一种孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法

摘要

本发明公开了一种孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法。本发明选择出高效繁殖寄主粉蚧的寄主植物种类；瓢虫按其卵、幼虫、蛹和成虫四个发育阶段分期饲养，并发现了该产卵诱集物的提取技术，并结合该瓢虫的产卵机制收集该瓢虫卵；提出了瓢虫不同阶段的适宜饲养技术、温湿度条件及储存条件；成虫盒式包装，幼虫、卵纸袋式包装，便于田间释放和推广应用。实现了优质、高效、大批量繁殖孟氏隐唇瓢虫，满足生产的需要。

说明书

技术领域：

本发明属于天敌昆虫人工饲养领域，具体涉及一种孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法。 

背景技术：

瓢虫种类繁多，大多作为农林害虫的优秀捕食性天敌，保护和利用天敌昆虫的优越性，控制农林害虫已引起生态和农业科学家的关注，在国内外已有一些成功事例。近年来，有关瓢虫的人工饲料及有关生态学、生物学的特性等方面的研究取得了长足进展。但其规模化和标准化饲养技术还有待完善，在饲养器具、大批量生产工艺标准、包装储存技术等方面都存在较大问题，因此限制了优秀天敌昆虫适时的、大量的供应，不能满足目前生产的需要。 

发明内容：

本发明的目的是克服上述现有技术中的不足，提供一种优质、高效、大批量生产孟氏隐唇瓢虫，满足农林相关害虫防治的需要的孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法。 

本发明的孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法，其特征在于，包括以下步骤： 

(1)、粉蚧培养：以南瓜果实作为寄主植物培养粉蚧； 

(2)、瓢虫培养： 

a.卵期管理：在饲养盒内放置脱脂棉团，并涂抹产卵诱集物粉蚧蜡质，羽化交配的孟氏隐唇瓢虫产卵于棉团上，收取棉团备用或置于透气的塑料盒中，并冷藏在14-17℃的条件下备用； 

b.幼虫笼养：在温度24-28℃，相对湿度40-75％，光照14小时/天条件下，将步骤(1) 中的带有粉蚧的南瓜放入养虫笼中的托盘上；将收集的带有孟氏隐唇瓢虫卵的棉团接到南瓜上，幼虫孵化后，南瓜上粉蚧的数量逐渐增加，任由瓢虫取食生长，直到南瓜上的粉蚧取食殆尽，只剩粉蚧蜡丝时，放入新的布满粉蚧的南瓜； 

c、蛹期：温度24-28℃，相对湿度40-75％条件下，待瓢虫幼虫长至4龄末期老熟幼虫时，将其在养虫笼中挑出置于培养皿中，并放入粉蚧保证其食料充分，直至化蛹； 

d.成虫的羽化：将瓢虫蛹放入24-28℃，相对湿度40-75％的条件下发育，羽化后进行饲养，饲养时雌雄比例为1:1，同时补充粉蚧补充营养，以确保成虫能够正常生长和繁殖，使其产卵。 

所述的以南瓜果实作为寄主植物培养粉蚧具体步骤优选为：24-28℃，相对湿度50-75％，光照14小时/天条件下，选取表面较为粗糙的南瓜，用湿布擦净，晾干后，放在三角托架上，用宽度1.5±0.5cm的纸条搭桥，连接新买的南瓜和长满粉蚧的南瓜，以便粉蚧能转移爬行到新的寄主上，20-30天后，粉蚧长满覆盖新鲜的南瓜时，便可用于饲养瓢虫幼虫和成虫，期间如果搭桥的纸条发霉或布满粉蚧分泌的蜜露时，要及时更换纸条。 

所述的粉蚧蜡质是用体积分数99％丙酮水溶液浸取带卵鞘的粉蚧，去除虫体和丝质物质后的滤液用滤纸过滤，滤渣经干燥后即为粉蚧蜡质。 

在整个人工繁殖过程中，可以获得孟氏隐唇瓢虫的卵、幼虫和成虫，成虫可以采用盒式包装，幼虫、卵纸袋式包装。瓢虫卵粒冷藏在14-17℃、相对湿度55-75％条件下，可以延长孵化期。瓢虫成虫羽化7-10天后于温度10℃、相对湿度55-75％条件下进行冷藏，期间每6天饲喂一次蜂蜜水补充营养，保存期达60天左右。 

本发明有如下优点：选择出高效繁殖寄主粉蚧的寄主植物种类及粉蚧大量获得技术；孟 氏隐唇瓢虫按其卵、幼虫、蛹和成虫四个发育阶段分期饲养，根据其生物、生态学特性而采用适宜饲养技术；试验研制了大量繁殖用器具，提高了繁殖效率；利用物理及化学方法诱集瓢虫产卵，便于集中收集培养；试验确定了饲养及储存条件；成虫盒式包装，幼虫、卵纸袋式包装，便于田间释放和推广应用。探索出利用活体粉蚧大批量繁殖瓢虫的关键技术，实现了优质、高效、大批量繁殖瓢虫，用于防治粉蚧等农林害虫，满足生产的需要。 

