一步单管法定量RT‑PCR检测慢性髓系白血病BCR‑ABL1基因的表达量

摘要

本发明涉及生物工程领域的检测方法，具体利用实时荧光定量RT‑PCR技术对慢性髓系白血病中的目的基因BCR‑ABL1mRNA和内参基因ABL1mRNA拷贝数进行快速、准确、定量检测。本发明包括如下步骤：BCR‑ABL1特异性的引物和探针的设计；标准品的设计与制备；样本RNA的提取；实时定量PCR检测方法的建立；利用该方法可以简化传统的检测方法，一步单管法快实时荧光定量RT‑PCR速检测慢性髓系白血病骨髓或外周血标本中的目的基因BCR‑ABL1mRNA和内参基因ABL1mRNA拷贝数，从而用校正比值(NQ)表示，即NQ＝BCR‑ABL1拷贝数mRNA/ABL1mRNA拷贝数×100％，进而对慢性髓系白血病临床诊断、疗效检测及预后判定具有重要的指导作用。