WRKY转录因子

摘要： 【目的】探明马铃薯StWRKY转录因子的生物信息学特征及其在不同组织、低温和盐胁迫下的表达模式,揭示StWRKY转录因子在逆境下的调控规律,为进一步研究此转录因子的功能奠定基础。【方法】本试验以冀张薯12号马铃薯组培苗为材料,从马铃薯中克隆获得StWRKY基因,并对其进行生物信息学分析和功能的初步研究。【结果】StWRKY基因长度为747 bp,由172个氨基酸编码而成,相对分子量19921.58,理论等电点9.22,带负电残基总数21,带正电残基总数28,不稳定系数40.56。该蛋白质二级结构以无规曲线为主占40.1%,α-螺旋为37.4%、伸展链为15.1%、β-折叠为7.6%,是不稳定蛋白,属于亲水蛋白。通过进化树分析,与番茄同源性最高,为97.1%;利用RT-qPCR分析表明,表达谱分析中StWRKY基因的表达量在叶片中最高;功能初步分析,StWRKY基因的表达量在经过低温胁迫和盐胁迫处理6和7 h表达量显著增加,说明可能参与马铃薯对盐胁迫和低温的响应路径。【结论】StWRKY能够不同程度响应盐胁迫和低温胁迫,说明在马铃薯逆境反应机制中发挥不同作用,初步揭示了马铃薯StWRKY转录因子的功能,为进一步研究其功能提供依据。

摘要： 白叶枯病是一种严重影响水稻产量的细菌性病害。Xa21是第一个克隆的抗白叶枯病基因,具有广谱抗性,在水稻抗病育种中被广泛应用。转录因子的鉴定对解析Xa21介导的水稻抗白叶枯病分子机制具有重要意义。本研究构建了Xa21背景下的WRKY68-RNAi转基因水稻。与受体材料4021相比,转基因水稻中WRKY68蛋白质丰度下调,接种白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)后抗病性下降,证明WRKY68基因在Xa21介导的抗白叶枯病反应中发挥正调控作用。此外,转基因受体材料4021和感病对照TP309接种后不同时期和部位叶片中WRKY68的蛋白质丰度没有显著差异,表明WRKY68蛋白质的表达不受抗病基因Xa21和病原物Xoo诱导,推测其功能主要是调控下游基因的表达。WRKY68-RNAi转基因水稻接种后,PR1A、PR5、PR10A、PR-pha和PAL1等病程相关蛋白质表达丰度发生变化,表明相关基因可能在WRKY68基因的调控下参与下游抗病反应。

摘要： WRKY作为最先在植物中发现的转录因子,在植物生长发育等过程中发挥重要作用。为了更好地研究小立碗藓WRKY蛋白的结构与功能,该文以Pfam数据库中WRKY基因家族数据(登录号为PF03106)为材料,分析了小立碗藓(Physcomitrella patens)WRKY基因家族成员的理化性质、蛋白质的二级结构预测、染色体定位、内外显子分布及系统进化关系。结果表明:(1)小立碗藓WRKY基因家族成员共有38个基因,根据WRKY保守结构域个数和锌指结构类型分成Ⅰ、Ⅱ两大类,不含第Ⅲ类(锌指结构为C2HC型),其中部分基因WRKY保守结构域发生变异。(2)WRKY蛋白氨基酸长度在216~775 aa之间、相对分子质量在24.5~82.8 kDa之间,亚细胞定位显示WRKY家族成员蛋白质定位于细胞核中。(3)WRKY蛋白的二级结构以α-螺旋、延伸链、β-转角、无规卷曲四种构成元件构成,除PpWRKY11(α-螺旋为主)外,其余无规卷曲占比高达70%。(4)与拟南芥的系统进化关系表明,植物在进化过程中WRKY家族成员的数目与进化方式发生改变,WRKY基因家族成员外显子的个数为3~7个。(5)小立碗藓WRKY基因家族成员无规则分散于21条染色体上,并未形成基因簇。该研究通过分析WRKY基因家族的基本结构与性质,能为后续深入研究WRKY转录因子的功能奠定基础。

