地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法

摘要

本发明属于检测方法技术领域，具体涉及一种地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法，包括如下步骤：(1)系统适用性溶液的制备；(2)供试品溶液的制备：取地塞米松磷酸酯酯化反应液0.2ml，加入浓盐酸0.1ml和水1ml，摇匀，再加入流动相稀释至10ml，混匀得到供试品溶液；(3)空白溶液为流动相10ml；(4)采用高效液相色谱法进行检测供试品溶液中塞米松磷酸酯；所述流动相的配制过程为：三乙胺溶液45ml、甲醇47.5ml和乙腈7.5ml混合均匀得到流动相。本发明方法能够有检测出地塞米松磷酸钠酯化反应中物料地塞米松是否反应完全，控制产品中杂质地塞米松的含量，提高收率。

说明书

技术领域

本发明属于检测方法技术领域，具体涉及一种地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法。

背景技术

地塞米松磷酸钠产品属于肾上腺皮质激素类药品，地塞米松磷酸酯反应液是地塞米松磷酸钠中间控制产品，反应过程见图19，然而地塞米松磷酸酯反应液由于溶解性与纯品地塞米松存在较大差异，难以使用纯品地塞米松的检测方法进行，且目前还没有地塞米松磷酸酯反应液公开检测标准及检测方法，鉴于上述情况，我们公开对地塞米松磷酸酯反应液的检测标准和检测方法，以便在生产地塞米松磷酸钠过程中得到更好的控制，从而提高地塞米松磷酸钠的产品质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法。通过对酯化阶段反应液中地塞米松磷酸酯的检测，能更好的掌握地塞米松磷酸钠在生产过程中质量控制情况。

本发明的实现过程如下：

地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法，包括如下步骤：

(1)系统适用性溶液的制备：

首先，使用地塞米松磷酸酯对照品和甲醇溶剂配制地塞米松磷酸酯贮备液；

然后，使用地塞米松和甲醇溶剂配制地塞米松贮备液；

最后，分别精密量取地塞米松磷酸酯贮备液和地塞米松贮备液各1ml置于100ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得每1ml含10μg地塞米松磷酸酯、10μg地塞米松的系统适用性溶液；

(2)供试品溶液的制备：取地塞米松磷酸酯酯化反应液0.2ml，加入浓盐酸0.1ml和水1ml，摇匀，再加入流动相稀释至10ml，混匀得到供试品溶液；

(3)空白溶液为流动相10ml；

(4)采用高效液相色谱法进行检测供试品溶液中塞米松磷酸酯；

所述流动相的配制过程为：三乙胺溶液45ml、甲醇47.5ml和乙腈7.5ml混合均匀得到流动相。

进一步，步骤(1)中，地塞米松磷酸酯贮备液的具体配制过程为：精密称定地塞米松磷酸酯对照品25mg，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀作为地塞米松磷酸酯贮备液；

地塞米松贮备液的具体配制过程为：精密称定地塞米松25mg，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀作为地塞米松贮备液。

进一步，步骤(4)中，高效液相色谱法的色谱条件为：

a)流速：1.0ml/min；

b)检测波长：242nm；

c)柱温：30℃；

d)进样量：20μl；

e)色谱柱填料及柱长：十八烷基硅烷键合硅胶，250×4.6mm；

进一步，步骤(4)中，所述三乙胺溶液的配制过程为：取三乙胺7.5ml，加水稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.0±0.05。

进一步，步骤(4)中，高效液相色谱法的进样序列为：i)空白溶液；ii)系统适用性溶液；iii)供试品溶液。

进一步，步骤(4)中，高效液相色谱法的具体操作过程为：分别取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各20μl，然后按进样序列依次注入高效液相色谱仪中，记录色谱图至主成分保留时间的2倍，系统适用性溶液色谱图中，理论塔板数按地塞米松磷酸酯峰计算，不得低于3000，地塞米松磷酸酯与地塞米松峰的分离度应大于4.4。