本发明选择出高效繁殖寄主粉蚧的寄主植物种类；瓢虫按其卵、幼虫、蛹和成虫四个发育阶段分期饲养，并发现了该产卵诱集物的提取技术，并结合该瓢虫的产卵机制收集该瓢虫卵；提出了瓢虫不同阶段的适宜饲养技术、温湿度条件及储存条件；成虫盒式包装，幼虫、卵纸袋式包装，便于田间释放和推广应用。实现了优质、高效、大批量繁殖孟氏隐唇瓢虫，满足生产的需要。 

附图说明：

图1是本发明的孟氏隐唇瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法的流程图。 

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。 

实施例1： 

参见图1，本实施例的人工饲养、保种和繁殖生产孟氏隐唇瓢虫的步骤如下： 

(1)、粉蚧培养：以南瓜果实作为寄主植物培养粉蚧；24-28℃，相对湿度50-75％，光照14小时/天条件下，选取表面较为粗糙的南瓜，用湿布擦净，晾干后，放在三角托架上，用宽度1.5±0.5cm的纸条搭桥，连接新买的南瓜和长满粉蚧的南瓜，以便粉蚧能转移爬行到新的寄主上，20-30天后，粉蚧长满覆盖新鲜的南瓜时，便可用于饲养瓢虫幼虫和成虫，期间 如果搭桥的纸条发霉或布满粉蚧分泌的蜜露时，要及时更换纸条； 

(2)、瓢虫培养： 

a.卵期管理：将孟氏隐唇瓢虫蛹放入24-28℃，相对湿度40-75％的条件下发育，羽化后进行饲养，饲养时雌雄比例为1：1，瓢虫饲养一周后于温度10℃下进行冷藏产卵或者直接用于产卵；瓢虫羽化后5-7天开始产卵，在饲养盒内放置脱脂棉团，并涂抹产卵诱集物(粉蚧蜡质)，交配羽化的孟氏隐唇瓢虫产卵于棉团的缝隙中，收取棉团，将每日收集的棉团备用或置于透气的塑料盒中，并冷藏在14-17℃的条件下备用(可以延长10天孵化，正常为5天左右)； 

b.幼虫笼养：在温度24-28℃，相对湿度40-75％，光照14小时/天条件下，将步骤(1)中的粉蚧爬满南瓜表面的90％的南瓜放入铝合金养虫笼中的托盘上(接种粉蚧30天左右)；将收集的带有孟氏隐唇瓢虫卵的棉团均匀接到南瓜上，大概每4平方厘米接一个棉团，幼虫孵化后，南瓜上粉蚧的数量也逐渐增加，任由瓢虫取食生长，直到南瓜上的粉蚧取食殆尽，只剩粉蚧蜡丝时，放入新的布满粉蚧的南瓜； 

c、蛹期：温度24-28℃，相对湿度40-75％条件下，待瓢虫幼虫长至4龄末期老熟幼虫(一般静止不动蜷缩在一起)时，将其在养虫笼中挑出置于大塑料培养皿中(9×1.5cm)，大约每皿25头，并放入少量粉蚧保证其食料充分，直至化蛹； 

d.成虫的羽化：将瓢虫蛹放入24-28℃，相对湿度40-75％的条件下发育，羽化后进行饲养，饲养时雌雄比例为1:1，同时补充粉蚧补充营养，以确保成虫能够正常生长和繁殖，使其产卵。 

在整个人工繁殖过程中，可以获得瓢虫的卵、幼虫和成虫，成虫可以采用盒式包装，幼 虫、卵纸袋式包装。瓢虫卵粒冷藏在14-17℃、相对湿度55-75％条件下，可以延长孵化期。瓢虫成虫羽化7-10天后于温度10℃、相对湿度55-75％条件下进行冷藏，期间每6天饲喂一次蜂蜜水补充营养，保存期达60天左右。 

由此实现了优质、高效、大批量繁殖瓢虫的目的。 

试验施1：粉蚧蜡质的提取及活性鉴定 

粉蚧蜡质的挑取：带卵鞘的粉蚧放入具塞玻璃广口瓶中，然后加入浓度为体积分数99％丙酮水溶液，盖上盖子后，用手摇晃广口瓶大约10分钟，然后放置于桌面上静止，会看到瓶中有白色絮状沉淀析出，用镊子把瓶中缠绕在一起的丝质物质挑出，剩余的浑浊液摇晃一下后用30筛目的铁筛滤掉浑浊液中的粉蚧虫体，得到浑浊液，然后把浑浊液用玻璃棒引流到带滤纸的长颈漏斗中，漏斗下方接具塞锥形瓶。过滤完之后，滤纸上有白色絮状沉淀，在室温通风情况下，滤纸上的絮状沉淀就会干燥板结，该板结的白色物质就是从粉蚧上洗脱出来的蜡质物，即粉蚧蜡质，可以通过以下试验证明其具备诱使孟氏隐唇瓢虫产卵的活性。 

