一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用

摘要

本发明涉及生物载体领域，特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法，包括以下步骤：构建aroA基因敲除打靶片段；将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株，获得BL21(DE3)/pKD46菌株；将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株，获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法，采用大于500bp的同源侧翼序列，利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因；该菌株既可用于EPSPS功能互补验证，还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达，达到一举两得的效果。