高效液相色谱法测定L-缬氨酸原料中其他氨基酸的方法

摘要

本发明提供一种用高效液相色谱法测定L‑缬氨酸原料中其他氨基酸的方法，配制L‑正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸对照品溶液；经高效液相色谱仪检测，供试品色谱图与对照品溶液色谱图中L‑正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸的出峰时间及峰形进行对比，判定供试品溶液中是否含有其他氨基酸。本方法通过筛选氨丙基键合硅胶色谱柱，找到分离效果，筛选波长，找到各氨基酸的最大吸收，并利用乙腈/磷酸盐缓冲液二元流动相，通过调节三乙胺比例、pH值及两相比例来调控各氨基酸峰在色谱柱上的保留时间，有效防止氨基柱中键合氨丙基的水解脱落，解决氨基柱反相使用寿命不长，基线不稳的问题。