PARP-1

摘要： 最新统计数据表明,原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界上第二大致病率肿瘤,它有很高的复发率及很低的5年生存率,且它的治疗选择有限。然而每年的新发例数却在逐年增加。找到原发性肝癌复发、转移及耐药的机制是我们亟待解决的问题。聚ADP核糖聚合酶-1 (poly(ADP)-ribose polymerase, PARP1)是一个分子量为116 kDa的细胞核蛋白,它在多种肿瘤当中异常表达,包括卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺以及原发性肝癌。近年来目前上市的PARP抑制剂(PARP inhibitor, PARPi)药物,在乳腺及卵巢癌中应用广泛,但在原发性肝癌中不尽如意。原发性肝癌具有异质性,其发生与发展是一个多途径、多基因参与及多步骤的过程,其发病率与病死率在中国逐年上升。研究发现,PARP1与HCC的发生、发展及治疗密切相关,本文从PARP1的分子结构及生物学功能、PARPi的作用机制、PARP1在HCC组织中的表达情况、PARPi与HCC治疗的关系等4个方面对PARPi在HCC中作用的研究进展作一系统综述,为临床治疗HCC寻找新的治疗策略。

摘要： 目的探讨吐根碱逆转耐药肝癌耐药细胞HepG2/DDP的耐药性及机制。方法采用顺铂(DDP)大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法构建肝癌耐药细胞株HepG2/DDP;采用反向虚拟筛选、分子对接、表面离子体共振实验和免疫印迹实验寻找吐根碱逆转耐药的靶标;转染实验验证吐根碱作用靶标;细胞毒实验检测吐根碱联合DDP对HepG2/DDP细胞增殖的抑制作用;流式细胞实验验证吐根碱的增敏作用;免疫印迹实验分析凋亡相关蛋白Bcl2、BAX及Cleaved-caspase-3的表达。结果吐根碱能够增强DDP对HEPG2/DDP细胞的敏感性,使HEPG2/DDP对DDP的耐药指数(RI)由3.69降低到0.93;反向虚拟筛选、分子对接、表面离子体共振实验揭示吐根碱和PARP-1有良好的结合作用;免疫印迹实验显示吐根碱在细胞内显著抑制PARP-1活性;siRNA干扰实验显示HepG2/DDP细胞中PARP-1表达抑制后吐根碱增敏DDP细胞毒性的作用基本消失;流式细胞实验显示吐根碱能够增强DDP对HepG2/DDP细胞的促凋亡作用。结论吐根碱能够增强HepG2/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能与其抑制PARP-1的活性有关。

摘要： 旨在筛选PK-15细胞中与猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)复制起始区(originofreplication,Ori)互作的细胞蛋白谱,并初步探究PARP1蛋白对PCV2复制的调控。利用DNA-proteinpulldown结合LC-MS/MS方法筛选PCV2复制起始区DNA互作蛋白;对互作蛋白进行GO分析以及KEGG通路富集分析,并绘制蛋白互作网络图。在对互作蛋白进行分析的基础上,选择聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP1)蛋白,开展了深入研究。构建了PARP1蛋白以及PCV2复制蛋白Rep真核表达质粒,并利用DNA-proteinpulldown及DNAIP试验验证PARP1蛋白与PCV2Ori的互作;通过Co-IP试验,研究了PARP1蛋白与PCV2Rep蛋白的互作;在细胞中过表达或沉默PARP1蛋白,通过qPCR方法检测对PCV2复制的影响。本研究共鉴定到130种可能与Ori互作的宿主蛋白,其中,与DNA功能相关的蛋白共有45种,主要涉及宿主DNA损伤修复及DNA复制功能;验证了PARP1蛋白与PCV2基因组Ori以及Rep蛋白互作。用siRNA沉默PARP1蛋白表达后,PCV2基因组复制效率显著下降,瞬时过表达PARP1蛋白,PCV2基因组复制效率显著提高。综上所述,本研究筛选到130种可能与PCV2Ori互作的细胞蛋白,发现PARP1蛋白可结合PCV2基因组Ori及Rep蛋白并促进PCV2的复制,为PCV2药物靶点选择及PCV2复制起始过程研究奠定了基础。

