转谷氨酰胺酶酶原在枯草芽孢杆菌WB800中的表达

摘要

以茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)基因组 DNA 为模板,PCR扩增得到转谷氨酰胺酶酶原基因(pro-transglutaminase,pro-TG),经pMD18-T载体亚克隆到表达载pBEp43(+),然后转化到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) WB800中,经过32 h摇瓶发酵,成功表达了转谷氨酰胺酶酶原.采用胰蛋白酶激活转谷氨酰胺酶酶原,成功切除前导肽后得到成熟的转谷氨酰胺酶.牛血清蛋白(BSA)交联表明成熟的转谷氨酰胺酶具有蛋白交联的功能.本研究首次采用枯草芽孢杆菌作为宿主分泌表达了茂原链霉菌的转谷氨酰胺酶酶原,对基因工程异源表达这种特殊的食品用酶提供了新思路.