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一种高表达SOD3的CHO细胞株构建方法及SOD3蛋白纯化方法

摘要

本发明公开了一种高表达SOD3的CHO细胞株构建方法及SOD3蛋白纯化方法,所述构建方法如下:一、构建表达SOD3基因的慢病毒载体质粒;二、将慢病毒载体质粒和包装质粒psPAX2、pMD2.0G共转染293T细胞,包装成携带SOD3编码基因的慢病毒;三、将携带SOD3编码基因的慢病毒感染CHO细胞,并经过嘌呤霉素筛选后得到表达SOD3蛋白的CHO细胞群后,再用有限稀释法、Western blot方法进一步将上述嘌呤霉素筛选后的表达SOD3蛋白的CHO细胞进行筛选得到稳定的SOD3+CHO细胞株,将其进行发酵培养、蛋白分离纯化,可得到SOD3。本发明可以大规模生产具有生物活性的SOD3蛋白。

著录项

  • 公开/公告号CN109486771B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-02-12

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 深圳市旷逸生物科技有限公司;

    申请/专利号CN201811638520.X

  • 发明设计人 王冰;张伟涛;王康;沈洁;沈艳;

    申请日2018-12-29

  • 分类号C12N5/10(20060101);C12N15/53(20060101);C12N15/867(20060101);

  • 代理机构44484 深圳市金信启明知识产权代理有限公司;

  • 代理人邹蓝

  • 地址 518000 广东省深圳市前海深港合作区前湾一路1号A栋201室(入驻深圳市前海商务秘书有限公司)

  • 入库时间 2022-08-23 11:31:59

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