摘要： 目的探讨白藜芦醇对胰腺癌吉西他滨化疗耐药的影响及其可能的分子机制。方法吉西他滨持续低浓度递增诱导法筛选耐药细胞株,高通量RNA-seq分析差异表达基因并进行通路富集,彗星实验检测DNA损伤,Western blotting检测相关通路指标,Chou-Talalay计算药物联合协同指数,AutoDock预测小分子与蛋白质对接靶点。结果耐药细胞株较亲本细胞株DNA损伤修复相关通路活化,白藜芦醇加强吉西他滨诱导的DNA损伤(P<0.01),白藜芦醇可以抑制DNA损伤修复关键分子PARP1(poly ADP-ribose polymerase 1)表达并与吉西他滨发挥协同作用(CI<1),白藜芦醇与PARP1的CAT结构域存在预测对接靶点。结论白藜芦醇能够抑制化疗耐药关键分子PARP1,并促进胰腺癌对吉西他滨的化疗敏感性。

摘要： 目的探讨PARP1的表达水平与结直肠癌预后的关系。方法从基因表达综合数据库(GEO)和癌症基因图谱(TCGA)数据库下载PARP1基因的RNA-Seq数据,使用R软件绘制散点图并分析PARP1在结直肠癌和癌旁组织中的表达水平,将PARP1分为高、低表达组并进行生存分析、亚组生存分析和GSEA基因富集分析,筛选与PARP1相关的基因并进行GO、KEGG富集分析,鉴定与PARP1共表达的基因。结果在GSE184093、GSE100179、GSE44076、GSE110225和TCGA数据集中,PARP1在肿瘤样本中的mRNA表达显著高于其在非肿瘤样本中的表达(P<0.05);以6.93作为阈值,分为PARP1高、低表达组,PARP1高表达组患者的总体生存期(OS)、无病生存期(DFS)、疾病特异性生存期(DSS)和无进展生存期(PFS)较PARP1低表达组显著缩短(P<0.05)。在结直肠癌和癌旁组织中共筛出差异表达基因2629个,其中有765个基因与PARP1显著相关,GO分析显示PARP1相关基因与DNA聚合酶结合、组蛋白激酶活性、血小板衍生生长因子结合、卡哈尔体蛋白定位、端粒蛋白定位等有关;KEGG分析显示PARP1相关基因与DNA复制、细胞周期、错配修复等通路有关。结论PARP1在结肠癌中表达上调,并与结直肠癌患者不良预后有关。

摘要： 目的 研究RYBP通过激活PARP-1依赖的Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155敏感性的作用.方法 使用CCK-8实验和流式细胞实验分析YM155对过表达RYBP和对照组细胞的抑制率及细胞死亡百分比,使用Western blotting分析YM155处理细胞后Parthanatos相关蛋白质表达的变化.结果 通过YM155处理后,过表达RYBP组的细胞抑制率及细胞死亡百分比明显高于对照组;过表达RYBP能明显激活PARP-1,并在YM155处理后,过表达组的PARP-1活化更为显著;YM155处理后,细胞核内PAR积累,AIF由线粒体进入细胞核,且在RYBP过表达组的上述效应更为显著.结论 RYBP能通过激活PARP-1/PAR/AIF介导的Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155的敏感性.

摘要： OBJECTIVE To investigate the pharmacological effect and mechanism of Sanguisorba officinalis L.(SOL)in non-small cell lung cancer(NSCLC)in vitro and in vivo based on network pharmacology.METHODS Network pharmacology was used to analyze the improving effect of SOL on NSCLC and possible targets.Cell counting kit 8(CCK-8)and 5-ethynyl-2′-deoxyuridine(EdU)staining,Western blotting,flow cytometry of AnnexinⅤ/PI,Hoechst 33342/PI staining detection and immunofluorescence were utilized in vitro.H&E staining,immunohistochemistry staining and Western blotting were performed in vivo.RESULTS Based on network prediction,we analyzed the 208 common targets of SOL and NSCLC.36 core targets in 208 common targets were obtained through cytoscape analysis.And the top 10 core targets included Akt,mTOR,EGFR,etc..KEGG analysis showed that PI3K-Akt signaling pathway was the most likely pathway.Furthermore,the mechanism study found that SOL could activate the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in vitro and in vivo.The anti-proliferative effect of SOL in A549 and H1299 cells was measured and validated by CCK-8 and EdU assay.Immunohistochemical results of Ki67 showed that SOL effectively inhibited tumor growth in vivo.SOL also significantly inhibited the migration and invasion of A549 and H1299 cells.SOL significantly increased the percentage of cells with PI signal in A549 and H1299,and the process of cell death of A549 cells indicated that SOL induced apoptosis.The PARP-1 and caspase-3 in A549 and H1299 were found to be activated in a dose manner.The results in vivo were consistent with those in vitro.CONCLUSION SOL-induced,caspase-3-mediated apoptosis via the induction of the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in NSCLC,which further clarified the mechanism of SOL in the inhibition of NSCLC,and thereby provided a possibility for SOL to serve as a novel therapeutic agent for NSCLC in the future.

