一种用于PD研究的HSP70干扰稳定细胞系及其建立方法

摘要

一种用于PD研究的HSP70干扰稳定细胞系及其建立方法本发明针对HSP70在PD疾病发生发展中的作用尚未完全清楚，需要多种研究方法进一步明确的情况，通过构建针对HSP70的RNA干扰慢病毒表达质粒载体，建立干扰质粒稳定转染的SH‑SY5Y细胞系。本发明采用的技术方法:设计并合成多个针对hsp70基因的RNA干扰序列,并将其插入真核表达慢病毒载体，通过与包装质粒共转染293T细胞后进行荧光定量PCR检测目的基因表达水平，筛选出有效干扰质粒；通过慢病毒感染法将该有效干扰质粒稳定转染至SH‑SY5Y细胞系，通过携带的GFP荧光筛选获得稳转细胞系，荧光定量PCR检测验证。该细胞系与亲本细胞系相比具有类似的生长曲线。