粉蚧蜡质活性鉴定试验：为孟氏隐唇瓢虫提供4种产卵基质。第一，脱脂棉；第二，浸渍过上述粉蚧丙酮洗脱液的脱脂棉，简称浸渍棉：将脱脂棉浸渍于粉蚧的丙酮洗脱液中，然后放于室温下自然风干48h后置于密封的塑料瓶中备用；第三，在一侧涂抹上述粉蚧蜡质的脱脂棉球，简称蜡棉；第四，粉蚧卵鞘。把这4种基质分别放置于过大塑料培养皿(9×1.5cm)圆心的两条垂直的直线与内壁相交之处的4个点上，基质底部都用双面胶固定。选取已交配并开始产卵的孟氏隐唇瓢虫雌虫用8-12头体型大小相似的粉蚧若虫喂养12小时后，挑出置于上述载有4种基质的大塑料培养皿中，不提供任何食物，12小时后记录每种载卵基质的个 数及其载卵量，每组重复中样本产卵的个数，共8组重复，每组重复20个样本(雌虫)，共160个样本。 

计算每组重复中，每种基质的总载卵量；基质载卵量占组内总产卵量的比例(每种基质载卵量所占比例)＝组内每种基质上的总载卵量/组内总产卵量×100％；相对产卵率＝组内载卵基质的个数/产卵雌虫个数×100％；组内基质平均载卵量＝基质总载卵量/载卵基质的个数。对于以上4个观测内容使用统计分析软件SPSS17.0计算平均值和标准误，并对其进行多个样本相关性检验(k Related Samples)。 

表1：选择条件下孟氏隐唇瓢虫在不同基质上的产卵比较 

注：表中数据为平均值±标准误，同列内标记相同字母表示其在0.05水平下无显著差异。 

从表1可以看出，孟氏隐唇瓢虫在蜡棉和粉蚧卵鞘上的产卵量并无显著差异，并且要显著高于在棉花和浸渍棉上的产卵量。说明蜡棉上的蜡质具有诱使孟氏隐唇瓢虫产卵的活性。 

试验施2：不同温度对孟氏隐唇瓢虫发育的影响(陈先锋等，2000)。 

在人工气候箱内设置14℃,17℃,20℃,23℃,26℃,29℃,32℃,34℃等8个温度梯度,相 对湿度为75％左右,光照L∶D＝12∶12。把着有新鲜孟氏隐唇瓢虫卵的滤纸放入培养皿(内径120mm,高15mm)内,每个温度梯度放置150粒卵,观察卵的孵化情况。幼虫期用同一温度孵化的幼虫50头,在小瓶(内径30mm,高50mm)内用柑橘粉蚧饲养,每头幼虫占1小瓶,瓶口用纱布包扎,以防幼虫逃逸。适时更换饲料,每天观察蜕皮、化蛹、羽化和死亡情况。成虫期用刚羽化的10对成虫(含1雌1雄),分别置于10个小瓶中饲养,瓶口用纱布包扎。每天上午更换饲料,用解剖镜检查更换出来的饲料中的卵量。观察自孟氏隐唇瓢虫羽化后开始直到成虫自然死亡为止。 

表2：不同温度下孟氏隐唇瓢虫各发育阶段的历期(d) 

表3：不同温度下孟氏隐唇瓢虫各虫态及世代的存活率(％) 

从试验结果(表2和表3)看，在23～29℃范围内，孟氏隐唇瓢虫各虫态的发育历期较短，并且有着较高的存活率，其中以26℃下的世代的存活率最高位49.7％，所以26℃左右的温度适合大量繁殖孟氏隐唇瓢虫。 

试验例3：棉花替代蜡棉作为基质收集瓢虫的卵 

将配对交配的孟氏隐唇瓢虫雌雄成虫置于小塑料培养皿(6cm×1.5cm)中饲养，并从南瓜果实上挑取10-15头体型相似的体表蜡质较少的柑橘粉蚧若虫放入培养皿中喂食孟氏隐唇瓢虫12小时(该12小时成为取食时段)，之后把雌雄成虫置于装有相应的产卵基质的小塑料培养皿中，让雌虫产卵12小时(该12小时称为产卵时段)，之后，将孟氏隐唇瓢虫雌雄成虫挑出，置于小塑料培养皿中继续提供前述新鲜的粉蚧让其取食，如此反复，连续进行10天。试验设置2个产卵基质处理：脱脂棉团，涂抹粉蚧蜡质的脱脂棉团(只在棉团的一侧涂抹，粉蚧蜡质重约0.7-0.85mg)，以下简称蜡棉。每个处理30个样本。 