摘要： 目的 研究二甲双胍通过调控多聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP-1)的活性,对Ⅱ型糖尿病肾脏的保护作用及其机制.方法 Wistar大鼠分为正常组(n=12),DN组(n=12),DN+DPQ组(n=12),DN+二甲双胍组(n=12)以及DN+二甲双胍+DPQ组(n=12).建模后检测各组大鼠空腹血糖含量,尿素氮含量,肌酐含量以及尿蛋白浓度等生化指标,HE染色和TUNEL染色观察肾脏病理情况,Western blot检测PARP-1,iNOS,NF-κB及caspase-3的蛋白表达,ELISA检测炎性因子TNF-α及IL-1β的表达,免疫组化测定3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)的表达.结果(1)3组治疗组大鼠的各项生化指标相较于DN组均有下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组大鼠生化指标改变最为明显(P<0.01);(2)3组治疗组大鼠PARP-1的表达较于DN组下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组的表达下降最为明显(P<0.05);(3)3组治疗组大鼠肾脏组织的病理变化及肾脏细胞的凋亡较于DN组减缓,其中DN+二甲双胍+DPQ组的改善最为明显;(4)3组治疗组大鼠炎性因子的表达以及NF-kB,iNOS及3-NT的表达较于DN组下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组的表达下降最为明显(P<0.05).结论 二甲双胍通过调控PARP-1的表达,下调DN模型中NF-kB的表达,抑制NF-kB/iNOS/NO通路,抑制氧化损伤,减轻炎症反应,从而起到在糖尿病导致的高糖环境下,对肾脏的保护作用.

摘要： 目的 探究碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞焦亡的分子机制.方法 ELISA检测桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中焦亡指标白细胞介素(interleukin,IL)-1β及IL-18的含量,以癌旁桥本甲状腺炎组织为对照;Western印迹检测焦亡标志性蛋白焦孔素(gasdermin,GSDM)的活化情况.碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞,检测细胞焦亡IL-1β、IL-18、乳酸脱氢酶(LDH)的分泌及GSDM蛋白的活化及分子机制;转录组芯片分析高浓度碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞差异性表达的分子及其在焦亡中的作用机制.结果 桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中IL-1β和IL-18细胞因子含量较同一患者癌旁桥本甲状腺炎组织显著升高(P＜0.01),且焦亡标志性蛋白GSDMD的活化显著,而GSDME无显著活化改变.高浓度碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞后,通过激活核因子-κB(NF-κB)/NLRP3信号轴诱导IL-1β、IL-18、LDH的分泌(P＜0.01)和GSDMD活化,使甲状腺滤泡细胞发生焦亡.转录组芯片分析发现,甲状腺滤泡细胞受高浓度碘化钾刺激后PARP1蛋白表达显著上调,并通过调控NF-κB转录因子的活性促进细胞焦亡.结论 本研究发现高浓度碘化钾通过促进PARP1蛋白表达,诱导甲状腺滤泡细胞NF-KB/NLRP3炎症小体的活化,从而诱导甲状腺滤泡细胞发生炎症性焦亡.