摘要： 【目的】在闽楠全基因组范围内鉴定WRKY家族成员,分析基因和蛋白序列结构特点及在闽楠幼苗缺磷胁迫下的表达特征,筛选响应缺磷逆境的WRKY基因,为进一步研究它们在楠木磷饥饿响应分子途径中的功能以及耐低磷胁迫分子辅助育种提供参考。【方法】利用WRKY蛋白序列的隐马尔科夫模型(pfam03106),经hmmsearch在闽楠蛋白数据库中检索,筛选WRKY基因。对获得的PbWRKYs利用Protaram、GSDS2.0、MEGA、Batch CD-Search、TBtools和ClustalX等软件进行基因结构、定位分析,蛋白理化性质、序列特征分析以及进化树构建。提取3年生闽楠植株的根、韧皮部和形成层、木质部和叶的RNA,进行转录组测序,分析PbWRKYs在不同组织中的表达特点。对半年生闽楠植株进行缺磷水培处理,60天后,分别取缺磷处理和对照的叶和根进行磷含量测定和转录组测序,分析磷缺乏条件下PbWRKYs表达特征,并对差异表达基因进行qPCR验证。【结果】鉴定到68个WRKY基因,命名为PbWRKY1-68,在各染色体上均有分布,第3号染色体上数量最多,内含子数目在1~28个之间,蛋白分子质量在19.09~115.56 kDa之间。所有PbWRKY均含有WRKY结构域及其特有的锌指结构。根据WRKY结构域数量及其所含锌指结构类型,分为3个亚类:亚类Ⅰ含2个WRKY结构域,锌指结构类型为C2H2型,共14个成员;亚类Ⅱ含1个WRKY结构域和1个C2H2型锌指结构,共47个成员,进化分析表明该亚类又分为5个经典子组Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd、Ⅱe,但其中PbWRKY37与上述子组进化上距离较远,独立成组;亚类Ⅲ含1个WRKY结构域和1个C2HC型锌指结构,共7个成员。PbWRKYs蛋白所含WRKY结构域氨基酸序列特征大部分为“WRKYGQK”型,但PbWRKY62的WRKY结构域变异为“WRKYGKK”。与其他植物相比,PbWRKYs蛋白中WRKY结构域的变异率较低。PbWRKYs的组织特异性表达模式可分为5类:韧皮部和形成层中相对表达量较低;木质部中表达量高而叶片中表达量较低;韧皮部和形成层表达量较高同时叶片中表达量较低;根中表达量相对较高;叶片中表达量高而根中表达量低。闽楠幼苗缺磷处理60天后,叶和根中表达差异达到2倍以上的PbWRKY基因共21个。它们在叶片中被强烈诱导,可能参与低磷条件下叶片中磷元素的运输及再分配过程;其中,PbWRKY52、PbWRKY55、PbWRKY56、PbWRKY65和PbWRKY665个基因的表达还在根中被抑制,表明它们除了参与低磷条件下叶片中磷元素再分配,还可能参与了根部磷的吸收和转运。【结论】闽楠中WRKY基因家族成员共有68个,其蛋白序列中WRKY结构域较保守。缺磷处理60天时,有21个PbWRKY基因参与磷胁迫响应,大部分基因可能主要在叶片中参与低磷条件下磷的运输和分配。PbWRKY52、PbWRKY55、PbWRKY56、PbWRKY65和PbWRKY66除了在叶片中发挥功能外,还可能参与低磷条件下根部对磷的吸收和转运。

摘要： 从甘蔗栽培种R570基因组数据库中挖掘到60个ShWRKY(ShWRKY1~ShWRKY600)基因,分布于10条染色体上,每条染色体上有3~13个ShWRKY基因.系统进化树分析表明60个ShWRKY蛋白中,属于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类的分别有10、32和18个.所有ShWRKY家族成员皆为亲水性核定位蛋白,且除ShWRKY13为稳定蛋白外,其余家族成员都不稳定.ShWRKY基因家族的外显子数目为1~5个,保守基序数目为3~7个.启动子区域序列预测显示,ShWRKY基因包含多个与胁迫、生长发育和激素响应相关的顺式作用元件.表达谱分析显示,ShWRKY基因在甘蔗不同组织中差异表达,且参与对黑穗病菌胁迫的响应过程.RT-qPCR检测结果显示,接种黑穗病菌7 d后,ShWRKY37基因在2个甘蔗抗病品种和1个感病品种中上调表达,而在另外1个感病品种中下调表达;ShWRKY51基因则在抗病品种中下调表达,而在感病品种应答早期(1 d)上调表达.

