重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-NH<'M>和野生诺卡氏菌腈水合酶的催化稳定性研究

摘要

比较并讨论了重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-NHM 和野生诺卡氏菌腈水合酶的产物耐受性和热稳定性，提出了这两种菌株在研究腈水合酶过程中的应用。通过实验测定一定条件下腈水合酶的失活曲线，考察了腈水合酶在无水合反应条件下的催化稳定性。结果表明，重组大肠杆菌表达的腈水合酶稳定性比较差，与野生诺卡氏菌表达的腈水合酶相比，在相同条件下的失活动力学常数要大两个数量级。因此，野生诺卡氏菌更适合于工业生产丙烯酰胺的应用，而重组大肠杆菌可以作为改造腈水合酶基因的平台。