摘要： 目的研究二甲双胍通过调控多聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP-1)的活性,对Ⅱ型糖尿病肾脏的保护作用及其机制。方法 Wistar大鼠分为正常组(n=12),DN组(n=12),DN+DPQ组(n=12),DN+二甲双胍组(n=12)以及DN+二甲双胍+DPQ组(n=12)。建模后检测各组大鼠空腹血糖含量,尿素氮含量,肌酐含量以及尿蛋白浓度等生化指标,HE染色和TUNEL染色观察肾脏病理情况,Western blot检测PARP-1,iNOS,NF-κB及caspase-3的蛋白表达,ELISA检测炎性因子TNF-α及IL-1β的表达,免疫组化测定3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)的表达。结果 (1)3组治疗组大鼠的各项生化指标相较于DN组均有下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组大鼠生化指标改变最为明显(P <0.01);(2)3组治疗组大鼠PARP-1的表达较于DN组下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组的表达下降最为明显(P <0.05);(3)3组治疗组大鼠肾脏组织的病理变化及肾脏细胞的凋亡较于DN组减缓,其中DN+二甲双胍+DPQ组的改善最为明显;(4)3组治疗组大鼠炎性因子的表达以及NF-kB,iNOS及3-NT的表达较于DN组下降,其中DN+二甲双胍+DPQ组的表达下降最为明显(P <0.05)。结论二甲双胍通过调控PARP-1的表达,下调DN模型中NF-kB的表达,抑制NF-kB/iNOS/NO通路,抑制氧化损伤,减轻炎症反应,从而起到在糖尿病导致的高糖环境下,对肾脏的保护作用。

摘要： 本申请涉及为PARP1、PARP2和/或微管蛋白的抑制剂并因此可用于治疗癌症的式(I)的酞嗪衍生物。还公开了含有这些化合物的药物制剂，以及这些化合物与至少一种另外的治疗剂的组合。

摘要： 本文提供了用于鉴别和治疗对PARP抑制有抗性的癌症的方法。还提供了用于使癌症对PARP抑制剂疗法敏感的方法。在一些方面，用PARP抑制剂疗法和c‑Met抑制剂疗法组合治疗PARP抑制剂癌症。

摘要： 本申请涉及用于治疗耐已知疗法的癌症的金络合物。在一些实施方式中，所述癌症耐第一PARP抑制剂和/或所述金络合物与第二PARP抑制剂组合使用。

摘要： 本申请涉及为PARP1、PARP2和/或微管蛋白的抑制剂并因此可用于治疗癌症的式(I)的酞嗪衍生物。还公开了含有这些化合物的药物制剂，以及这些化合物与至少一种另外的治疗剂的组合。

摘要： 本文提供了用于鉴别和治疗对PARP抑制有抗性的癌症的方法。还提供了用于使癌症对PARP抑制剂疗法敏感的方法。在一些方面，用PARP抑制剂疗法和c‑Met抑制剂疗法组合治疗PARP抑制剂癌症。

摘要： 本发明涉及用于鉴定PARP相互作用化合物或用于纯化或鉴定PARP蛋白的固定化合物和方法。

摘要： 本发明提供了PARP抑制剂(如奥拉帕利、1‑环丙基‑2‑((1S,4S)‑5‑(2‑氟‑5‑((4‑氧‑3,4‑二氢酞嗪‑1‑基)甲基)苯甲酰)‑2,5‑二氮杂双环[2,2,1]庚烷‑2‑基)乙烷‑1,2‑二酮等)的中间体(化合物式I、化合物式II)、制备方法以及该中间体在制备PARP抑制剂或PARP抑制剂关键中间体(化合物式A)中的应用，克服了现有制备工艺生产成本高、反应条件苛刻、反应副产物多的问题，适合工业化生产。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及检测对PARP抑制剂耐受的物质在制备评估肺癌患者对质子放疗敏感性的产品中的用途。本发明发现NSCLC细胞对Olaparib的半数抑制浓度IC50值与质子放疗的RBE0.1值呈正相关，半数抑制浓度IC50值越大，RBE0.1值就越大，也即NSCLC细胞对Olaparib越耐受，说明NSCLC细胞对质子放疗越敏感。此外发现，Olaparib处理后，RAD51foci阳性细胞百分率无显著变化的细胞更倾向于Olaparib耐药。因此，Olaparib作用后RAD51foci阳性细胞百分率表现可以作为NSCLC患者质子放疗敏感性的联合预测分子标记物。

摘要： 本发明涉及喹唑啉酮和相关化合物，其降解PARP14并且可用于例如治疗癌症和炎性疾病。

摘要： 本发明涉及式(I)化合物和含有所述化合物的组合物，其用作PARP(聚(ADP‑核糖)聚合酶)抑制剂。此外，本发明提供了制备所披露化合物的方法，以及使用它们的方法，例如作为药物，特别是用于治疗细胞增殖性疾病，例如癌症。