作为SYK酪氨酸激酶抑制剂和GCN2丝氨酸激酶抑制剂的8-取代2-氨基-1,2,4三唑并1,5-A吡嗪

摘要

式I的化合物为Syk的抑制剂，并且尤其可用于治疗癌症、类风湿性关节炎和/或系统狼疮，其中R

说明书

发明背景

本发明的的目是发现具有有价值的性质的新型化合物，特别是可用于制备药物的那些。

本发明涉及化合物和化合物的用途，其中抑制、调整和/或调制经由激酶(特别是酪氨酸激酶)的信号转导，此外，本发明涉及包含这些化合物的药物组合物和所述化合物用于治疗激酶-诱导的疾病的用途。

因为蛋白质激酶调整几乎每一个细胞过程，包括代谢、细胞增殖、细胞分化和细胞存活，它们是用于各种疾病状态的治疗介入的有吸引力的靶。例如，其中蛋白质激酶起到枢纽作用的细胞-循环控制和血管发生为与众多疾病状况关联的细胞过程，所述疾病状况例如但不限于癌症、炎性疾病、异常血管发生和与之相关的疾病、动脉粥样硬化、黄斑变性、糖尿病、肥胖和疼痛。

在激活肥大细胞后，在发信号路径中的一个关键事情是激活酪氨酸激酶Syk。通过释放前炎性介体和细胞因子，肥大细胞在哮喘和过敏性病症中起到关键性作用。FcεRJ(IgE的高亲和力受体)的抗原-介导的聚集导致激活肥大细胞。这触发一系列发信号事件，导致释放介体，包括组胺、蛋白酶、白细胞三烯和细胞因子。这些介体引起提高的血管渗透性、粘液产生、支气管收缩、组织退化和发炎，因此在哮喘和过敏性病症的病因学和症状中起到关键的作用。Syk激酶用作导致介体释放的所有随后发信号的中心引发剂。通过含有Syk激酶SH₂区域(用作Syk激酶的抑制剂)的蛋白质，通过完全抑制介体释放，证明Syk激酶在发信号路径中的关键性作用(J. A.Taylor等人，Molec. and Cell Biol，15：4149-4157 (1995)。

Syk (脾-酪氨酸-激酶)为属于细胞内酪氨酸激酶的亚族的72 kDa 非受体酪氨酸激酶，尤其包含ZAP70、Pyk2、Abl、Tie2、KDR和HER。Syk为FcR (FcγRI、II、III、FcεRI、FcαR)和BCR发信号的主要调节剂，并且在整个造血系统以及在纤维原细胞、破骨细胞、肝细胞、上皮和神经元细胞中表达。除了C末端激酶区域以外，SYK呈现两个SH₂区域和超过10个自动磷酸化部位¹。

借助其两个SH₂区域，SYK特别被吸收到磷酸化的ITAM (存在于免疫受体中的基于免疫受体酪氨酸的激活模体，例如FcγRI、IIA、IIIA、FcαR、FcεRI和BCR，通过单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞、嗜中性白细胞和B细胞表达)，并且特别介导通过激活在肥大细胞、B细胞、巨噬细胞、单核细胞、嗜中性白细胞、嗜曙红细胞、NK细胞、DC细胞血小板和破骨细胞中的那些受体而触发的免疫受体发信号^1,2。

当BCR交联后，在Igα/Igβ的胞质尾部的ITAM模体处的酪氨酸残基被Src-族激酶Lyn磷酸化，产生SYK的停靠部位，因此SYK被吸收至BCR免疫复合物。SYK随后磷酸化，并且通过Src-族激酶Lyn激活。在激活后，SYK将使连接体蛋白质BLNK磷酸化，允许其与BTK和PLCγ₂二者经由它们的相应SH₂区域相互作用。SYK磷酸化的-并因此激活的-BTK进而磷酸化并激活PLCγ₂，导致IP₃形成，Ca²⁺转移，PKC和MAPK激活和随后的NFAT、AP-1和NFκB转录因子激活，导致激活和表面标记物表达，细胞因子释放，B细胞的存活和增殖³。在肥大细胞中，变应原激活的FcεRI被LYN和FYN磷酸化，并且吸收SYK，SKY进而被LYN磷酸化，并且进一步自动磷酸化，变得完全被激活。激活的SYK使两个连接体分子NTAL和LAT磷酸化，对于含有SH₂的蛋白质(例如PLCγ₁、vav和PI3K的p85调节亚单位)，产生更多的停靠部位，导致肥大细胞去粒和细胞因子产生⁴。Syk在肥大细胞的信号转导中的关键性作用通过以下可再现的观察结果证实：不能去粒的来自人供体的10-15%的嗜碱细胞(循环肥大细胞)具有降低量的Syk蛋白质^5,6。此外，对于破骨细胞的骨再吸收活性，需要SYK。在通过αvβ3整联蛋白刺激破骨细胞后，SYK变成被磷酸化，最可能被c-Src磷酸化，采用DAP-12/FcγRII依赖性机制，导致SPL-76和Vav3磷酸化和随后的细胞骨架再组织。SYK缺陷破骨细胞为非活性，并且显示缺陷细胞骨架再组织。与此相关，SYK缺陷胚胎显示缺陷骨骼质量^7,8。

在淋巴结中BCR-介导的B-细胞激活以及在关节中FcR-介导的激活树枝状细胞、单核细胞、巨噬细胞、嗜中性白细胞和肥大细胞为在类风湿性关节炎(RA)期间发生的细胞病理-生理机制的必要的组分。此外，激活破骨细胞导致骨和软骨破坏，这是该病理学的标志⁹。因此，在关节炎发展期间，SYK发信号应起到枢纽作用，在外周和发炎部位二者处¹⁰。实际上，由Rigel开发的口服可用的Syk抑制剂R406诱导临床分数的显著提高并且显著降低血清细胞因子浓度以及骨腐蚀，采用RA的鼠科模式^11,12。此外，在人的RA阶段II研究中，该抑制剂已显示效力(ACR分数提高)和良好的耐受性^13,14,15。

在SLE中，经由产生自动抗体，B细胞本质上引起发病机理，导致免疫复合物形成，刺激Fc受体和最终导致过度和慢性激活发炎。在使用Syk抑制剂的SLE治疗的鼠科模式中，导致分级转换的胚芽中心、边缘区域、新形成的和滤泡B细胞的数量降低，因此导致疾病减轻效果¹⁸。

虽然在胸腺细胞和幼稚T细胞中，TCR信号通过细胞内酪氨酸激酶ZAP-70传输，但是若干研究指示分化的效应器T细胞(例如涉及多发性硬化(MS)或系统性红斑狼疮(SLE)的病理生理学的那些)显示TCRζ链下调和伴随的TCR/CD3链上调及其与FcRγ的相互作用。那些研究显示在效应器细胞中的TCR/CD3/FcRγ复合物吸收并激活Syk，而不是ZAP-70酪氨酸激酶。TCR发信号中的该生理学转换在效应器而不是幼稚或记忆T细胞中排他地发生^16,17,18。则不出意外地，在SLE的鼠科模式中，SYK抑制剂已显示延迟疾病发展和改进存活^{17,18,19,20,21}。

SYK抑制剂还可适用于哮喘、过敏症、多发性硬化和其它疾病，例如血小板减少性紫癜和T或B细胞淋巴肿瘤^{1,10,14,22-35}。

使用Syk抑制剂治疗事先患病的NZB/W小鼠防止肾病的发展，通过降低的肾小球硬化、肾小管破坏、蛋白尿和BUN水平证明¹⁸。

参考文献

1. Turner，M.，Schweighoffer，E.，Colucci，F.，Di Santo，J.P. & Tybulewicz，V.L. Tyrosine kinase SYK: essential functions for immunoreceptor signalling(酪氨酸激酶SYK：用于免疫受体发信号的基本功能). Immunol Today 21，148-154 (2000). 

2. Ghosh，D. & Tsokos，G.C. Spleen tyrosine kinase: an Src family of non-receptor kinase has multiple functions and represents a valuable therapeutic target in the treatment of autoimmune and inflammatory diseases(脾酪氨酸激酶：在治疗自身免疫和炎性疾病中非受体激酶的Src族具有多重功能并且代表有价值的治疗靶). Autoimmunity 43，48-55. 

3. Lindvall，J.M.等人. Bruton's tyrosine kinase: cell biology，sequence conservation，mutation spectrum，siRNA modifications，and expression profiling(Bruton酪氨酸激酶：细胞生物学、序列保守、突变谱、siRNA改性和表达特性). Immunol Rev 203，200-215 (2005). 

4. Gilfillan，A.M. & Tkaczyk，C. Integrated signalling pathways for mast-cell activation(用于肥大-细胞激活的结合的发信号路径). Nat Rev Immunol 6，218-230 (2006). 

5. Gomez，G.，Schwartz，L. & Kepley，C. Syk deficiency in human non-releaser lung mast cells(在人非释放器肺肥大细胞中的Syk缺陷). Clin Immunol 125，112-115 (2007). 

6. Kepley，C.L.，Youssef，L.，Andrews，R.P.，Wilson，B.S. & Oliver，J.M.. Syk deficiency in nonreleaser basophils(在非释放器嗜碱细胞中的Syk缺陷). J Allergy Clin Immunol 104，279-284 (1999). 

