金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统的制备及其在构建小鼠模型中的应用

摘要

本发明公开了一种金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统的制备方法及其在构建基因修饰小鼠模型中的应用。所述金黄色葡萄球菌CRISPR/Cas9系统由Cas9 mRNA和gRNA两部分组分组成；所述Cas9 mRNA的制备方法是在原始Cas9编码DNA的上游加上T7启动子；所述gRNA的制备方法是在原始gRNA编码序列上游加上T7启动子。将金黄色葡萄球菌Cas9 mRNA和gRNA通过显微注射的方法注射到小鼠受精卵中，可以对小鼠受精卵进行多种类型的基因编辑修饰，如单基因敲除、多基因敲除和/或基因敲入等，在小鼠等动物受精卵基因编辑修饰工作以及动物模型的构建方面，具有很好的应用前景。