摘要： WRKY蛋白在植物胁迫响应和应答过程中发挥着重要作用。秋茄生长环境恶劣,生存压力使其进化出极强的胁迫响应能力,对各种胁迫的响应是决定秋茄逆境生存的重要因素。目前,关于秋茄WRKY基因家族的研究报道较少。对秋茄WRKY基因家族进行全面的研究,共鉴定出71个KcWRKY基因。结构域分析和进化分析结果表明,KcWRKY基因高度保守且分为3组。保守基序分析结果表明,同组的KcWRKY基因基序分布一致而组间差异显著,说明同组的KcWRKY基因可能具有相似的功能。染色体定位和复制关系表明,71个KcWRKY基因不均匀分布在秋茄基因组18条染色体上,存在4对串联重复基因和大量片段复制基因,这些基因可能在秋茄胁迫响应进化历程中发挥了重要作用。根据KcWRKY基因在不同器官的表达模式推测KcWRKY71参与调节编码线粒体和叶绿体蛋白的胁迫响应,KcWRKY66参与秋茄叶和果衰老的调节。本研究揭示了秋茄WRKY转录因子的基本结构与性质,研究结果能为后续深入研究秋茄WRKY转录因子的功能奠定基础。

摘要： 【目的】克隆蒜芥茄WRKY1基因(SsWRKY1),并分析其在黄萎病病原菌胁迫下的表达模式,为探究WRKY1基因在野生蒜芥茄黄萎病抗性中的调控机制提供理论参考。【方法】利用染色体步移技术克隆SsWRKY1基因,通过在线生物信息学软件进行序列分析及构建系统发育进化树;采用GFP融合蛋白表达法对WRKY1蛋白进行亚细胞定位,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SsWRKY1基因在不同组织及接种黄萎病病原菌后不同时间的相对表达量。并分析9种野生茄材料接种黄萎病病原菌后的病情指数与WRKY1基因表达变化量的相关性。【结果】克隆获得的SsWRKY1基因(GenBank登录号MZ846202)ORF序列长度为1224 bp,编码407个氨基酸残基,蛋白相对分子量为44.87 kD,理论等电点(p I)为6.91,属于亲水性不稳定蛋白,亚细胞定位于细胞核,符合转录因子特征。SsWRKY1蛋白含有2个WRKY保守结构域和C2H2型锌指结构,属于Ⅰ类WRKY转录因子,其二级结构主要由α-螺旋(7.13%)、β-折叠(4.67%)、无规则卷曲(73.71%)和延伸链(14.50%)组成。SsWRKY1蛋白与番茄、野生潘那利番茄、野生番茄、马铃薯WRKY1蛋白的亲缘关系较近。SsWRKY1基因在根和茎的相对表达量显著高于叶中的相对表达量(P<0.05,下同)。黄萎病病原菌接种后不同时间,SsWRKY1基因的相对表达量均低于对照组(无菌水接种),但仅在24 h时二者差异达显著水平。9种野生茄材料接种黄萎病病原菌后的病情指数与接种前后WRKY1基因表达变化量间呈显著正相关。【结论】SsWRKY1属于第Ⅰ类WRKY转录因子,序列高度保守,在细胞核中表达,其基因具有组织表达特异性,黄萎病菌胁迫后该基因的表达下调,推测WRKY1在野生茄黄萎病抗性中起负调控作用。