7. Zou，W.等人. Syk，c-Src，the alphavbeta3 integrin，and ITAM immunoreceptors，in concert，regulate osteoclastic bone resorption(Syk、c-Src、αvβ3整联蛋白和ITAM免疫受体一致调整破骨细胞骨再吸收). J Cell Biol 176，877-888 (2007). 

8. Reeve，J.L.等人. SLP-76 couples Syk to the osteoclast cytoskeleton (SLP-76偶联Syk至破骨细胞细胞骨架). J Immunol 183，1804-1812 (2009). 

9. Klareskog，L.，Catrina，A.I. & Paget，S. Rheumatoid arthritis(类风湿性关节炎). Lancet 373，659-672 (2009). 

10. Wong，B.R.，Grossbard，E.B.，Payan，D.G. & Masuda，E.S. Targeting Syk as a treatment for allergic and autoimmune disorders(靶向Syk作为过敏性和自身免疫病症的治疗). Expert Opin Investig Drugs 13，743-762 (2004). 

11. Braselmann，S.等人. R406，an orally available spleen tyrosine kinase inhibitor blocks fc receptor signaling and reduces immune complex-mediated inflammation(口服可用的脾酪氨酸激酶抑制剂阻断fc受体发信号并且降低免疫复合物-介导的发炎). J Pharmacol Exp Ther 319，998-1008 (2006). 

12. Pine，P.R.等人. Inflammation and bone erosion are suppressed in models of rheumatoid arthritis following treatment with a novel Syk inhibitor(在采用使用新型Syk抑制剂治疗的类风湿性关节炎模式中抑制发炎和骨腐蚀). Clin Immunol 124，244-257 (2007). 

13. Tomillero，A. & Moral，M.A. Gateways to clinical trials(临床试验的途径). Methods Find Exp Clin Pharmacol 31，47-57 (2009). 

14. Bajpai，M. Fostamatinib，a Syk inhibitor prodrug for the treatment of inflammatory diseases(用于治疗炎性疾病的Syk抑制剂前药). IDrugs 12，174-185 (2009). 

15. Weinblatt，M.E.等人. Treatment of rheumatoid arthritis with a Syk kinase inhibitor: a twelve-week，randomized，placebo-controlled trial(使用Syk激酶抑制剂治疗类风湿性关节炎：12周，随机，安慰剂-对照试验). Arthritis Rheum 58，3309-3318 (2008). 

16. Krishnan，S.，Warke，V.G.，Nambiar，M.P.，Tsokos，G.C. & Farber，D.L. The FcR gamma subunit and Syk kinase replace the CD3 zeta-chain and ZAP-70 kinase in the TCR signaling complex of human effector CD4 T cells(在人效应器CD4 T细胞的TCR发信号复合物中，FcRγ亚组和Syk激酶代替CD3 ζ-链和ZAP-70激酶). J Immunol 170，4189-4195 (2003). 

17. Krishnan，S.等人. Differential expression and molecular associations of Syk in systemic lupus erythematosus T cells(在系统性红斑狼疮T细胞中Syk的分化表达和分子关联). J Immunol 181，8145-8152 (2008). 

18. Bahjat，F.R.等人. An orally bioavailable spleen tyrosine kinase inhibitor delays disease progression and prolongs survival in murine lupus(口服生物可用的脾酪氨酸激酶抑制剂延迟疾病发展和在鼠科狼疮中延长存活). Arthritis Rheum 58，1433-1444 (2008). 

19. Smith，J.等人. A Spleen Tyrosine Kinase Inhibitor Reduces the Severity of Established Glomerulonephritis(脾酪氨酸激酶抑制剂降低建立的肾小球性肾炎的严重性). J Am Soc Nephrol (2009). 

20. Enyedy，E.J.等人. Fc epsilon receptor type I gamma chain replaces the deficient T cell receptor zeta chain in T cells of patients with systemic lupus erythematosus(在患有系统性红斑狼疮的患者的T细胞中Fcε受体I型γ链代替缺陷T细胞受体ζ链). Arthritis Rheum 44，1114-1121 (2001). 

21. Perl，A. Systems biology of lupus: mapping the impact of genomic and environmental factors on gene expression signatures，cellular signaling，metabolic pathways，hormonal and cytokine imbalance，and selecting targets for treatment(狼疮的系统生物学：绘制基因组和环境因素对基因表达签名、细胞发信号、代谢路径、激素和细胞因子不平衡和选择靶用于治疗的影响). Autoimmunity 43，32-47. 

22. Smith，J.等人. A spleen tyrosine kinase inhibitor reduces the severity of established glomerulonephritis(脾酪氨酸激酶抑制剂降低建立的肾小球性肾炎的严重性). J Am Soc Nephrol 21，231-236. 

23. Sanderson，M.P.，Gelling，S.J.，Rippmann，J.F. & Schnapp，A. Comparison of the anti-allergic activity of Syk inhibitors with optimized Syk siRNAs in FcepsilonRI-activated RBL-2H3 basophilic cells(在FcεRI-激活的RBL-2H3嗜碱性细胞中Syk抑制剂与优化的Syk siRNAs的抗过敏性活性的比较). Cell Immunol 262，28-34. 

24. Podolanczuk，A.，Lazarus，A.H.，Crow，A.R.，Grossbard，E. & Bussel，J.B. Of mice and men: an open-label pilot study for treatment of immune thrombocytopenic purpura by an inhibitor of Syk(小鼠和人：用于通过Syk的抑制剂治疗免疫血小板减少性紫癜的敞开标记的试点研究). Blood 113，3154-3160 (2009). 

25. Bajpai，M.，Chopra，P.，Dastidar，S.G. & Ray，A. Spleen tyrosine kinase: a novel target for therapeutic intervention of rheumatoid arthritis(脾酪氨酸激酶：用于类风湿性关节炎的治疗介入的新型靶). Expert Opin Investig Drugs 17，641-659 (2008). 

26. Friedberg，J.W.等人. Inhibition of Syk with fostamatinib disodium has significant clinical activity in non-Hodgkin lymphoma and chronic lymphocytic leukemia(使用fostamatinib 二钠抑制Syk在非霍奇金淋巴肿瘤和慢性淋巴细胞白血病中具有显著的临床活性). Blood 115，2578-2585. 

27. Gao，C.等人. Eptifibatide-induced thrombocytopenia and thrombosis in humans require FcgammaRIIa and the integrin beta3 cytoplasmic domain(人的依替巴肽-诱导的血小板减少性和血栓症需要FcγRIIa和整合素β3胞浆区域). J Clin Invest 119，504-511 (2009). 

28. Marjon，K.D.，Marnell，L.L.，Mold，C. & Du Clos，T.W. Macrophages activated by C-reactive protein through Fc gamma RI transfer suppression of immune thrombocytopenia(通过C-反应性蛋白质激活的巨噬细胞通过Fc γ RI转移抑制免疫血小板减少性). J Immunol 182，1397-1403 (2009). 

29. Chen，L.等人. SYK-dependent tonic B-cell receptor signaling is a rational treatment target in diffuse large B-cell lymphoma(在扩散大B-细胞淋巴肿瘤中，SYK-依赖性强壮B-细胞受体发信号为理性治疗靶). Blood 111，2230-2237 (2008). 

30. Ponzoni，M.等人. Syk expression patterns differ among B-cell lymphomas(在B-细胞淋巴肿瘤中Syk表达方式不同). Leuk Res (2010). 

31. Pechloff，K.等人. The fusion kinase ITK-SYK mimics a T cell receptor signal and drives oncogenesis in conditional mouse models of peripheral T cell lymphoma(在外周T细胞淋巴肿瘤的状况小鼠模式中，熔解激酶ITK-SYK模仿T细胞受体信号并且驱动肿瘤发生). J Exp Med 207，1031-1044 (2009). 

32. Uckun，F.M.，Ek，R.O.，Jan，S.T.，Chen，C.L. & Qazi，S. Targeting SYK kinase-dependent anti-apoptotic resistance pathway in B-lineage acute lymphoblastic leukaemia (ALL) cells with a potent SYK inhibitory pentapeptide mimic(在具有有效的SYK抑制五肽模仿的B-系统急性成淋巴细胞白血病(ALL)细胞中，靶向SYK激酶-依赖性防止中风抗性路径). Br J Haematol 149，508-517 (2010). 

33. Wilcox，R.A.等人. Inhibition of Syk protein tyrosine kinase induces apoptosis and blocks proliferation in T-cell non-Hodgkin's lymphoma cell lines(在T-细胞非霍奇金淋巴肿瘤细胞系中，抑制Syk蛋白质酪氨酸激酶诱导凋亡和阻断增殖). Leukemia 24，229-232 (2009). 

34. Feldman，A.L.等人. Overexpression of Syk tyrosine kinase in peripheral T-cell lymphomas(Syk酪氨酸激酶在外周T-细胞淋巴肿瘤中的过表达). Leukemia 22，1139-1143 (2008). 