本发明的创新点及积极效果：本发明方法能够有检测出地塞米松磷酸钠酯化反应中物料地塞米松是否反应完全，控制产品中杂质地塞米松的含量，提高收率。

附图说明

图1为空白溶液的第一批实验的色谱图；

图2为空白溶液的第一批实验的峰表图；

图3为空白溶液的第二批实验的色谱图；

图4为空白溶液的第二批实验的峰表图；

图5为空白溶液的第三批实验的色谱图；

图6为空白溶液的第三批实验的峰表图；

图7为系统适用性溶液的第一批实验的色谱图；

图8为系统适用性溶液的第一批实验的峰表图；

图9为系统适用性溶液的第二批实验的色谱图；

图10为系统适用性溶液的第二批实验的峰表图；

图11为系统适用性溶液的第三批实验的色谱图；

图12为系统适用性溶液的第三批实验的峰表图；

图13为供试品溶液的第一批实验的色谱图；

图14为供试品溶液的第一批实验的峰表图；

图15为供试品溶液的第二批实验的色谱图；

图16为供试品溶液的第二批实验的峰表图；

图17为供试品溶液的第三批实验的色谱图；

图18为供试品溶液的第三批实验的峰表图；

图19为由地塞米松生产地塞米松磷酸钠的反应过程示意图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明。

本发明为地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段中间控制地塞米松磷酸酯反应液检测方法，以便更好的对中间过程进行监控，从而提高地塞米松磷酸钠的产品质量。

实施例1

地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中地塞米松的检测方法，包括如下步骤：

(一)地塞米松残留：HPLC

(二)仪器和器具：分析天平，移液管，高效液相色谱仪。

(三)试剂和试液：地塞米松，地塞米松磷酸酯对照，乙腈，甲醇，三乙胺，磷酸，浓盐酸(分析纯)。

(四)溶液配制

(1)系统适用性溶液的制备：

首先，地塞米松磷酸酯贮备液的具体配制过程为：精密称定地塞米松磷酸酯对照品25mg，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀作为地塞米松磷酸酯贮备液；

然后，地塞米松贮备液的具体配制过程为：精密称定地塞米松25mg，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀作为地塞米松贮备液；

最后，分别精密量取地塞米松磷酸酯贮备液和地塞米松贮备液各1ml置于100ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得每1ml含10μg地塞米松磷酸酯、10μg地塞米松的系统适用性溶液；

(2)供试品溶液的制备：取地塞米松磷酸酯酯化反应液0.2ml，加入浓盐酸0.1ml和水1ml，摇匀，再加入流动相稀释至10ml，混匀得到供试品溶液；

(3)空白溶液为流动相10ml；

(五)色谱条件及序列编排

1.流速：1.0ml/min

2.检测波长：242nm

3.柱温：30℃

4.进样量：20μl

5.色谱柱填料及柱长：十八烷基硅烷键合硅胶，250×4.6mm

6.流动相：三乙胺溶液45ml、甲醇47.5ml和乙腈7.5ml混合均匀得到流动相；所述三乙胺溶液的配制过程为：取三乙胺7.5ml，加水稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.0±0.05。

7.高效液相色谱法的进样序列为：i)空白溶液；ii)系统适用性溶液；iii)供试品溶液。

8.高效液相色谱法的具体操作过程为：分别取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各20μl，然后按进样序列依次注入高效液相色谱仪中，记录色谱图至主成分保留时间的2倍，系统适用性溶液色谱图中，理论塔板数按地塞米松磷酸酯峰计算，不得低于3000，地塞米松磷酸酯与地塞米松峰的分离度应大于4.4。

9.进样序列编辑及结果：

表1进样序列编辑及结果

注意：空白溶液在序列中的用处为排除仪器，试剂污染所造成的测试偏差，本序列为一批样品的测试序列，进行三个批次的测定。若同时进行多个批次的测定，应适当增加空白的进样次数和对照品的进样次数。

结合表1及图1-图18，可以看出，地塞米松磷酸钠生产过程中酯化阶段反应液中物料地塞米松是否反应完全或有残留。从图7-图12可以看出，系统适用性溶液中地塞米松磷酸酯的保留时间约为15min，面积％约为41，地塞米松的保留时间约为19-20min，面积％约为58。从图13-18可以看出，地塞米松磷酸酯的保留时间为15min，面积％约为96，地塞米松的保留时间约为19-20min，面积％约为1，说明地塞米松基本反应完全，残留较少。

可接受标准：供试品溶液色谱图中若出现地塞米松出峰时间相应的色谱峰，按面积归一化法计算，面积％不得超过5.0％。

采用本发明方法后，对地塞米松磷酸钠产品生产中间过程中地塞米松磷酸酯进行控制，控制地塞米松磷酸钠酯化反应中物料地塞米松是否反应完全，控制产品中杂质地塞米松含量，提高地塞米松磷酸钠产品收率。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作出的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施仅限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以作出若干简单推演或替换，都应该视为属于本发明的保护范围。