、产量较大的人RANTES蛋白，该蛋白可用于制备治疗多发性硬化关节炎、类风湿性关节炎、器官移植排斥、心脑血管疾病、肿瘤以及HIV药物的用途。