35. Wang，L.等人. Alternative splicing disrupts a nuclear localization signal in spleen tyrosine kinase that is required for invasion suppression in breast cancer(在需要浸入抑制乳腺癌的脾酪氨酸激酶中，交替拼接扰乱核定位信). Cancer Res 63，4724-4730 (2003)。

除了肥大细胞以外，Syk在其它造血细胞(包括B细胞)中表达，其中认为其在从不成熟的B细胞过渡为成熟的再循环B细胞所需的转导信号中起到重要作用(M. Turner等人，Immunology Today，21：148 (2000))。报道B细胞在一些炎性状况例如狼疮(O. T. Chan等人，Immunological Rev，169：107-121 (1999))和类风湿性关节炎(A. Gause等人，Biodrugs, 15(2): 73-79 (2001))中起到重要的作用。

还报道Syk为在β-淀粉样蛋白和蛋白病毒原纤维中的发信号级联的要素，导致产生神经毒性产物(C. K. Combs等人，J. Neuroscl，19：928-939 (1999))。此外，Syk的抑制剂阻断产生这些神经毒性产物。因此呋喃并吡啶衍生物潜在地可用于治疗阿尔茨海默病和相关的神经炎性疾病。另一个报道(Y. Kuno等人，Blood，97，1050-1055 (2001))证明Syk在恶性发展中起到重要的作用。发现TEL-Syk融合蛋白质变换造血细胞，表明在造血恶性肿瘤的发病机理中的作用。因此，呋喃并吡啶衍生物可用于治疗某些类型的癌症。

涉及血液学恶性肿瘤的其它蛋白质酪氨酸激酶包括ABL (ABLl)、ARG (ABL2)、PDGFβR、PDGFαR、JAK2、TRKC、FGFRl、FGFR3、FLT3和FRK。

詹纳斯激酶(JAK)为由JAKl、JAK2、JAK3和TYK2组成的酪氨酸激酶的族。JAK在细胞因子发信号中起到关键性作用。激酶的JAK族的下游底物包括信号转导和转录激活剂(STAT)蛋白质。JAK/STAT发信号涉及许多异常免疫响应的介导，例如过敏症、哮喘、自身免疫疾病例如移植(同种异体移植)排异反应、类风湿性关节炎、肌萎缩外侧硬化和多发性硬化，以及在实体和血液学恶性肿瘤例如白血病和淋巴肿瘤中(关于JAK/STAT路径的药物介入的综述参见Frank, MoI. Med. 5，432:456 (1999)和Seidel等人，Oncogene 19, 2645-2656 (2000)。JAK2为充分生效的靶，在治疗骨髓增殖性病症(MPDs)中具有强大潜力，该病症包括真性红细胞增多症(PV)、特发血小板增多、慢性特发性骨髓纤维变性、髓细胞化生伴骨髓纤维变性、慢性髓细胞白血病、慢性骨髓单核细胞性白血病、慢性嗜曙红粒细胞增多白血病、嗜酸细胞增多综合征和系统性肥大细胞疾病。

Fms-样酪氨酸激酶3 (FLT3)(也称为FLK-2 (胎儿肝激酶2)和STK-I (干细胞激酶1))在造血干细胞的增殖和分化中起到重要的作用。FLT3受体激酶在正常的造血细胞、胎盘、性腺和脑中表达。然而，该酶在80%以上的髓细胞性患者和一部分急性成淋巴细胞白血病细胞的细胞上，以非常高的水平表达。此外，所述酶还可在来自患有慢性髓细胞性白血病处于淋巴白血病急性发作的患者的细胞上发现。已报道FLT3激酶在30%的急性髓细胞白血病(AML)以及在急性成淋巴细胞白血病(ALL)的亚组中突变(Gilliland等人，Blood 100，1532-1542 (2002)；Stirewalt等人，Nat. Rev. Cancer，3，650-665 (2003))。在FLT3中最常见的激活突变为在旁膜区域内的内部串联复制，而在激酶区域中，点突变、插入或删除不太常见。这些突变体FLT3激酶中的一些为组成活性。FLT3突变与差的预后有关(Malempati等人，Blood，104，11 (2004)。多于十二种已知FLT3抑制剂正在开发，并且一些已显示针对AML的有希望的临床效果(Levis等人，Int. J. Hematol，52，100-107 (2005)。

已报道一些小分子FLT3抑制剂在具有FLT3-激活突变的细胞系中有效诱导凋亡并且延长在它们的骨髓细胞中表达突变体FLT3的小鼠的存活(Levis等人，Blood，99，3885-3891 (2002)；Kelly等人，Cancer Cell，1，421-432 (2002)；Weisberg等人，Cancer Cell，1，433-443 (2002)；Yee等人，Blood(血液)，100，2941-2949 (2002))。

特别是，本发明涉及化合物和其中抑制、调整和/或调制经由Syk的信号转导起作用的化合物的用途。

因此，期望合成特异性抑制、调整和/或调制经由酪氨酸激酶(特别是Syk)的信号转导的小化合物，并且这是本发明的目的。

此外，本发明的目的是合成新的化合物，用于预防和治疗类风湿性关节炎、系统狼疮、哮喘、过敏性鼻炎、ITP、多发性硬化、白血病、乳腺癌和恶性黑素肿瘤。意外地，我们已鉴定选择性抑制SYK、BTK、KDR、Src、Zap70、Fak、Pyk2、Flt3或Jak或抑制这些激酶中的选择物的呋喃并吡啶。

此外，式I的化合物抑制丝氨酸激酶GCN2。

实体肿瘤的癌症治疗的许多策略集中于尽可能通过手术除去肿瘤块，随后使用更特异性地靶向癌细胞路径的细胞毒性剂或抑制剂，通过放疗和化疗根除任何残余的肿瘤细胞。然而，这些方法的成功有限，并且通常不能坚持。这主要是由于这些细胞毒性剂窄的治疗窗口(特异性和副作用)和癌细胞(cancer calls)适应由细胞毒性或其它抑制剂施加的选择性压力的能力。获得对初始治疗的抗性的少量肿瘤(干)细胞的存活可能足以导致肿瘤再生长。在大多数情况下，与初始肿瘤相比，这些复发更加难以治疗。结果，更加成功地靶向肿瘤细胞可能需要并行地靶向肿瘤细胞的多重存活和逃脱机制(Muller & Prendegast 2007)。

恶性肿瘤发展伴随着细胞生理学的主要提升。在该过程期间，癌细胞获得一些性质，其为对生长抑制信号永久增殖化或不敏感的基础。此外，肿瘤细胞还改变与微环境及以外的相互作用。后一领域包括肿瘤细胞从免疫学监视逃脱的策略(Muller & Prendegast 2007)。免疫监视限制恶性生长而且还提供选择性压力，触发进化机制，以回避免疫响应，如[Dunn等人，2004]综述。实质上，经常观察到T细胞免疫性的脱离足以提高肿瘤发生率[Shankaran等人，2001]，并且相信免疫逃脱影响肿瘤相对于发展的休眠，促进发病和转移和对治疗响应的负面影响。

数种机理研究发现，在肿瘤微环境内，免疫逃脱与代谢改变具有重要的界面。此处，介导对抗原的免疫耐受的重要作用已与必需氨基酸色氨酸和精氨酸的分解代谢相关，分别通过酶吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和精氨酸酶I (ARG)进行(Bronte和Zanovello，2005；Muller等人，2005b；Muller和Prendergast，2007；Munn和Mellor，2007；Popovic等人，2007)。

IDO为催化色氨酸降解为犬尿氨酸的单链氧化还原酶。IDO不负责分解代谢过量膳食色氨酸，而是调节局部环境中的色氨酸水平。提高癌症患者的色氨酸分解代谢表明显著改变的色氨酸或分解代谢产物的血清浓度，这与在肿瘤和消耗淋巴结中通常升高的IDO相关。根据若干出版物，IDO过表达与癌症差的预后相关[Okamoto等人2005；Brandacher等人，2006]。

T细胞看起来对IDO激活优先敏感，使得当对色氨酸饥饿时，它们不能分裂，结果是不能变得被对其呈现的抗原所激活。Munn和Mellor和他们的同事揭示，通过抑制T-细胞激活和通过产生对肿瘤抗原的外周耐受，IDO调制免疫(Mellor和Munn，2004)。这些机理包括将肿瘤细胞吸收的免疫细胞破坏至其紧邻的微环境或至肿瘤-耗尽淋巴结。此处，通过呈现抗原的细胞清除的肿瘤抗原对于适合的免疫系统交叉呈现。除了为直接耐受原以外，成熟的DC能使调节T细胞膨胀(Tregs) [Moser 2003]。

除了色氨酸分解代谢以外，在肿瘤调节的微环境中，精氨酸的转化提高，并且众多报道指示在肿瘤生长和发展期间激活精氨酸酶的作用。在肿瘤-渗透骨髓细胞中，精氨酸通过精氨酸酶I (ARG1)、精氨酸酶II (ARG2)转化为尿素和鸟氨酸，并且通过可诱导形式的一氧化氮合成酶(NOS₂)氧化为瓜氨酸和一氧化氮(NO)。

在患有结肠癌、乳腺癌、肺癌和前列腺癌的患者中通常观察到提高的ARG 活性[Cederbaum 2004]，与在前列腺癌中发现的ARG和NOS的过表达相关[Keskinege等人，2001，Aaltoma等人，2001，Wang等人，2003]。已显示在渗透巨噬细胞中ARG活性损害CD3受体的抗原-特异性T细胞响应和表达。此外，在肿瘤相关的骨髓细胞中ARG和NOS的累积活性可对抗原-特异性T淋巴细胞产生抑制信号，最终导致凋亡[Bronte 2003 a；2003b]。