摘要： WRKY转录因子参与植物生长发育以及胁迫响应等生命活动的调控。尽管棉花GhWRKY的研究已有报道,但有关GhWRKYⅠ亚家族成员的功能还知之甚少。研究聚焦陆地棉(Gossypium hirsutum)GhWRKYⅠ亚家族成员的全基因组鉴定,以期筛选到参与棉花种子萌发调控的GhWRKY成员;基于陆地棉基因组数据库,应用组学工具对陆地棉GhWRKYⅠ亚家族成员进行鉴定,分析基因结构、蛋白保守基序、保守结构域和蛋白理化性质以及进化关系;基于转录组数据分析GhWRKYⅠ成员在不同组织和5种非生物胁迫下的表达谱;定量PCR(qPCR)检测候选GhWRKY在发育种子的表达特性。结果表明,从陆地棉基因组共鉴定到35个GhWRKYⅠ亚家族基因,不均匀分布于A和D亚基因组的19条染色体上;GhWRKYⅠ蛋白由331~769个氨基酸组成,均为亲水性蛋白并定位于细胞核;GhWRKYⅠ亚家族基因具有3~6个外显子和2~5个内含子。GhWRKY3、GhWRKY6、GhWRKY7、GhWRKY11、GhWRKY12和GhWRKY15未检测到5'-UTR,其余29个GhWRKYⅠ亚家族基因则含有5'-UTR和3'-UTR。仅发现GhWRKY11蛋白C端WRKY保守结构域WRKYGQK序列突变为WRNYGQK,GhWRKYⅠ亚家族成员存在着3种不同的进化方向。转录组数据分析表明,GhWRKYⅠ家族成员在不同组织以及应对不同非生物胁迫呈现差异化表达模式。qPCR分析揭示,GhWRKY24在棉籽萌发72 h内持续上调表达,预示着GhWRKY24可能参与调控棉籽萌发过程。

摘要： 为了挖掘玉米抗旱相关WRKY转录因子,对干旱-复水处理下差异表达的玉米WRKY基因进行鉴定,并对其蛋白质理化性质、系统进化、染色体分布和复制关系、基因结构和蛋白质保守基序、启动子区顺式作用元件及干旱-复水条件下的表达量等进行分析。结果表明,共鉴定筛选出51个差异表达的玉米WRKY基因,编码氨基酸数目介于99~729个,分子质量介于11.22~78.73 ku,等电点介于4.58~12.26;WRKY基因分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,其中Ⅱ又分为Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd、Ⅱe 5个亚组;WRKY基因不均等分布在10条染色体上,存在2对串联复制和16对片段复制;外显子数目为1~12个,大部分WRKY基因(41个)含有2~4个保守基序,且同一组中的WRKY成员具有相似的基序组成;启动子区含有ABRE、AuxRR-core、TCA-element、TC-rich repeats、TGACG-motif、LTR、MBS、TATC-box、P-box、CGTCA-motif、GC-motif、TGA-element、GARE-motif等植物激素及非生物胁迫相关的顺式作用元件。干旱-复水处理下,51个玉米WRKY基因呈现出不同表达模式,其中ZmWRKY1、ZmWRKY10、ZmWRKY16、ZmWRKY28、ZmWRKY30、ZmWRKY33、ZmWRKY42、ZmWRKY65、ZmWRKY68、ZmWRKY78、ZmWRKY96、ZmWRKY99、ZmWRKY100、ZmWRKY102和ZmWRKY111等15个基因正向响应干旱胁迫,ZmWRKY87负向响应干旱胁迫,它们是今后深入研究玉米WRKY家族响应干旱的候选基因。

摘要： 艾(Artemisia argyi)是常用的中草药和灸用原料植物,具有重要的药用和经济价值,然而其药用活性成分的合成调控研究鲜有报道。WRKY转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,在植物生长发育、抗逆以及次生代谢合成调控等方面发挥重要作用。本研究基于转录组数据系统鉴定艾的WRKY家族转录因子,分析其蛋白理化性质、进化关系和保守基序等特性,并研究该家族基因在茉莉酸胁迫下的表达模式。实验结果表明,从转录组水平共鉴定到37个AarWRKY转录因子,其氨基酸数目为119-547个,分子量为13.4-59.8 kDa,理论等电点为4.86-10.03。根据拟南芥WRKY家族分类,34个AarWRKY蛋白归类在I、II、III三组,而3个蛋白未归类。AarWRKY蛋白均具有保守的WRKY结构域,且同一组蛋白具有相似的保守基序。基因表达谱分析以及利用qRT-PCR方法检测基因表达差异发现,外源茉莉酸甲酯处理后,6个AarWRKY基因的表达发生了显著差异,其中3个基因上调表达,3个基因下调表达。进一步蛋白互作网络预测发现这些差异表达的AarWRKY基因可能参与JA响应和萜类化合物的生物合成调控等途径。本研究为艾WRKY家族基因的功能研究及其在艾叶活性成分累积中的调控作用解析奠定基础。

