一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法，该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法包括以下步骤：选取适量的棉籽粕与菜籽粕，并将棉籽粕与菜籽粕进行预处理；将植物的浆液或粉碎物与水按料液比4‑19混合后进行水提取，收集提取液，并且将该板框压滤机和陶瓷膜过滤，再使用超滤膜进行两次过滤，得到截留液；将截留液经浓缩获得浓缩液，浓缩液经冷冻干燥即得植物蛋白酶；本发明一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法，通过用板框压滤机和陶瓷膜过滤以及超滤膜的多次过滤，使得植物蛋白酶的纯度与质量大大提升，同时原材料成本低廉，操作简单，可大范围使用。

说明书

技术领域

本发明涉及酸水解植物蛋白技术领域，具体为一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法。

背景技术

植物蛋白是人类膳食蛋白质的重要来源。谷类一般含蛋白质6％-10％，不过其中所含必需氨基酸种类不完全。薯类含蛋白质1％-1％。某些坚果类如花生、核桃、杏仁和莲子等则含有较高的蛋白质(15％-10％)。豆科植物如某些干豆类的蛋白质含量可高达40％左右。特别是大豆在豆类中更为突出。它不仅蛋白质含量高，而且质量亦高，是人类食物蛋白质的良好来源。植物蛋白为素食者饮食中主要的蛋白质来源，可用以制成形、味、口感等与相应动物食品相似的仿肉制品。素食者专食不完全蛋白质，会发生营养缺乏症，必须兼食大豆蛋白质；

为了进一步酸水解植物蛋白的制作品质以及实现节能环保，为此，提出一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法，该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法包括以下步骤：

步骤一、选取适量的棉籽粕与菜籽粕，并将棉籽粕与菜籽粕进行预处理，首先将低温脱溶棉籽粕进行粉碎，并粉碎后的棉籽粕进行水提，加入占棉籽粕重量的10倍超纯水，并将得到的上清液经过压力为0.1-0.15MPa，温度为 45-50℃，并上清液经过压力为0.1-0.18MPa，温度为45-50℃，流量为90L/min 条件下的微滤膜进行除杂，得到微滤膜滤液，最后将得到的微滤膜滤液再经过压力为1.1-1MPa，温度为18-50℃预处理，备用；

步骤二、将植物的浆液或粉碎物与水按料液比4-19混合后进行水提取，收集提取液，并且将该板框压滤机和陶瓷膜过滤，再使用超滤膜进行两次过滤，得到截留液；

步骤三、将截留液经浓缩获得浓缩液，浓缩液经冷冻干燥，首先将浓缩液在0.18h-1h内将冷冻干燥设备内温度降至-11℃，并维持1.0-2h，放热结束后，设在0.15h-2.0h内将冷冻干燥设备内温度降至-10℃以下，在经过升华处理，升华包括两个步骤，升华前期与升华后期，升华结束后，设冷冻干燥设备内温度为15℃-50℃，维持4-6h，并调整真空度为15±10Pa，当冷冻干燥设备内温度到达15℃且至少两支产品温度探头超过15℃后，将冷冻干燥设备内的真空度恢复10Pa以下并保持1h后，包装即得植物蛋白酶；

步骤四、将预处理后的植物蛋白、植物蛋白酶与硫酸溶液混合反应，得到酸水解植物蛋白反应液；

步骤五、将酸水解植物蛋白反应液与钙碱中和，得酸水解植物蛋白中和液；

步骤六、酸水解植物蛋白中和液经脱色脱苦，过滤后，得酸水解植物蛋白液；

步骤七、酸水解植物蛋白液经进行流化床干燥，控制物料温度不超过 40℃；

步骤八、粉碎冷却的发酵酶解物后将粉末过筛，得到饲用高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白产品；

步骤九、产品检测，经检测合格后包装。

优选的，所述陶瓷膜的孔径大小为40-180nm。

优选的，所述板框压滤机的滤布孔径大小为80-100目。

优选的，浓缩液的浓度控制在0.15mol/mL-0.18mol/mL。

优选的，所述硫酸溶液浓度为0.15mol/mL-0.2mol/mL。

优选的，所述棉籽粕的粒度为80-110目。

优选的，粉碎后的棉籽粕需在18-40℃下，搅拌15-75min，离心分离。

优选的，升华前期的冷冻干燥设备内温度为-5℃，且真空维持在11Pa以下，保温5-8h。

优选的，升华后期调整真空度为50±10Pa，且维持冷冻干燥设备内温度在-8℃，继续保温。

优选的，浓缩液经冷冻干燥时，温度到达-10℃后，在0.5-1.0h内将冷冻干机内温度降至-45℃以下，然后控制冷冻干燥设备内的压力至10Pa以下并维持1.0-2.0h。

与现有技术对比，本发明具备以下有益效果：本发明为一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法，通过用板框压滤机和陶瓷膜过滤以及超滤膜的多次过滤，使得植物蛋白酶的纯度与质量大大提升，同时原材料成本低廉，操作简单，可大范围使用。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法，该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法包括以下步骤：