IDO和ARG二者相关的机理在感觉相应的氨基酸浓度的耗尽浓度的点处结合。在氨基酸脱除期间，eIF2激酶EIF2AK4(称为通用控制不可去阻遏2 (GCN2))与细胞内累积脱酰化的tRNA相互作用。结果是，假定GCN2从自动抑制的变为活性构象，并且通过自动磷酸化进一步激活。随后仅已知的底物蛋白质eIF2a变得被磷酸化，结果是用于翻译引发的复合物受抑制[Harding等人。2000]。这样减少通用CAP-依赖性翻译引发，并且通过这样减少相应蛋白质的产生。在另一方面，主要通过cap-非依赖性引发，经由激活转录因子4 (ATF4)，这诱导应激相关的靶基因的特异性表达。通过表达相应的应激响应蛋白质，例如在氨基酸代谢中的酶，细胞试图补偿特定的细胞应激[Wek等人，2006]。如果应激持续，相同的路径将转换为促进细胞死亡，经由前凋亡转录因子的转录，CCAAT/增强剂-结合蛋白质同源蛋白质(CHOP) [Oyadomari 2004]。其显示，色氨酸饥饿触发GCN2-依赖性应激发信号路径。在T细胞中，改变eIF2a磷酸化和翻译引发导致细胞生长停止(Munn等人。2005)。Sharma等人[2007]公布关于直接IDO-诱导的和GCN2-依赖性的Tregs激活成熟。类似地，Fallarino等人[2006]发现CD4+CD25-细胞的GCN2-依赖性转变为CD25+FoxP3+Tregs，产生IL-10和TGFp。Rodriguez等人[2007]鉴定，经由色氨酸或精氨酸耗尽与TCR发信号组合激活GCN2路径，导致CD3ζ链下调，细胞循环停止和无反应性。

重要地，GCN2路径不仅对于用于肿瘤免疫逃脱是重要的，而且在直接调制肿瘤存活中也起到主动作用。Ye等人[2010]发现前述转录因子ATF4在人实体肿瘤中过表达，表明在肿瘤发展中的重要功能。氨基酸和葡萄糖脱除为在实体肿瘤中发现的典型应激，并且激活GCN2路径以上调在氨基酸合成和运输中涉及的ATF4靶基因。与正常的组织相比，在人和小鼠肿瘤中观察到GCN2激活/过表达和提高的磷酸-eIF2a，并且ATF4或GCN2表达的废除显著抑制肿瘤体内生长。推断GCN2-eIF2a-ATF4路径对于在肿瘤细胞中维持代谢体内平衡是关键的。

本发明的生物学始终干涉ARG/IDO路径，由于通过适应性机制破坏肿瘤免疫逃脱而有吸引力。此处特别受关注的是GCN2功能的干涉，因为其为两种路径(IDO和ARG)的结合点，以及其提供另外的机会以直接阻碍肿瘤代谢。

已考虑数种路径抑制剂作为免疫调节剂。这些抑制剂主要解决IDO或ARG蛋白质的酶功能(Muller和Scherle，2006)。在小鼠中，施用精氨酸酶抑制剂(N-羟基-nor-L-Arg)阻断s.c. 3LL肺癌的生长[Rodriguez 2004]。已报道提供NO的阿司匹林如NCX 4016 (2-(乙酰基氧基)苯甲酸3-(硝基氧基甲基)苯酯)干涉骨髓细胞的抑制酶活性。口服给予的NO阿司匹林使携带肿瘤的宿主的免疫状况正常化，提高肿瘤-抗原-特异性T淋巴细胞的数量和功能，并且增强通过癌症接种诱出的抗肿瘤免疫性的预防和治疗效力(DeSanto 2005)。

在癌症情境和其它环境中，底物类似物1甲基-色氨酸(1MT)和相关的分子已广泛用于靶向IDO。Friberg等人(2002)和Uyttenhove等人(2003)的研究证明，1MT可限制过表达IDO的肿瘤的生长。然而，在若干肿瘤模式中，1MT不能诱出肿瘤退化，表明当施用IDO抑制作为单一治疗时，仅适度的抗肿瘤效力。与此相反，用1MT和多种细胞毒性化疗剂联合治疗诱出确立的MMTV-neu/HER2肿瘤的退化，该肿瘤对任何单一剂治疗的响应差[Muller等人2005a]。在治疗使该模式中观察到的组合效力废除之前，免疫耗尽来自小鼠的CD4+或CD8+T细胞，证实以下预期：1MT间接通过激活T细胞-介导的抗肿瘤免疫性起作用。通过证明在对于IDO有基因缺陷的小鼠中，1MT缺乏抗肿瘤活性，提供了IDO靶向对于1MT作用为必需的重要证据[Hou等人，2007]。

抑制GCN2将能够使氨基酸饥饿诱导的免疫编辑的两个路径分支组合，并且将使肿瘤规避任一分支的抑制的选项减少。此外，如以上详述的，GCN2抑制提供机会以同时干涉肿瘤代谢，这可增强单一治疗或与其它抗癌方法联合治疗的效力。

文献：

1. Aaltoma，S.H.，P.K. Lipponen和V.M. Kosma. 2001. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression and its prognostic value in prostate cancer(在前列腺癌中可诱导的一氧化氮合成酶(iNOS)表达及其预后值). Anticancer Res. 21:3101-3106. 

2. Brandacher，G.；Perathoner，A.；Ladurner，R.；Schneeberger，S.；Obrist，P.；Winkler，C.；Werner，E. R.；Werner-Felmayer，G.；Weiss，H. G.；Gobel，G.；Margreiter，R.；Konigsrainer，A.；Fuchs，D.；Amberger，A. Prognostic value of indoleamine 2,3- dioxygenase expression in colorectal cancer: effect on tumorinfiltrating T cells(在结肠直肠癌中，吲哚胺2,3-双加氧酶表达的预后值：对肿瘤渗透T细胞的影响). Clin. Cancer Res. 2006，12，1144-1151. 

3. Bronte V，Zanovello P. (2005). Regulation of immune responses by L-arginine metabolism(通过L-精氨酸代谢调整免疫响应). Nat Rev Immunol 5: 641-654. 

4. Bronte，V.，P. Serafini，C. De Santo，I. Marigo，V. Tosello，A. Mazzoni，D.M. Segal，C. Staib，M. Lowel，G. Sutter，等人. 2003a. IL-4- induced arginase 1 suppresses alloreactive T cells in tumor-bearing mice(在携带肿瘤的小鼠中，IL-4-诱导的精氨酸酶1抑制同种异体反应性T细胞). J. Immunol. 170:270-278. 

5. Bronte，V.，P. Serafini，A. Mazzoni，D.M. Segal和P. Zanovello. 2003b. L-arginine metabolism in myeloid cells controls T-lymphocyte functions(在骨髓细胞中的L-精氨酸代谢控制T-淋巴细胞功能). Trends Immunol. 24:302-306. 

6. Carmela De Santo，Paolo Serafini，Ilaria Marigo，Luigi Dolcetti，Manlio Bolla,§ Piero Del Soldato，Cecilia Melani，Cristiana Guiducci，Mario P. Colombo，Manuela Iezzi，Piero Musiani，Paola Zanovello和Vincenzo Bronte. Nitroaspirin corrects immune dysfunction in tumor-bearing hosts and promotes tumor eradication by cancer vaccination(在携带肿瘤的宿主中，硝基阿司匹林校正免疫功能不良，并且通过癌症接种促进肿瘤根除). Proc Natl Acad Sci U S A. 2005年3月15日；102(11): 4185-4190. 

7. Cederbaum，S.D.，H. Yu，W.W. Grody，R.M. Kern，P. Yoo和R.K. Iyer. 2004. Arginases I and II: do their functions overlap? (精氨酸酶I和II：它们的功能重叠吗?)Mol. Genet. Metab. 81:S38-44. 

8. Dey，M.，Cao，C.，Sicheri，F.和T.E. Dever. Conserved Intermolecular Salt Bridge Required for Activation of Protein Kinases PKR，GCN2，and PERK(激活蛋白质激酶PKR、GCN2和PERK所需的保守的分子间盐桥). JBC 282(9): 6653，2007. 

9. Dunn，G. P.；Old，L. J.；Schreiber，R. D. The immunobiology of cancer immunosurveillance and immunoediting(癌症免疫监视和免疫编辑的免疫生物学). Immunity 2004，21，137-148. 

10. Fallarino，F. U. Grohmann，S. You，B.C. 等人. The combined effects fo tryptophan starvation and tryptophan catabolites down-regulate T cell receptor zeta-chain and induce a regulatory phenotype in na?ve T cells(在幼稚T细胞中，色氨酸饥饿和色氨酸分解代谢产物的联合效果下调T细胞受体ζ-链并且诱导调整的表型). J. Immunol. 176:6752，2006. 

11. Friberg M，Jennings R，Alsarraj M，Dessureault S，Cantor A，Extermann M 等人. (2002). Indoleamine 2,3-dioxygenase contributes to tumor cell evasion of T cell-mediated rejection(吲哚胺2,3-双加氧酶引起T细胞-介导的排斥反应的肿瘤细胞逃避). Int. J Cancer 101: 151-155. 

12. Harding HP，Novoa I，Zhang Y，Zeng H，Wek R，Schapira M，Ron D. Regulated translation initiation controls stress-induced gene expression in mammalian cells(在哺乳动物细胞中，调整的翻译引发控制应力-诱导的基因表达). Mol Cell. 2000年11月；6(5):1099-108. 