摘要： 从茶树叶片中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为CsWRKY57like.氨基酸序列比对及进化树分析发现CsWRKY57like具有一个典型的WRKY结构域,且与拟南芥WRKY57和已报道的CsWRKY57同源性较高,同属于第Ⅱ类c亚族.实时荧光定量PCR表明CsWRKY57like的表达与EGCG3"Me的积累规律一致,均在高EGCG3"Me含量的茶树品种中明显增强.亚细胞定位和转录活性分析显示CsWRKY57like定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性.体外凝胶阻滞试验(EMSA)及双荧光素酶瞬时表达分析显示,CsWRKY57like能与EGCG3"Me生物合成相关基因CsLAR,CsDFR和CCoAOMT启动子区域的W-box(C/T)TGAC(T/C)元件结合,并激活它们的活性.这些结果表明CsWRKY57like可能通过直接调控CsLAR,CsDFR和CCoAOMT等相关基因的表达来参与EGCG3"Me生物合成的过程,加深了对茶树EGCG3"Me生物合成转录调控机制的认识,为特异性茶树种质资源的选育奠定了理论基础.

摘要： 从茶树叶片中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为CsWRKY57like.氨基酸序列比对及进化树分析发现CsWRKY57like具有一个典型的WRKY结构域,且与拟南芥WRKY57和已报道的CsWRKY57同源性较高,同属于第Ⅱ类c亚族.实时荧光定量PCR表明CsWRKY57like的表达与EGCG3"Me的积累规律一致,均在高EGCG3"Me含量的茶树品种中明显增强.亚细胞定位和转录活性分析显示CsWRKY57like定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性.体外凝胶阻滞试验(EMSA)及双荧光素酶瞬时表达分析显示,CsWRKY57like能与EGCG3"Me生物合成相关基因CsLAR,CsDFR和CCoAOMT启动子区域的W-box(C/T)TGAC(T/C)元件结合,并激活它们的活性.这些结果表明CsWRKY57like可能通过直接调控CsLAR,CsDFR和CCoAOMT等相关基因的表达来参与EGCG3"Me生物合成的过程,加深了对茶树EGCG3"Me生物合成转录调控机制的认识,为特异性茶树种质资源的选育奠定了理论基础.

摘要： 从茶树叶片中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为CsWRKY57like.氨基酸序列比对及进化树分析发现CsWRKY57like具有一个典型的WRKY结构域,且与拟南芥WRKY57和已报道的CsWRKY57同源性较高,同属于第Ⅱ类c亚族.实时荧光定量PCR表明CsWRKY57like的表达与EGCG3"Me的积累规律一致,均在高EGCG3"Me含量的茶树品种中明显增强.亚细胞定位和转录活性分析显示CsWRKY57like定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性.体外凝胶阻滞试验(EMSA)及双荧光素酶瞬时表达分析显示,CsWRKY57like能与EGCG3"Me生物合成相关基因CsLAR,CsDFR和CCoAOMT启动子区域的W-box(C/T)TGAC(T/C)元件结合,并激活它们的活性.这些结果表明CsWRKY57like可能通过直接调控CsLAR,CsDFR和CCoAOMT等相关基因的表达来参与EGCG3"Me生物合成的过程,加深了对茶树EGCG3"Me生物合成转录调控机制的认识,为特异性茶树种质资源的选育奠定了理论基础.

摘要： 从茶树叶片中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为CsWRKY57like.氨基酸序列比对及进化树分析发现CsWRKY57like具有一个典型的WRKY结构域,且与拟南芥WRKY57和已报道的CsWRKY57同源性较高,同属于第Ⅱ类c亚族.实时荧光定量PCR表明CsWRKY57like的表达与EGCG3"Me的积累规律一致,均在高EGCG3"Me含量的茶树品种中明显增强.亚细胞定位和转录活性分析显示CsWRKY57like定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性.体外凝胶阻滞试验(EMSA)及双荧光素酶瞬时表达分析显示,CsWRKY57like能与EGCG3"Me生物合成相关基因CsLAR,CsDFR和CCoAOMT启动子区域的W-box(C/T)TGAC(T/C)元件结合,并激活它们的活性.这些结果表明CsWRKY57like可能通过直接调控CsLAR,CsDFR和CCoAOMT等相关基因的表达来参与EGCG3"Me生物合成的过程,加深了对茶树EGCG3"Me生物合成转录调控机制的认识,为特异性茶树种质资源的选育奠定了理论基础.

