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一种COL4A3 p.P408H基因点突变小鼠模型及其构建方法、应用和试剂盒

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本发明公开了一种COL4A3p.P408H基因点突变小鼠模型及其构建方法、应用和试剂盒。其包括以下步骤：(1)设计gRNA靶点序列；(2)将Cas9nickasemRNA、靶点序列以及Donor DNA混合物对受精卵进行注射；(3)在小鼠出生后进行基因鉴定，获得COL4A3p.P408H基因点突变小鼠模型，然后再利用高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病肾病小鼠模型。本发明利用CRISPR/Cas9技术剪切COL4A3基因的DNA，同时提供带有点突变的Donor同源模板，通过DNA的同源重组修复在特定外显子实现碱基替换，实现点突变，并以C57BL/6J小鼠为背景构建杂合型点突变小鼠模型。

著录项

公开/公告号CN113981000A

专利类型发明专利
公开/公告日2022-01-28

原文格式PDF
申请/专利权人四川大学华西医院;
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申请/专利号CN202110976887.8
发明设计人刘芳;王一婷;赵元成;张杰;杨丰豪;
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申请日2021-08-24
分类号C12N15/85(20060101);C12N15/113(20100101);C12N15/90(20060101);C12N15/89(20060101);A01K67/027(20060101);
代理机构51229 成都正华专利代理事务所(普通合伙);
代理人罗健龙
地址 610041 四川省成都市武侯区国学巷37号
入库时间 2023-06-19 14:03:27

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2022-01-28

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1. 一种COL4A3 p.P408H基因点突变小鼠模型及其构建方法、应用和试剂盒 [P] . 中国专利： CN113981000A . 2022-01-28
2. KARS基因点突变小鼠模型的构建方法及其应用 [P] . 中国专利： CN106929533B . 2021.01.12
3. Polinucleotu00ecdeos and polinucleotu00ecdeos isolated plant cells, transgenic plants, DNA construct, wood, wood pulp, methods of production of a plant transformed from wood,Pulp of wood, methods of modification of the phenotype of a plant, the correlation of the expression of genes in two different samples.The possession of a phenotype of the plant at the level of gene expression in the plant of one or more genes and correlation of gene expression with the propensity to form wood of reaction.The combination of the detection of the expression of one or more genes, microconjunto, methods for detection of one or more genes in a sample.One or more nucleic acid sequences encoded by one or more genes in a sample and kit. [P] . BRPI0406291A . 2006-05-02

机译：聚核苷酸和聚核苷酸分离的植物细胞，转基因植物，DNA构建体，木材，木浆，由木材转化的植物的生产方法，木浆，修饰植物表型的方法，相关性基因在两个不同样品中的表达。在一个或多个基因在植物中的基因表达水平上具有植物的表型，并且基因表达与形成反应木材的倾向相关。一种或多种基因的表达，微结膜，检测样品中一种或多种基因的方法。样品和试剂盒中一种或多种基因编码的一种或多种核酸序列。
4. isolated polynucleotides, plant transcription factor, isolated nucleotide sequences, DNA constructs, plant cells, transgenic plants, wood pulp, expression detection combinations of one or more polynucleotides, microtubes and kit and methods of transgenic plant production , promoter tracking, correlation of polynucleotide expression in two different samples and possession of a plant phenotype with the level of plant polynucleotide expression of one or more polynucleotides and detection of one or more polynucleotides in a sample [P] . BRPI0411002A . 2006-05-23

机译：分离的多核苷酸，植物转录因子，分离的核苷酸序列，DNA构建体，植物细胞，转基因植物，木浆，一种或多种多核苷酸的表达检测组合，微管和试剂盒以及转基因植物生产的方法，启动子追踪，多核苷酸表达的相关性两个不同的样品，并且具有一种植物表型，以及一种或多种多核苷酸的植物多核苷酸表达水平以及样品中一种或多种多核苷酸的检测
5. Polinucleotu00ecdios and polipeptu00ecdios isolated plant cells, transgenic plants, construction of DNA, wood, wood pulp, microconjunto,Combinations for detection of the expression of one or more genes, kit and methods for modification of the phenotype of a plant, production of transformed plant, wood and wood pulp,Correlation of expression of the gene in two different samples.The possession of a phenotype of plant with the level of expression of the gene in the plant of one or more genes and the propensity for the formation of reaction wood and detection of one or more genes in a sample. [P] . BRPI0411028A . 2006-07-25

机译：多聚核苷酸和多聚核苷酸分离的植物细胞，转基因植物，DNA，木材，木浆，微结缔的构建，用于检测一种或多种基因表达的组合，用于修饰植物表型的试剂盒和方法，生产转化植物，木材和木浆的特性，两个不同样品中基因表达的相关性。植物表型的存在与该基因在植物中一个或多个基因表达水平的关系以及形成植物的倾向反应木和样品中一个或多个基因的检测。