连续记录10天不同基质处理下每天2个时段内产卵的孟氏隐唇瓢虫的头数和对应的产卵量。计算不同产卵基质处理孟氏隐唇瓢虫时段内产卵率(每日某时段内产卵的雌虫头数/30×100％)、时段内产卵总量(每日某时段内收集到的30头孟氏隐唇瓢虫的卵数)、每日产卵 总量(每日取食时段内的产卵总量与产卵时段内的产卵总量之和，即24小时产卵总量)、每日同时段内的平均产卵量(该时段内的产卵重量/产卵雌虫数)。 

表4.不同基质处理下孟氏隐唇瓢虫在取食时段内的日平均产卵量(粒卵/每雌) 

表中数据为平均值±标准误。同列内标记相同字母表示其在0.05水平下无显著差异,下表同。 

表5.不同基质处理下孟氏隐唇瓢虫在产卵时段内的日平均产卵量(粒卵/每雌) 

表6不同基质处理下孟氏隐唇瓢虫在不同时段内的产卵率 

表中A代表取食时段，B代表产卵时段。 

表4和表5的结果表明以棉花作为产卵基质和以蜡棉作为产卵基质，在连续10日内，孟氏隐唇瓢虫对应时段内的平均产卵量均无显著差异，而且产卵时段内的平均产卵量为10粒左右，而取食时段内的平均产卵量仅为2.5粒左右，说明孟氏隐唇瓢虫的产卵几乎集中在产卵时段，此外，在收集该瓢虫卵的时候，可以使用棉花代替蜡棉，即代替粉蚧卵鞘(因为蜡棉具备粉蚧卵鞘的特性)作为孟氏隐唇瓢虫的产卵基质，使用上述的方法收集该瓢虫的产卵。虽然以棉花作为产卵基质，孟氏隐唇瓢虫的产卵率要稍低于以蜡棉作为产卵基质的处理(表6)，但是蜡棉需要提取猎物蜡质后才能制得，而使用棉花则更为简洁方便，同时减少提取猎物蜡质的成本，符合大量收集虫卵，规模化繁殖瓢虫的需求。 

试验施4:幼虫间的自残程度 

将收集到的孟氏隐唇瓢虫的卵置于大塑料培养皿(9×1.5cm)中分开用粉蚧饲养，以获取非同胞幼虫。当幼虫发育到指定龄期(蜕皮<12小时)后用于自残试验。试验设置3个组合：1)低龄(2龄)×低龄(2龄)；2)低龄(2龄)×高龄(4龄)；3)高龄(4龄)×高龄(4龄)。同龄幼虫体型大小相似，不提供任何食物，分别于12，24，36，48，60小时观察记录2头幼虫的存活状况，每个组合20个样本。计算每个组合20个样本的累积死亡率。试验结果如下： 

表7：幼虫的自残死亡率 

由表7的试验结果表明，在没有食物的条件下，孟氏隐唇瓢虫的自残主要发生在高龄幼虫与低龄幼虫之间，60h内的自残累积死亡率达到70％，而在高龄幼虫之间，以及低龄幼虫之间60h内自残所造成的累积死亡率均未超过30％，这可能主要是因为孟氏隐唇瓢虫的幼虫体被浓密的蜡质，能有效地抑制自残所造成的伤害。而高龄幼虫由于虫重的优势，即使低龄幼虫有着蜡质的保护，也很难抑制高龄幼虫对它们的袭击。但是，因为孟氏隐唇瓢虫的低龄幼虫一般都生活在猎物之下，能很好地躲避高龄幼虫，所以综上所述，幼虫完全可以采用笼养的方式饲养而不会造成其由于自残而大量死亡。 

试验施5：成虫的耐寒性 

将羽化1天内的孟氏隐唇瓢虫置于大塑料培养皿中饲养，每皿25头，每日定时更换新鲜的粉蚧，7天后置于10±1℃，L:D＝12:12，RH＝70±5％的人工气候箱中保存。以后每3天，取出4皿置于室温(26±2℃)中回暖,并观察皿内瓢虫的存活情况，取到第21天。试验结果如表8： 

表8：孟氏隐唇瓢虫成虫低温储藏的存活率 

表8中的结果表明，孟氏隐唇瓢虫在10℃冷藏6天后，存活率仍可高达94％，但是到第 9天存活率就下降为60％，之后随着冷藏天数的增加存活率也逐渐降低。所以对于孟氏隐唇瓢虫成虫的储藏以10℃，6天为一周期比较合适，冷藏6天之后要提供新鲜粉蚧让其取食，补充能量，之后再继续进行冷藏，已达到长时间冷藏并保有较高存活率的要求。