摘要： WRKY转录因子是植物中一类重要的调控因子,调控植物的多种代谢和反应.以甜瓜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对甜瓜中的WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析.结果表明,甜瓜至少有65个WRKY转录因子,蛋白序列长度为97 769;甜瓜WRKY转录因子可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3大类,它们处于进化树的不同分支.除保守的WRKYGQK序列外,共发现WRKYGKK和WRKSYYR 2个变异的WRKY结构域类型.

摘要： WRKY转录因子是植物中一类重要的调控因子,调控植物的多种代谢和反应.以甜瓜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对甜瓜中的WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析.结果表明,甜瓜至少有65个WRKY转录因子,蛋白序列长度为97 769;甜瓜WRKY转录因子可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3大类,它们处于进化树的不同分支.除保守的WRKYGQK序列外,共发现WRKYGKK和WRKSYYR 2个变异的WRKY结构域类型.

摘要： WRKY转录因子是植物中一类重要的调控因子,调控植物的多种代谢和反应.以甜瓜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对甜瓜中的WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析.结果表明,甜瓜至少有65个WRKY转录因子,蛋白序列长度为97 769;甜瓜WRKY转录因子可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3大类,它们处于进化树的不同分支.除保守的WRKYGQK序列外,共发现WRKYGKK和WRKSYYR 2个变异的WRKY结构域类型.

摘要： WRKY转录因子是植物中一类重要的调控因子,调控植物的多种代谢和反应.以甜瓜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对甜瓜中的WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析.结果表明,甜瓜至少有65个WRKY转录因子,蛋白序列长度为97 769;甜瓜WRKY转录因子可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3大类,它们处于进化树的不同分支.除保守的WRKYGQK序列外,共发现WRKYGKK和WRKSYYR 2个变异的WRKY结构域类型.

摘要： WRKY转录因子是植物中一类重要的调控因子,调控植物的多种代谢和反应.以甜瓜基因组数据为材料,利用生物信息学手段对甜瓜中的WRKY转录因子进行了全基因组鉴定与分析.结果表明,甜瓜至少有65个WRKY转录因子,蛋白序列长度为97 769;甜瓜WRKY转录因子可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3大类,它们处于进化树的不同分支.除保守的WRKYGQK序列外,共发现WRKYGKK和WRKSYYR 2个变异的WRKY结构域类型.

摘要： 本发明公开了一种岷江百合WRKY转录因子基因LrWRKY4，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述，编码如SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白质，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实LrWRKY4基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明抗真菌LrWRKY4基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草具有很强的抗真菌活性，实验结果显示超表达LrWRKY4的转基因烟草对稻黑孢霉、禾谷镰刀菌、轮枝镰刀菌、葡萄座腔菌、茄腐镰刀菌的侵染具有很高水平的抗性。

摘要： 本发明公开了一种岷江百合WRKY转录因子基因LrWRKY3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所述，编码如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的蛋白质，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实LrWRKY3基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明抗真菌LrWRKY3基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的抗真菌侵染能力，实验结果显示超表达LrWRKY3的转基因烟草叶片对稻黑孢霉、葡萄座腔菌、禾谷镰刀菌、轮枝镰刀菌、茄腐镰刀菌等五种病原真菌的侵染有很强的抗性。

摘要： 本发明公开了转录因子DoWRKY69或其编码基因在调控植物种子在盐胁迫下萌发中的应用。转录因子DoWRKY69或其编码基因DoWRKY69在调控植物种子在盐胁迫下萌发中的应用，所述的转录因子DoWRKY69的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明从铁皮石斛类原球茎中克隆得到的属于铁皮石斛WRKY转录因子DoWRKY69的编码基因WRKY转录因子基因DoWRKY69，WRKY转录因子DoWRKY69作为正调控因子参与了在盐胁迫下植物种子的萌发，通过转基因及功能鉴定证实超量表达WRKY转录因子DoWRKY69，转基因种子在盐胁迫下萌发率提高。因此，WRKY转录因子WRKY69或其编码基因在抗盐作物品种选育过程中具有重要的理论意义及应用价值。