步骤一、选取适量的棉籽粕与菜籽粕，并将棉籽粕与菜籽粕进行预处理，首先将低温脱溶棉籽粕进行粉碎，并粉碎后的棉籽粕进行水提，加入占棉籽粕重量的10倍超纯水，并将得到的上清液经过压力为0.1-0.15MPa，温度为 45-50℃，并上清液经过压力为0.1-0.18MPa，温度为45-50℃，流量为90L/min 条件下的微滤膜进行除杂，得到微滤膜滤液，最后将得到的微滤膜滤液再经过压力为1.1-1MPa，温度为18-50℃预处理，备用；

步骤二、将植物的浆液或粉碎物与水按料液比4-19混合后进行水提取，收集提取液，并且将该板框压滤机和陶瓷膜过滤，再使用超滤膜进行两次过滤，得到截留液；

步骤三、将截留液经浓缩获得浓缩液，浓缩液经冷冻干燥，首先将浓缩液在0.18h-1h内将冷冻干燥设备内温度降至-11℃，并维持1.0-1h，放热结束后，设在0.15h-1.0h内将冷冻干燥设备内温度降至-10℃以下，在经过升华处理，升华包括两个步骤，升华前期与升华后期，升华结束后，设冷冻干燥设备内温度为15℃-50℃，维持4-6h，并调整真空度为15±10Pa，当冷冻干燥设备内温度到达15℃且至少两支产品温度探头超过15℃后，将冷冻干燥设备内的真空度恢复10Pa以下并保持1h后，包装即得植物蛋白酶；

步骤四、将预处理后的植物蛋白、植物蛋白酶与硫酸溶液混合反应，得到酸水解植物蛋白反应液；

步骤五、将酸水解植物蛋白反应液与钙碱中和，得酸水解植物蛋白中和液；

步骤六、酸水解植物蛋白中和液经脱色脱苦，过滤后，得酸水解植物蛋白液；

步骤七、酸水解植物蛋白液经进行流化床干燥，控制物料温度不超过 40℃；

步骤八、粉碎冷却的发酵酶解物后将粉末过筛，得到饲用高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白产品；

步骤九、产品检测，经检测合格后包装。

陶瓷膜的孔径大小为40-180nm。

板框压滤机的滤布孔径大小为80-100目。

浓缩液的浓度控制在0.15mol/mL-0.18mol/mL。

硫酸溶液浓度为0.15mol/mL-0.1mol/mL。

棉籽粕的粒度为80-110目。

粉碎后的棉籽粕需在18-40℃下，搅拌15-75min，离心分离。

升华前期的冷冻干燥设备内温度为-5℃，且真空维持在11Pa以下，保温 5-8h。

升华后期调整真空度为50±10Pa，且维持冷冻干燥设备内温度在-8℃，继续保温。

浓缩液经冷冻干燥时，温度到达-10℃后，在0.5-1.0h内将冷冻干机内温度降至-45℃以下，然后控制冷冻干燥设备内的压力至10Pa以下并维持 1.0-1.0h。

通过用板框压滤机和陶瓷膜过滤以及超滤膜的多次过滤，使得植物蛋白酶的纯度与质量大大提升，同时原材料成本低廉，操作简单，可大范围使用。

实施例1

该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备时，首先该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法包括以下步骤：首先选取适量的棉籽粕与菜籽粕，并将棉籽粕与菜籽粕进行预处理，首先将低温脱溶棉籽粕进行粉碎，并粉碎后的棉籽粕进行水提，加入占棉籽粕重量的10倍超纯水，并将得到的上清液经过压力为0.1MPa，温度为45℃，并上清液经过压力为0.1MPa，温度为45℃，流量为90L/min条件下的微滤膜进行除杂，得到微滤膜滤液，最后将得到的微滤膜滤液再经过压力为1.1MPa，温度为18℃预处理，备用；将植物的浆液或粉碎物与水按料液比4-19混合后进行水提取，收集提取液，并且将该板框压滤机和陶瓷膜过滤，再使用超滤膜进行两次过滤，得到截留液；将截留液经浓缩获得浓缩液，浓缩液经冷冻干燥，首先将浓缩液在0.18h 内将冷冻干燥设备内温度降至-11℃，并维持1.0h，放热结束后，设在0.15h 内将冷冻干燥设备内温度降至-10℃以下，在经过升华处理，升华包括两个步骤，升华前期与升华后期，升华结束后，设冷冻干燥设备内温度为30℃，维持4h，并调整真空度为30Pa，当冷冻干燥设备内温度到达15℃且至少两支产品温度探头超过15℃后，将冷冻干燥设备内的真空度恢复10Pa以下并保持 1h后，包装即得植物蛋白酶；将预处理后的植物蛋白、植物蛋白酶与硫酸溶液混合反应，得到酸水解植物蛋白反应液；将酸水解植物蛋白反应液与钙碱中和，得酸水解植物蛋白中和液；酸水解植物蛋白中和液经脱色脱苦，过滤后，得酸水解植物蛋白液；酸水解植物蛋白液经进行流化床干燥，控制物料温度不超过40℃；粉碎冷却的发酵酶解物后将粉末过筛，得到饲用高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白产品；产品检测，经检测合格后包装。