13. Hou DY，Muller AJ，Sharma MD，DuHadaway J，Banerjee T，Johnson M 等人. (2007). Inhibition of indoleamine 2,3-dioxygenase in dendritic cells by stereoisomers of 1-methyl-tryptophan correlates with antitumor responses(通过1-甲基-色氨酸的立体异构体在树枝状细胞中抑制吲哚胺2,3-双加氧酶与抗肿瘤响应关联). Cancer Res 67: 792-801. 

14. Keskinege，A.，S. Elgun和E. Yilmaz. 2001. Possible implications of arginase and diamine oxidase in prostatic carcinoma(精氨酸酶和二胺氧化酶在前列腺癌中可能的牵连). Cancer Detect. Prev. 25:76-79. 

15. Mellor AL，Munn DH. (2004). IDO expression by dendritic cells: tolerance and tryptophan catabolism(通过树枝状细胞的IDO表达：耐受和色氨酸分解代谢). Nat Rev Immunol 4: 762-774. 

16. Moser，M. Dendritic cells in immunity and tolerance-do they display opposite functions? (在免疫和耐受中的树枝状细胞：它们显示相对的功能吗?)Immunity 2003，19，5-8. 

17. Muller，A.J.和P.A. Scherle. Targeting the mechanisms of tumoral immune tolerance with small-molecule inhibitors(使用小分子抑制剂，靶向肿瘤免疫耐受的机理). Nat. Rev. Cancer. 6:613，2006. 

18. Muller AJ，Prendergast GC. (2007). Indoleamine 2,3-dioxygenase in immune suppression and cancer(在免疫抑制和癌症中的吲哚胺2,3-双加氧酶). Curr Cancer Drug Targets 7: 31-40. 

19. Muller AJ，DuHadaway JB，Sutanto-Ward E，Donover PS，Prendergast GC. (2005a). Inhibition of indoleamine 2,3-dioxygenase，an immunomodulatory target of the tumor suppressor gene Bin1，potentiates cancer chemotherapy(抑制吲哚胺2,3-双加氧酶(肿瘤抑制基因Bin1的免疫调节靶)使癌症化疗成为可能). Nature Med 11: 312-319. 

20. Muller AJ，Malachowski WP，Prendergast GC. (2005b). Indoleamine 2,3-dioxygenase in cancer: targeting pathological immune tolerance with small-molecule inhibitors(在癌症中的吲哚胺2,3-双加氧酶：使用小分子抑制剂靶向病理学免疫耐受). Expert Opin Ther Targets 9: 831-849. 

21. Munn，D.H.，M.D. Sharma，B. Baban，H.P. Harding，Y. Zhang，D. Ron，A.L. Mellor. GCN2 kinase in T cells mediates proliferative arrest and anergy induction in response to indoleamine 2,3-dioxygenase(响应吲哚胺2,3-双加氧酶，在T细胞中的GCN2激酶介导增殖性停止和无反应性诱导). Immunity. 22:633，2005. 

22. Okamoto，A.；Nikaido，T.；Ochiai，K.；Takakura，S.；Saito，M.；Aoki，Y.；Ishii，N.；Yanaihara，N.；Yamada，K.；Takikawa，O.；Kawaguchi，R.；Isonishi，S.；Tanaka，T.；Urashima，M.. Indoleamine 2,3-dioxygenase serves as a marker of poor prognosis in gene expression profiles of serous ovarian cancer cells(在浆液性卵巢癌细胞的基因表达特性中，吲哚胺2,3-双加氧酶用作差的预后的标记物). Clin. Cancer Res. 2005，11，6030-6039. 

23. Oyadomari S，Mori M. Roles of CHOP/GADD153 in endoplasmic reticulum stress(CHOP/GADD153在内胞浆蜂窝胃应力中的作用). Cell Death Differ. 2004年4月；11(4):381-9. 

24. GC Prendergast，Immune escape as a fundamental trait of cancer: focus on IDO(作为癌症基本特征的免疫逃脱：集中于IDO). Oncogene (2008) 27，3889-3900. 

25. Popovic PJ，Zeh III HJ，Ochoa JB. (2007). Arginine and immunity(精氨酸和免疫). J Nutr 137: 1681S-1686 S. 

26. Rodriguez，P.C.，D.G. Quiceno，J. Zabaleta，B. Ortiz，A.H. Zea，M.B. Piazuelo,A.Delgado，P.Correa，J.Brayer，E.M. Sotomayor，S.Antonia，J.B. Ochoa和A.C. Ochoa. Arginase I Production in the Tumor Microenvironment by Mature Myeloid Cells Inhibits T-Cell Receptor Expression and Antigen-Specific T-Cell Responses(通过成熟的骨髓细胞，在肿瘤微环境中的精氨酸酶I生产抑制T-细胞受体表达和抗原-特异性T-细胞响应). Canc. Res. 64:5839，2004. 

27. Rodriguez，P.C.，D.G. Quiceno和A.C. Ochoa. L-arginine availability regulates T-lymphocyte cell-cycle progresión(L-精氨酸可用性调整T-淋巴细胞细胞-循环进展). Blood. 109:1568，2007. 

28. Shankaran，V.；Ikeda，H.；Bruce，A. T.；White，J. M.；Swanson，P. E.；Old，L. J.；Schreiber，R. D.. IFNgamma and lymphocytes prevent primary tumour development and shape tumour immunogenicity(IFNγ和淋巴细胞防止原发的肿瘤发展和使肿瘤免疫原性成型). Nature 2001，410，1107-1111. 

29. Sharma，M.D.，B. Baban，P. Chandler，D-Y. Hou，N. Singh，H. Yagita，M. Azuma，B.R. Blazar，A.L. Mellor和D.H. Munn. Plasmacytoid dendritic cells from mouse tumor-draining lymph nodes directly activate mature Tregs via indoleamine 2,3-dioxygenase(经由吲哚胺2,3-双加氧酶，来自小鼠肿瘤-耗尽淋巴结的浆细胞树枝状细胞直接激活成熟的Tregs). J. Clin. Invest. 117:2570，2007. 

30. Uyttenhove C，Pilotte L，Theate I，Stroobant V，Colau D，Parmentier N 等人. (2003). Evidence for a tumoral immune resistance mechanism based on tryptophan degradation by indoleamine 2,3- dioxygenase(基于通过吲哚胺2,3-双加氧酶的色氨酸降解，肿瘤免疫抗性机理的证据). Nat Med 9: 1269-1274. 

31. Wang，J.，M. Torbenson，Q. Wang，J.Y. Ro和M. Becich. 2003. Expression of inducible nitric oxide synthase in paired neoplastic and non-neoplastic primary prostate cell cultures and prostatectomy specimen(在成对的新生物和非新生物原发的前列腺细胞培养物和前列腺切除术样品中，可诱导的一氧化氮合成酶的表达). Urol. Oncol. 21:117-122. 

32. Wek RC，Jiang HY，Anthony TG. Coping with stress: eIF2 kinases and translational control(应付应力：eIF2激酶和翻译控制). Biochem Soc Trans. 2006年2月；34 (Pt 1):7-11. 

33. Ye J，Kumanova M，Hart LS，Sloane K，Zhang H，De Panis DN，Bobrovnikova-Marjon E，Diehl JA，Ron D，Koumenis C. The GCN2-ATF4 pathway is critical for tumour cell survival and proliferation in response to nutrient deprivation(响应营养物脱除，GCN2-ATF4路径对于肿瘤细胞存活和增殖是关键的). EMBO J. 2010年6月16日；29(12):2082-96。

已发现本发明的化合物及其盐具有非常有价值的药理学性质，同时良好耐受。

本发明特别涉及抑制、调整和/或调制经由Syk的信号转导的式I化合物、包含这些化合物的组合物以及其用于治疗Syk-诱导的疾病和不适的方法。

式I的化合物可此外用于分离和研究Syk的活性或表达。此外，它们特别适合用于与未调节的或被扰乱的Syk活性结合的疾病的诊断方法。

宿主或患者可属于任何哺乳动物物种，例如灵长类物种，特别是人；啮齿动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔；马、牛、狗、猫等。动物模式是实验研究关注的，提供用于治疗人疾病的模式。

特殊细胞对用依据本发明的化合物治疗的易感性可通过体外试验确定。典型地，将细胞培养与各种浓度的依据本发明的化合物结合一定的时间段(通常在约1小时和1周之间)，其足以使得活性剂例如抗IgM诱导细胞应答例如表面标记物的表达。体外试验可采用来自血或来自活组织检查样本的培养细胞进行。所表达的表面标记物的量通过流式细胞计数仪，使用识别标记物的特异性抗体来评测。

所述剂量根据所用的特定化合物、特定疾病、患者状态等而变化。治疗剂量典型地足以显著减少靶组织中的不期望的细胞种群，同时维持患者的生存能力。治疗一般持续至出现显著减少，例如细胞负荷减少至少约50%，和可持续至在体内基本不再检测出不期望的细胞。

为了鉴定信号转导途径和为了检测各种信号转导途径之间的相互作用，许多科学家已开发合适的模型或模型系统，例如细胞培养模型(例如Khwaja等, EMBO, 1997, 16, 2783-93)和转基因动物模型(例如White等, Oncogene, 2001, 20, 7064-7072)。为了确定信号转导级联中的某些阶段，可利用相互作用的化合物以调节信号(例如Stephens等, Biochemical J., 2000, 351, 95 105)。依据本发明的化合物也可用作在本申请提及的动物和/或细胞培养模型或在临床疾病中测试激酶依赖性信号转导途径的试剂。

