一种大鼠原代肝细胞的优化培养方法

摘要

本发明公开了一种大鼠原代肝细胞的优化培养方法，包括如下步骤：将大鼠原代肝细胞上样于微孔培养板，离心后置于肝细胞无血清培养液培养；培养完成后，收集原代肝细胞，并转染成改造细胞置于肝细胞无血清培养基进行微载体悬浮培养；所述肝细胞无血清培养液包括基础培养基、胰岛素、亚硒酸钠、表皮生长因子、肝细胞生长因子、纤粘连蛋白、地塞米松和奶蓟草提取物；所述肝细胞无血清培养基包括高糖培养基、表皮再生丝素蛋白纤维、地塞米松、葛仙米提取物等。本发明利用力学紧凑种植原代肝细胞，可以使肝细胞间排列紧凑，形成紧密接触，肝细胞可以快速形成高密度培养；采用无血清培养基配方，使其更适合肝细胞的生长及功能发挥，从而实现了体外肝细胞的大量培养。