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一种不产生DNA双链断裂的实现植物基因替换的方法

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摘要

本发明提供了一种不产生DNA双链断裂的实现基因替换的方法。所述方法包括如下步骤：将sgRNA、Cas9切刻酶、供体DNA导入目的植物中；sgRNA靶向DNA片段甲靶点序列；供体DNA依次包括DNA片段甲靶点序列、DNA片段乙和DNA片段甲靶点序列；DNA片段乙为将DNA片段甲经过一个或几个碱基突变后得到的DNA分子；在sgRNA引导下，Cas9切刻酶在目的植物基因组中的DNA片段甲靶点序列处和所述供体DNA中的DNA片段甲靶点序列处均产生单链DNA切刻，并通过目的植物体内的修复机制将目的植物基因组中的DNA片段甲替换为DNA片段乙，实现植物基因替换。

著录项

公开/公告号CN110951742A

专利类型发明专利
公开/公告日2020-04-03

原文格式PDF
申请/专利权人北京市农林科学院;
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申请/专利号CN201911405281.8
发明设计人杨进孝;徐雯;康桂婷;李璐;赵思;
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申请日2019-12-31
分类号C12N15/113(20100101);C12N15/82(20060101);C12N15/65(20060101);C12N9/22(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/46(20180101);
代理机构11245 北京纪凯知识产权代理有限公司;
代理人关畅
地址 100097 北京市海淀区曙光花园中路9号北京市农林科学院玉米研究中心
入库时间 2023-12-17 06:47:23

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2020-05-01

实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/113 申请日:20191231

实质审查的生效
2020-04-03

公开

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1. 一种不产生DNA双链断裂的实现植物基因替换的方法 [P] . 中国专利： CN110951742A . 2020-04-03
2. 脂肪酸去饱和酶基因,含该基因的载体,用该基因转化的植物,以及产生该植物的方法 [P] . 中国专利： CN1334340A . 2002-02-06
3. A method for controlling undesired vegetation using a mutated protoporphyrinogen oxidase, an isolated nucleic acid encoding a mut-ppo polypeptide, a transgenic plant cell transformed by a nucleic acid encoding a mut-ppo polypeptide and a seed produced by a transgenic plant [P] . IL236044A . 2020-04-30

机译：一种使用突变的原卟啉原氧化酶，分离的编码mut-ppo多肽的核酸，经编码mut-ppo多肽的核酸转化的转基因植物细胞和由该转基因植物产生的种子的植物防治不希望有的植物的方法
4. nucleic acid molecule, polypeptide, chimeric gene, plant cell, plant, plant part, or seed, methods for producing a cereal plant or plant cell or seed thereof or for enhancing the restorative capacity for g-type cytoplasmic male sterility of wheat, to convert a non-restorative cereal plant into a restorative plant for wheat type g cytoplasmic male sterility or to enhance the restorative capacity for wheat type g cytoplasmic male sterility, to select or produce a cereal plant and to produce seed hybrid, to restore fertility in a progeny or to produce a fertile progeny plant, to identify and / or select a cereal plant, and to determine the presence or absence or zygosity state of a functional restorer gene allele, and, uses of acid nucleic acid, at least one marker and one plant [P] . BR112019000886A2 . 2019-04-30

机译：核酸分子，多肽，嵌合基因，植物细胞，植物，植物部分或种子，生产谷类植物或植物细胞或其种子或增强小麦的g型细胞质雄性不育恢复能力的方法将非恢复性谷物植物转变为小麦g型细胞质雄性不育的恢复性植物，或增强小麦g型细胞质雄性不育的恢复性能力，以选择或生产谷物植物并产生种子杂种，以恢复子代的育性或产生可育的子代植物，鉴定和/或选择谷类植物，确定功能性恢复基因等位基因的存在与否或合子状态，以及酸性核酸，至少一种标记物和一种植物的用途
5. isolated nucleic acid, expression cassette, expression vector, cell, transgenic plant, progeny and plant seed, and processes to produce a plant with increased levels of a product of a gene from the synthesis of fatty acids or lipid metabolism, a plant with increased levels of gamma linolenic acid (gla), to induce the production of at least one gamma linolenic acid (gla) or octadecatetraeÈnico acid (ota) in a deficient plant or lacking in gla, to decrease the production of a gene for the synthesis of fatty acids or lipid metabolism in a plant and for the co-suppression of a native gene for the synthesis of fatty acid or lipid metabolism in a plant [P] . BR9807969A . 2000-03-08

机译：分离的核酸，表达盒，表达载体，细胞，转基因植物，后代和植物种子，以及从脂肪酸合成或脂类代谢产生具有增加水平的基因产物的植物的方法，具有增加水平的植物亚麻酸（gla）的诱导，以在缺乏或缺少gla的植物中诱导至少一种γ-亚麻酸（gla）或十八碳烯酸（ota）的产生，从而减少用于合成脂肪酸的基因的产生或植物中的脂质代谢或脂质代谢，以及共抑制植物中脂肪酸或脂质代谢的天然基因的合成