摘要： 本发明涉及一种紫花苜蓿WRKY转录因子在提高转基因植物耐铝毒和耐盐胁迫中的应用。其中，第一方面，本发明公开了的WRKY转录因子蛋白是由如SEQID N0.2所示氨基酸序列组成的蛋白质；第二方面，本发明还提供了一种编码上述蛋白质的核酸序列，如SEQ ID N0.1所示；第三方面，本发明提供了紫花苜蓿WRKY转录因子蛋白及其编码基因在提高转基因植物耐铝毒和耐盐胁迫中的应用；第四方面，本发明提供了含有上述MsWRKY22转录因子基因的遗传工程转化的宿主细胞；第五方面，本发明提供了MsWRKY22核苷酸序列或氨基酸序列或克隆载体或表达载体或宿主细胞在基因工程中的应用。本发明为利用基因工程技术提高紫花苜蓿耐铝毒、耐盐能力的分子育种提供了理论依据，具有十分重要的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种玉米WRKY类转录因子ZmWRKY112及其编码基因与应用，具体为根据转录因子ZmWRKY112基因序列设计引物，利用PCR技术从玉米自交系B73 cDNA中扩增得到ZmWRKY112基因。该基因编码具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID N0：1；2)将序列表中的SEQ ID NO：1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与W盒(TTGACC/T)顺式元件相互作用提高植物抗逆功能的蛋白质。玉米原生质体亚细胞定位实验表明，ZmWRKY112蛋白具有转录因子的核定位特征。本发明的ZmWRKY112基因用于玉米转化，获得的转基因玉米对抗盐胁迫能力明显增强。本发明为植物抗逆基因工程提供了重要的基因资源，对提高农作物产量具有重要意义。

摘要： 本发明提供一种青蒿WRKY类转录因子AaWRKY4基因及应用。AaWRKY4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；AaWRKY4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。过量表达AaWRKY4基因提高青蒿中青蒿素含量的方法如下：从青蒿中克隆青蒿WRKY类转录因子AaWRKY4基因；构建含AaWRKY4基因的植物表达载体；用根癌农杆菌介导，将AaWRKY4基因转入青蒿并再生出植株；PCR检测目的基因整合情况；HPLC‑ELSD测定转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明提供的转AaWRKY4基因青蒿的青蒿素含量比非转化青蒿提高了35％‑50％，为青蒿素的规模化生产提供了高产、稳定的植物基源。

摘要： 本发明公开了一种岷江百合WRKY转录因子基因LrWRKY2，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所述，编码如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的蛋白质，本发明通过功能基因组学相关技术研究证实LrWRKY2基因具有提高植物抗真菌的功能，将本发明抗真菌的LrWRKY2基因构建到植物表达载体上并转入烟草中过量表达，转基因烟草植株具有很强的抗真菌侵染能力，实验结果显示超表达LrWRKY2的转基因烟草对稻黑孢霉、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌、葡萄座腔菌、人参链格孢的侵染具有高水平的抗性。

摘要： 本发明提供了在培养过程中具有调节曲霉硫同化基因表达的功能的转录因子，以及编码该蛋白的基因。换句话说，涉及了含有如SEQ IDNO：3所示的氨基酸序列的蛋白质，以及编码如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列或含有如SEQ ID NO：2所示的碱基序列的基因。

摘要： 本发明涉及植物基因工程技术领域，公开了一种花生WRKY转录因子AhWRKY30及其在烟草抗青枯病中的应用。该基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。通过Gateway系统构建CaMV 35S启动子驱动的过量表达载体经农杆菌介导转化感青枯病烟草品种红花大金元，通过对转基因植株进行分子检测和青枯菌接种鉴定，其在烟草中超量表达可显著提高转基因烟草对青枯病的抗性，表明AhWRKY30可能参与了植物对青枯病的抗性反应。本发明为利用基因工程手段培育抗青枯病植物新品种提供了重要的基因资源，具有重要的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种调控烟草花丝长度的WRKY转录因子基因NtWRKY65及其应用，该NtWRKY65核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明通过构建烟草基因NtWRKY65的植物表达载体，经农杆菌介导转化，侵染野生型烟草，获得NtWRKY65‑OE转基因烟草植株，NtWRKY65‑OE花丝长度显著缩短，而雌蕊无明显变化，在烟草杂交制种过程中，以NtWRKY65‑OE花丝长度变短品种作为母本，不进行人工去雄，直接用父本花粉授粉获得杂交种种子，NtWRKY65‑OE花丝长度变短品种通过人工辅助授粉完成自交繁种，可省去母本不育系转育或人工去雄的步骤，提高了烟草杂种优势利用的杂交制种效率。