孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达

摘要

采用RT-PCR和RACE技术,从孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant中成功克隆出气味结合蛋白(ComOBP1)基因的全序列(Genbank登陆号:KU170686).ComOBP1基因全长922 bp,包括5'端长为40 bp的非编码区域(UTR),及3'端长为462 bp的UTR,开放阅读框ORF长为420 bp,编码139个氨基酸,预测的分子量为15.516 kDa,等电点pI为6.57,存在AATAAA加尾信号.N-末端疏水区包含由20个氨基酸构成的信号肽,无跨膜结构,有4个保守的半胱氨酸,属于Minus-C OBP,也是在孟氏隐唇瓢虫中发现的第一个Minus-C OBP.氨基酸序列中有且仅有一个N-糖基化位点为62 NLSA,并存在2个潜在的磷酸化位点.与其它昆虫的Minus-C OBPs进行同源性比较并构建系统发育树,发现与同为鞘翅目Coleoptera昆虫的同源性较高.利用Real-time PCR、RT-PCR技术对CmonOBP1基因在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段,不同组织,不同营养条件及不同食性下的表达水平进行了测定,结果显示,CmonOBP1基因在整个发育阶段均有表达,雄性成虫期具有最高表达量,且多在成虫的头部及翅部表达.当营养条件发生变化时,表达丰度不会发生变化,当猎物由天然猎物柑橘粉蚧Planococcus citri Risso变成碗豆 修尾蚜Megoura japonica Matsumura时,表达量会明显下降.该结果表明,孟氏隐唇瓢虫的不同发育阶段、不同组织及猎物种类会影响CmonOBP1基因的表达,从而进一步影响其嗅觉行为.同时,CmonOBP1基因可能在雄虫相关的信息素感受过程中发挥着重要作用.