激酶活性的测量是本领域技术人员熟知的技术。用于确定激酶活性使用底物，例如组蛋白(例如Alessi等, FEBS Lett. 1996, 399, 3, 第333-338页)或碱性髓磷脂蛋白的通用测试系统，描述于文献(例如Campos-González, R. 和Glenney, Jr., J.R. 1992, J. Biol. Chem. 267, 14535页)。

为鉴定激酶抑制剂，各种测定系统是可以利用的。在闪烁迫近试验(Sorg等，J. of. Biomolecular Screening, 2002, 7,11-19)和快速板试验(flashplate assay)中检测使用γATP的作为底物的蛋白或肽的放射性磷酸化。在存在抑制性化合物时，可检测到减弱的放射性信号或根本检测不到。此外，均匀时间分辨荧光共振能量转移(HTR-FRET)和荧光偏振(FP)技术适合用作试验方法(Sills 等，J. of Biomolecular Screening, 2002,191-214)。

其它的非放射性ELISA试验方法采用特异性磷酸-抗体(磷酸-AB)。此种磷酸-AB只结合磷酸化的底物。可使用过氧化物酶-缀合的抗绵羊二次抗体通过化学发光法检测这种结合(Ross等, 2002, Biochem. J.)。

现有技术

其它杂环Syk抑制剂描述于WO2008/118823、WO2009/136995、WO 2010/027500。

发明概述

本发明涉及式I的化合物和它们的药学上可用的溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，

其中

R¹表示Ar¹、Carb、Het¹或H，

R²表示Ar²、Carb、Cyc、Het²、NR³(CH₂)_nHet²、NR³Cyc、N(R³)₂、NR³(CH₂)_pN(R³)₂、NR³(CH₂)_pNR³COA、NR³SO₂A、NR³SO₂Ar³、NR³SO₂Het³、O(CH₂)_nHet³或NR³Ar³，

Ar¹表示苯基，其被以下单取代、二取代或三取代：A、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、(CH₂)_nHet³、CN、SO₂NH₂、SO₂CH₃、SOCH₃、Cyc、(CH₂)_nNH₂、(CH₂)_nNHA、(CH₂)_nNA₂和/或(CH₂)_nSO₃H，

Ar²表示苯基或联苯基，其未被取代或被以下单取代、二取代或三取代：Hal、CN、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、NHSO₂A、(CH₂)_nHet³、[C(R³)₂]_nNH₂、[C(R³)₂]_nNHA、[C(R³)₂]_nNA₂、SO₂CH₃、SO₂NH₂和/或COHet³，

Het¹表示吡啶基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲哚基、吲唑基、苯并[1,4]噁嗪基、1,3-或2,3-二氢-吲哚基、苯并噻二唑基、1,2,3,4-四氢-喹啉基、螺(环丁-1,3'-吲哚基)、螺(环丁-1,3'-二氢吲哚基)、1,4-二氢-苯并[d][1,3]噁嗪基、3,4-二氢-1H-喹啉基、3,4-二氢-1H-喹唑啉基(quinozalinyl)、苯并二氢吡喃基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、1,2,3,4-四氢-喹喔啉基或2,3-二氢-1H-2l6-苯并[c]异噻唑基，各自未被取代或被以下单取代、二取代、三取代或四取代：A、OH、OA、SO₂NH₂、(CH₂)_nNH₂、(CH₂)_nNHA、(CH₂)_nNA₂、Hal和/或=O，

Het²表示哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吗啉基、四氢吡喃基、吡唑基、吲唑基、氮杂环丁烷基、吡啶基、异噁唑基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、吡啶并[2,3-b]吡嗪基、2-氧杂-6-氮杂-螺[3,4]辛基、2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚基、1,4-二氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬基、7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶基、1,3,7-三氮杂-螺[4.5]-癸基、2,5,7-三氮杂-螺[3.4]辛基、1,3,7-三氮杂-螺[4.4]壬基、2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚基、2-氧杂-6-氮杂-螺[3.5]壬基、2,7-二氮杂-螺[4.4]壬基、2,8-二氮杂-螺[4.5]癸基、3-氧杂-8-氮杂-双环[3.2.1]辛基、1,4,6,7-四氢-咪唑并[4,5-c]吡啶基、4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪基、1,2,3,4-四氢-喹啉基、喹啉基、吲唑基、二氮杂环庚烷基、氮杂环庚烷基、2-氧杂-3,9-二氮杂-螺[5.5]十一碳烯基、三唑基、8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛基、1,3,8-三氮杂-螺[4.5]癸烯基、1-氧杂-3,7-或3,8-二氮杂-螺[4.5]癸基、1,3,8-三氮杂-螺[4.5]癸基、4,6-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡唑基、六氢-吡嗪并[1,2-a]吡嗪基、四氢-苯并[b]氮杂环庚烷基、2,3-二氢-苯并[1,4]二氧杂环己烯基、2,3-二氢-吲哚基、吲哚基、8-氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,4-二氢-2H-喹啉基、3,4-二氢-2H-吡喃并[2,3-b]吡啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪基、螺[吲哚-3,3'-吡咯烷基]、6-氧杂-2,9-二氮杂-螺[4,5]癸基、四氢-吡咯并[3,4-c]吡咯基、1,8-二氮杂-螺[4.5]癸基、1,2,3,4-四氢-异喹啉基、6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪基、1-氮杂-双环[2.2.2]辛基、八氢-异喹啉基或3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪基，各自未被取代或被以下单取代、二取代或三取代：Hal、A、(CH₂)_nNH₂、(CH₂)_nNHA、(CH₂)_nNA₂、(CH₂)_nOH、(CH₂)_nOA、(CH₂)_nAr³、(CH₂)_nHet³、SO₂A、SO₂A、NHCOA、NACOA、NHSO₂A、NASO₂A、COOA、CONH₂、COA、CONHA、COOH、SO₂NH₂、SO₂NHA、SO₂NA₂、(CH₂)_nOCHO、NH(CH₂)_nHet³、CN和/或=O，

Het³表示哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吗啉基、咪唑烷基、四氢-吡喃基、咪唑基或二氢吲哚基，各自未被取代或被A和/或=O单取代、二取代或三取代，

R³表示H或具有1、2、3或4个C原子的烷基，

A表示具有1-10个C原子的非支化或支化的烷基，其中1-7个H原子可被F代替和/或其中一个或两个非相邻的CH₂基团可被O和/或NH代替，

或者

具有3-7个C原子的环状烷基，

Cyc表示具有3-7个C原子的环状烷基，其未被取代或被NH₂、CN、CONH₂或OH单取代，

Ar³表示苯基，其未被取代或被以下单取代或二取代：F、A、CN、NH₂、NHA、NA₂和/或CONH₂，

Carb表示茚满基或5,6,7,8-四氢-萘基，其未被取代或被A单取代、二取代、三取代或四取代，

Hal表示F、Cl、Br或I，

n表示0、1、2、3或4，

p表示1、2、3或4。

本发明还涉及这些化合物的光学活性形式(立体异构体)、对映异构体、外消旋物、非对映异构体和水合物和溶剂合物。

此外，本发明涉及式I化合物的药学上可接受的衍生物。

术语化合物的溶剂合物指由于它们的相互吸引力形成的惰性溶剂分子在化合物上的加合。溶剂合物为例如单水合物或二水合物或醇盐。

应理解的是，本发明还涉及盐的溶剂合物。

术语药学上可接受的衍生物指例如本发明化合物的盐以及所谓的前药化合物。

如本文使用并且除非另外指定，术语"前药"指式I化合物的衍生物，其可在生物学条件下(体外或体内)水解、氧化或另外反应，以提供活性化合物，特别是式I的化合物。前药的实例包括但不限于式I化合物的衍生物和代谢物，包括生物可水解的部分，例如生物可水解的酰胺、生物可水解的酯、生物可水解的氨基甲酸酯、生物可水解的碳酸酯、生物可水解的酰脲和生物可水解的磷酸盐类似物。在某些实施方案中，具有羧基官能团的化合物的前药为羧酸的低级烷基酯。羧酸酯通过在分子上存在的任何羧酸部分的酯化方便地形成。前药通常可使用众所周知的方法制备，例如Burger的Medicinal Chemistry and Drug Discovery(药物化学和药物发现)，第6版(Donald J. Abraham编辑，2001，Wiley)和Design and Application of Prodrugs (前药的设计和应用) (H.Bundgaard编辑，1985，Harwood Academic Publishers Gmfh)描述的那些方法。

表述"有效量”表示例如研究者或医师所寻求或期望的在组织、系统、动物或人之中引起生物学或医学响应的药物或药物活性成分的量。

此外，表述"治疗有效量”表示与未接受该量的相应的受试者相比，具有以下结果的量：

对疾病、综合征、状况、不适、病症或副作用的改进的治疗、治愈、预防或消除，以及降低疾病、不适或病症的发展。

表述"治疗有效量”还包括有效提高正常的生理功能的量。

本发明还涉及使用式I化合物的混合物，例如两种非对映异构体的混合物，例如其比率为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:10、1:100或1:1000。

