制备慢病毒颗粒包装EBOVRNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法

摘要

本发明公开了制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法，制备方法将EBOV的三个基因NP、GP和L基因的部分片段串联后整合到慢病毒的表达载体中，将构建的慢病毒表达质粒与包装质粒分别在工程大肠杆菌菌株中扩增，得到大量的质粒，再将构建的表达质粒和包装质粒共同转染至HEK293T细胞中，经细胞表达后得到大量的包装了EBOV的RNA基因的慢病毒颗粒。本发明涉及基因工程技术领域。该制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法，得到的颗粒作为EBOV核酸检测的阳性参考品，具有很好模拟实际样本中从病毒核酸提取到核酸检测的整个过程的优点，将EBOV的假病毒颗粒通过冻干保护剂进行冻干后得到的冻干粉，非常稳定。