陶瓷膜的孔径大小为80nm，板框压滤机的滤布孔径大小为80，浓缩液的浓度控制在0.15mol/mL，硫酸溶液浓度为0.15mol/mL，棉籽粕的粒度为80 目，粉碎后的棉籽粕需在18℃下，搅拌15min，离心分离，升华前期的冷冻干燥设备内温度为-5℃，且真空维持在11Pa以下，保温5-8h，升华后期调整真空度为50Pa，且维持冷冻干燥设备内温度在-8℃，继续保温，浓缩液经冷冻干燥时，温度到达-10℃后，在0.5h内将冷冻干机内温度降至-45℃以下，然后控制冷冻干燥设备内的压力至10Pa以下并维持1.0h。

取上述酸水解植物蛋白进行检测，经检测，酸水解植物蛋白中的蛋白质含量提高16％，同时取样品约0.5g酸水解植物蛋白，精密称定，置于150ml 圆底烧瓶中，精密加入10ml40％乙醇溶液，接冷凝管水浴40℃加热回流30min，冷却后放置，作为供试品溶液；精密量取氯丙醇对照品100μl，精密称定为 109.60mg，置于50ml容量瓶中，用40％溶液定容，精密量取2ml置于10ml容量瓶中，再用40％乙醇溶液定容至刻度，放置，作为对照品溶液；按照残留溶剂测定法(中国药典2010版附录P第二法)试验，以改性聚乙二醇为固定相的毛细管柱为色谱柱，柱温80℃；进样口温度230℃；FID检测器，检测室温度为250℃；取对照品溶液进样，记录色谱图，1-氯-2-丙醇及2-氯-1-丙醇依次出峰，各主峰间的分离度符合要求。

实施例2

该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备时，首先该高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白的制备方法包括以下步骤：首先选取适量的棉籽粕与菜籽粕，并将棉籽粕与菜籽粕进行预处理，首先将低温脱溶棉籽粕进行粉碎，并粉碎后的棉籽粕进行水提，加入占棉籽粕重量的10倍超纯水，并将得到的上清液经过压力为0.15MPa，温度为45-50℃，并上清液经过压力为 0.1MPa，温度为48℃，流量为90L/min条件下的微滤膜进行除杂，得到微滤膜滤液，最后将得到的微滤膜滤液再经过压力为1MPa，温度为43℃预处理，备用；将植物的浆液或粉碎物与水按料液比4-19混合后进行水提取，收集提取液，并且将该板框压滤机和陶瓷膜过滤，再使用超滤膜进行两次过滤，得到截留液；将截留液经浓缩获得浓缩液，浓缩液经冷冻干燥，首先将浓缩液在0.8h内将冷冻干燥设备内温度降至-11℃，并维持1.5h，放热结束后，设在0.6h内将冷冻干燥设备内温度降至-10℃以下，在经过升华处理，升华包括两个步骤，升华前期与升华后期，升华结束后，设冷冻干燥设备内温度为 38℃，维持4.5h，并调整真空度为5Pa，当冷冻干燥设备内温度到达15℃且至少两支产品温度探头超过15℃后，将冷冻干燥设备内的真空度恢复10Pa以下并保持1h后，包装即得植物蛋白酶；将预处理后的植物蛋白、植物蛋白酶与硫酸溶液混合反应，得到酸水解植物蛋白反应液；将酸水解植物蛋白反应液与钙碱中和，得酸水解植物蛋白中和液；酸水解植物蛋白中和液经脱色脱苦，过滤后，得酸水解植物蛋白液；酸水解植物蛋白液经进行流化床干燥，控制物料温度不超过40℃；粉碎冷却的发酵酶解物后将粉末过筛，得到饲用高浓度低盐低氯丙醇的酸水解植物蛋白产品；产品检测，经检测合格后包装。

陶瓷膜的孔径大小为80nm，板框压滤机的滤布孔径大小为90目，浓缩液的浓度控制在0.18mol/mL，硫酸溶液浓度为0.1mol/mL，棉籽粕的粒度为110 目，粉碎后的棉籽粕需在40℃下，搅拌15-75min，离心分离，升华前期的冷冻干燥设备内温度为-5℃，且真空维持在11Pa以下，保温8h，升华后期调整真空度为45Pa，且维持冷冻干燥设备内温度在-8℃，继续保温，浓缩液经冷冻干燥时，温度到达-10℃后，在0.8h内将冷冻干机内温度降至-45℃以下，然后控制冷冻干燥设备内的压力至10Pa以下并维持0.8h。

取上述酸水解植物蛋白进行检测，经检测，酸水解植物蛋白中的蛋白质含量提高19％，按照残留溶剂测定法(中国药典2010版附录P第二法)试验，以改性聚乙二醇为固定相的毛细管柱为色谱柱，柱温80℃；进样口温度230℃； FID检测器，检测室温度为250℃；取对照品溶液进样，记录色谱图，1-氯-2- 丙醇及2-氯-1-丙醇依次出峰，各主峰间的分离度符合要求。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。