特别优选这些为立体异构化合物的混合物。

"互变异构体"指彼此平衡的化合物的异构形式。异构形式的浓度取决于发现该化合物的环境，并且可根据例如化合物为固体或在有机溶液或含水溶液中而不同。

本发明涉及式I的化合物及其盐和用于制备式I的化合物和它们的药学上可用的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于

a) 式II的化合物与式III的化合物按Suzuki-类型偶联来反应

其中R¹具有在权利要求1中指示的含义，

R²-L　　　　　　　　　　　III

其中R²具有在权利要求1中指示的含义，

且L表示硼酸或硼酸酯基团，

或者

b) 式II的化合物与式III的化合物反应

其中R¹具有在权利要求1中指示的含义，

R²-L　　　　　　　　　　　III

其中R²具有在权利要求1中指示的含义，

且L表示NH₂或OH，

和/或

式I的碱或酸转化为其盐中的一种。

上下文中，除非另外说明，否则基团R¹和R²具有对式I指示的含义。

A表示烷基，其为非支化(直链)或支化的，并且具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个C原子。A优选表示甲基、还有乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基、此外还表示戊基、1-、2-或3-甲基丁基、1,1-、1,2-或2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-或4-甲基戊基、1,1-、1,2-、1,3-、2,2-、2,3-或3,3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-或1,2,2-三甲基丙基，此外优选，例如，三氟甲基。

A非常特别优选表示具有1、2、3、4、5或6个C原子的烷基，优选甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、三氟甲基、五氟乙基或1,1,1-三氟乙基。

此外，A优选表示CH₂OCH₃、OCH₂CH₂OCH₃、NHCH₂CH₂OH、CH₂CH₂OH、CH₂NHCH₂或NHCH₂CH₃。

环状烷基(环烷基)优选表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。

Cyc表示具有3-7个C原子的环状烷基，优选表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。

R¹优选表示表示Ar¹、Carb或Het¹。

Het¹优选表示1,3-二氢-2-氧代-吲哚基。

Hal优选表示F、Cl或Br，以及I，特别优选F或Cl。

在整个本发明中，出现多于一次的所有基团可相同或不同，即，彼此独立。

式I的化合物可具有一个或多个手性中心，因此可按各种立体异构形式出现。式I包括所有这些形式。

此外，式I的化合物以及用于它们的制备的原料通过本身已知的方法制备，准确地说，如在文献中描述的(例如标准著作中，例如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry(有机化学的方法)]，Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart)。还可利用在本文中未更详细提及的本身已知的变体。

式II和III的起始化合物通常为已知的。然而，如果它们是新的，它们可通过本身已知的方法制备。

如果不是市售可得的，所用的式II的哒嗪酮通常通过W. J. Coates，A. McKillop，Synthesis，1993，334-342的方法制备。

式I的化合物可优选通过式II的化合物与式III的化合物反应得到。

在式III的化合物中，L优选表示

或。

反应通常在Suzuki-类型偶联条件下进行。

取决于所用的条件，反应时间为几分钟-14天，反应温度为约-30°至140°，通常为0°-100°，特别是约60°-约90°。

合适的惰性溶剂的实例为烃，例如己烷、石油醚、苯、甲苯或二甲苯；氯代烃，例如三氯乙烯、1,2-二氯乙烷、四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇，例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚，例如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃(THF)或二氧杂环己烷；二醇醚，例如乙二醇单甲基醚或单乙基醚、乙二醇二甲基醚(二甘醇二甲醚)；酮，例如丙酮或丁酮；酰胺，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈，例如乙腈；亚砜，例如二甲基亚砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯，例如乙酸乙酯，或所述溶剂的混合物。

特别优选乙醇、甲苯、二甲氧基乙烷、1,4-二氧杂环己烷和/或水。

此外，式I的化合物可优选通过式II的化合物与式III的化合物反应而得到，其中L优选表示NH₂或OH。反应通常在专业技术人员已知并且已知和适合所述反应的条件下进行。此外，可将式I的化合物转化为式I的另一种化合物，例如通过将硝基还原为氨基(例如通过在阮内镍或Pd/碳上在惰性溶剂(例如甲醇或乙醇)中氢化)。

游离的氨基可此外采用常规的方式使用酰氯或酸酐酰化或使用未取代的或取代的烷基卤化物烷基化，有利地在惰性溶剂(例如二氯甲烷或THF)中，和/或在碱(例如三乙胺或吡啶)存在下，在-60至+30°温度下。

此外，还可将式I的化合物转化为式I的另一种化合物，例如通过将硝基还原为氨基(例如通过在阮内镍或Pd/碳上在惰性溶剂(例如甲醇或乙醇)中氢化)。

游离的氨基可此外采用常规的方式使用酰氯或酸酐酰化或使用未取代的或取代的烷基卤化物烷基化，有利地在惰性溶剂(例如二氯甲烷或THF)中，和/或在碱(例如三乙胺或吡啶)存在下，在-60至+30°温度下。

式I的化合物可此外通过溶剂分解(特别是水解)或通过氢解从它们的官能衍生物释放而得到。

用于溶剂分解或氢解的优选的原料为含有相应的受保护氨基和/或羟基而不是一个或多个游离的氨基和/或羟基的那些，优选携带氨基保护基团而不是与N原子键合的H原子的那些，例如符合式I，但是含有NHR’基团(其中R’为氨基保护基团，例如 BOC或CBZ)而不是NH₂基团的那些。

此外，优选携带羟基-保护基团而不是羟基的H原子的原料，例如符合式I但是含有R”O-苯基(其中R”为羟基保护基团)而不是羟基苯基的那些。

还可能在原料的分子中存在多个相同或不同的受保护氨基和/或羟基。如果存在的保护基团彼此不同，在许多情况下，它们可选择性解离。

术语"氨基保护基团"在通用术语中为已知的并涉及适用于保护(封闭)氨基以免受化学反应，但在所需的化学反应在分子中别处进行后可容易地将其除去的基团。典型的此类基团特别是，未取代的或取代的酰基、芳基、芳烷氧基甲基或芳烷基。因为氨基保护基团在所需的反应(或反应序列)后被除去，它们的类型和大小不是特别关键的；然而，优选具有1-20个，特别是1-8个碳原子的那些保护基团。术语"酰基"应按在最广意义上与本方法关联来理解。其包括衍生自脂族、芳脂族、芳族或杂环羧酸或磺酸的酰基，且特别是烷氧基羰基、芳基氧基羰基和尤其是芳烷氧基羰基。此类酰基的实例是烷酰基，例如乙酰基、丙酰基和丁酰基；芳烷酰基，例如苯基乙酰基；芳酰基，例如苯甲酰基和甲苯基；芳基氧基烷酰基，例如POA；烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、BOC、2-碘代乙氧基羰基；芳烷氧基羰基，例如CBZ ("苄氧甲酰基(carbobenzoxy)")、4-甲氧基苄基氧基羰基和FMOC；和芳基磺酰基、例如Mtr、Pbf和Pmc。优选的氨基保护基团是BOC和Mtr，此外还有CBZ、Fmoc、苄基和乙酰基。

术语"羟基保护基团"同样在通用术语中是已知的并涉及适用于保护羟基以免受化学反应，但在所需的化学反应在分子中别处完成后可容易地将其除去的基团。典型的此类基团为上述未取代的或取代的芳基、芳烷基或酰基，此外还为烷基。羟基保护基团的性质和大小不是关键的，因为它们在所需化学反应或反应序列后再次被除去；优选具有1-20个，特别是1-10个碳原子的基团。羟基保护基团的实例尤其是叔丁氧基羰基、苄基、对-硝基苯甲酰基、对-甲苯磺酰基、叔丁基和乙酰基，其中苄基和叔丁基是特别优选的。天冬氨酸和谷氨酸中的COOH基团优选以其叔丁基酯的形式(例如Asp(OBut))被保护。

取决于所用的保护基团，将式I化合物从它们的官能衍生物中释出，例如采用强酸，有利地采用TFA或高氯酸，但也采用其它强无机酸例如盐酸或硫酸，强有机羧酸例如三氯乙酸或磺酸，例如苯磺酸或对甲苯磺酸。存在另外的惰性溶剂是可能的，但不总是必要的。合适的惰性溶剂优选地为有机的，例如羧酸，例如乙酸；醚，例如四氢呋喃或二氧杂环己烷；酰胺，例如DMF；卤代烃，例如二氯甲烷；此外也包括醇，例如甲醇、乙醇或异丙醇，和水。此外，上述溶剂的混合物也是合适的。TFA优选地以过量所用，而不加入另外的溶剂，且高氯酸优选地以乙酸和70%高氯酸以比例9:1的混合物的形式使用。用于分解的反应温度有利地在约0和约50℃之间，优选地在15和30℃之间(室温)。

BOC、OBut、Pbf、Pmc和Mtr基团可例如优选地采用在二氯甲烷中的TFA或采用在二氧杂环己烷中的大约3-5N HCl在15-30℃下分离，且FMOC基团可采用二甲胺、二乙胺或哌啶在DMF中的大约5-50%溶液在15-30℃下解离。

三苯甲基用于保护氨基酸组氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和半胱氨酸。取决于期望的终产物，它们解离，使用TFA/10%苯硫酚，其中三苯甲基从所有所述氨基酸解离；使用TFA/苯甲醚或TFA/硫代苯甲醚时，仅His、Asn和Gln的三苯甲基解离，而三苯甲基保留在Cys侧链上。

