蛋白质谷氨酰胺酶酶原在枯草芽孢杆菌中的表达和自加工

摘要

本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌生产蛋白质谷氨酰胺酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明方法针对枯草芽孢杆菌进行密码子优化，得到适于在枯草芽胞杆菌表达系统表达的蛋白质谷氨酰胺酶前体物(pro‑PG)基因片段，将该基因片段与表达载体pHT43连接，构建重组载体pHT43‑pp，并将其转化入枯草芽孢杆菌中形成重组枯草芽孢杆菌，经乳糖等诱导剂诱导发酵，在自身发酵体系中，不需要添加任何外源蛋白酶的条件下，生成具有活性的成熟蛋白质谷氨酰胺酶即mPG。本发明包括以下优点：开发了利用枯草芽孢杆菌表达pro‑PG的方法；开发了利用枯草芽孢杆菌表达体系对pro‑PG进行自加工的方法，而不需要外源蛋白酶的添加，可以高效快速且定向地产生mPG，且酶活性较高，适宜工业化生产。