可氢解除去的保护基团(例如CBZ或苄基)可例如通过在催化剂(例如贵金属催化剂，例如钯，有利地在载体例如碳上)的存在下，用氢处理而分离。此处的合适溶剂为上文指出的那些溶剂，特别是，例如醇，例如甲醇或乙醇，或酰胺，例如DMF。氢解通常在约0和100℃之间的温度下和在约1和200巴之间的压力下进行，优选地在20-30℃和1-10巴下进行。CBZ基团的氢解，例如，在5-10% Pd/C上在甲醇中，或采用甲酸铵(而不是氢)在Pd/C上在甲醇/DMF中，在20-30℃下很好地进行。

药用盐和其它形式

依据本发明的所述化合物可以其最终的非盐形式使用。另一方面，本发明也包括这些化合物以其药学上可接受的盐形式的用途，所述盐可通过本领域已知的程序衍生自各种有机和无机酸和碱。式I化合物的药学上可接受的盐形式大部分通过常规的方法制备。如果式I化合物含有羧基，其合适的盐之一可通过化合物与合适的碱反应以得到相应的碱-加成盐来形成。这样的碱为例如碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，例如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇盐，例如乙醇钾和丙醇钠；和各种有机碱，例如哌啶、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺。同样包括式I化合物的铝盐。在某些式I化合物的情况下，酸加成盐可通过用以下物质处理这些化合物而形成：药学上可接受的有机和无机酸，例如氢卤酸，例如盐酸、氢溴酸或氢碘酸；其它矿物酸及其对应的盐，例如硫酸盐、硝酸盐或磷酸盐等；和烷基磺酸盐和单芳基磺酸盐，例如乙烷磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐；和其它有机酸及其对应的盐，例如乙酸盐、三氟乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。因此，式I化合物的药学上可接受的酸加成盐包括以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(besylate)、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯代苯甲酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、富马酸盐、半乳糖酸盐(galacterate) (得自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐(isethionate)、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐(lactobionate)、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲烷磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、油酸盐、棕榈酸盐(palmoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、苯乙酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐、酞酸盐，但这不表示限制。

此外，依据本发明的化合物的碱盐包括铝、铵、钙、铜、铁(III)、铁(II)、锂、镁、锰(III)、锰(II)、钾、钠和锌盐，但这并不意图表示限制。在上述盐中，优选铵；碱金属钠盐和钾盐，和碱土金属钙盐和镁盐。由药学上可接受的有机无毒碱衍生的式I化合物的盐包括以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺、取代胺，也包括天然存在的取代胺、环胺，和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、氯普鲁卡因、胆碱、N,N'-二苄基乙二胺(苄星)、二环己胺、二乙醇胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组胺酸、海巴明、异丙基胺、利多卡因、赖氨酸、甲葡胺、N-甲基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羟甲基)-甲基胺(氨丁三醇)，但这并不意图表示限制。 

含有碱性含氮基团的本发明化合物可使用以下试剂季铵化：例如(C₁-C₄)烷基卤化物，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二(C₁-C₄)烷基硫酸盐，例如二甲基、二乙基和二戊基硫酸盐；(C₁₀-C₁₈)烷基卤化物，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和十六烷基的氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C₁-C₄)烷基卤化物，例如苄基氯和苯乙基溴。依据本发明的水溶性和油溶性化合物两者可使用这样的盐制备。

优选的以上提及的药用盐包括乙酸盐、三氟乙酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、半琥珀酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、羟乙基磺酸盐、扁桃酸盐、甲葡胺、硝酸盐、油酸盐、膦酸盐、三甲基乙酸盐、磷酸钠、硬脂酸盐、硫酸盐、碱式水杨酸盐、酒石酸盐、硫代苹果酸盐、甲苯磺酸盐和氨丁三醇，但这并不意图表示限制。

特别优选盐酸盐、二盐酸盐、氢溴酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、硫酸盐和琥珀酸盐。

碱性式I化合物的酸加成盐通过使游离碱形式与足够量的所需酸接触，以常规方式导致盐形成来制备。游离碱可通过使盐形式与碱接触并以常规方式分离游离碱来再生。游离碱形式在某些方面(关于某些物理特性，例如在极性溶剂中的溶解度)不同于对应的其盐形式；然而，为了本发明的目的，所述盐另外地对应于其相应的游离碱形式。

如已提及的，式I化合物的药学上可接受的碱加成盐用金属或胺形成，例如碱金属和碱土金属或有机胺。优选的金属是钠、钾、镁和钙。优选的有机胺是N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺和普鲁卡因。

依据本发明的酸性化合物的碱加成盐通过使游离酸形式与足够量的所需碱接触，以常规方式导致盐的形成来制备。游离酸可通过使盐形式与酸接触并以常规方式分离游离酸来再生。游离酸形式在某些方面(关于某些物理特性，例如在极性溶剂中的溶解度)不同于对应的其盐形式；然而，为了本发明的目的，所述盐另外地对应于其相应的游离酸形式。

如果依据本发明的化合物含有一个以上的能够形成这种类型的药学上可接受的盐的基团，则本发明也涵盖多盐。典型的多盐形式包括，例如，酒石酸二盐(bitartrate)、二乙酸盐、富马酸二盐(difumarate)、二甲葡胺、二磷酸盐、二钠和三盐酸盐，但这并不意图表示限制。

关于以上所述，可以见到，在本文中采用表述"药学上可接受的盐”意指活性成分，其包括形式为其盐中的一种的式I化合物，特别是如果与游离形式的活性成分或较早使用的活性成分的任何其它盐形式比较，这种盐形式赋予所述活性成分改进的药代动力学特性。活性成分的药学上可接受的盐形式也可首次提供具有所需药代动力学特性的这种活性成分，所述药代动力学特性是其早先没有的并可甚至对这种活性成分关于其在体内的治疗效果的药效学具有正面的影响。

同位素

此外，预期使式I化合物包括其同位素-标记的形式。同位素-标记形式的式I化合物与这种化合物是相同的，但除了以下事实：化合物的一个或多个原子已被具有不同于通常天然存在的原子的原子质量或质量数的原子质量或质量数的一个或多个原子替代。可容易经市售获得的和可通过熟知的方法结合到式I化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别为例如²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F和³⁶CI。预期含有一个或多个上述同位素和/或其它原子的其它同位素的式I化合物、其前药，或药学上可接受的盐为本发明的一部分。同位素-标记的式I化合物可以许多有益的方式使用。已掺入例如放射性同位素（例如³H或¹⁴C）的同位素-标记的式I化合物适用于药物和/或底物组织分布测定。这些放射性同位素，即氚(³H)和碳-14 (¹⁴C)，由于制备简单和优良的可检测性而为特别优选的。较重的同位素，例如氘(²H)，结合到式I化合物中，由于这种同位素-标记的化合物的较高代谢稳定性而具有治疗优势。较高的代谢稳定性直接转化为增加的体内半衰期或较低的剂量，其在大多数情况下将代表本发明的优选实施方案。同位素-标记的式I化合物通常可通过进行在合成方案和相关描述中、在本文的实施例部分和在制备部分中公开的程序，用可容易获得的同位素-标记的反应物替代非同位素-标记的反应物来制备。

氘(²H)也可掺入式I化合物中，目的是为了通过初级动力学同位素作用而操控化合物的氧化代谢。初级动力学同位素作用是改变由同位素核的交换引起的化学反应的速率，同位素核的交换转而通过在这种同位素交换后共价键形成所必需的基态能量变化而引起。较重同位素的交换通常导致化学键的基态能量的降低并因此引起速率限制性断键(rate-limiting bond breakage)的速率下降。如果键结断裂发生在沿着多产物反应坐标的鞍点区或鞍点区附近，则产物分配率可基本改变。为了解释：如果氘在非可交换的位置结合于碳原子，则k_M/k_D = 2-7的比率差分(rate differences)是典型的。如果这种比率差分成功应用于易受氧化作用影响的式I化合物，则这种化合物体内的分布可被极大的改变并导致改进的药代动力学特性。

当发现和开发治疗剂时，本领域技术人员试图使药代动力学参数最优化，同时保留所需的体外特性。合理的是假定许多具有不良药代动力学特性的化合物易受氧化代谢的影响。目前可获得的体外肝微粒体测定提供关于这种类型氧化代谢的过程的有价值的信息，其进而允许合理的设计具有通过抵抗这样的氧化代谢而具有改进稳定性的氘化式I化合物。由此获得式I化合物的药代动力学特性中的重大改进，并可根据体内半衰期(t/2)的增加、在最大疗效的浓度(Cmax)、剂量应答曲线(AUC)下的面积和F，并根据减少的清除率、剂量和材料成本进行定量表示。

以下旨在说明上文：具有受氧化代谢攻击的多个潜在位点(例如苯甲型氢原子和键结于氮原子的氢原子)的式I化合物经制备为一系列类似物，其中氢原子的多种组合被氘原子替代，以使这些氢原子中的一些、大多数或全部已被氘原子替代。半衰期测定能够有利和精确地测定抵抗氧化代谢改进的改进程度。这样，由于这种类型的氘-氢交换，确定母化合物的半衰期可延长最多至100%。

式I化合物中的氘-氢交换也可用于实现起始化合物的代谢谱的有利改善，以减少或消除不期望的毒性代谢物。例如，如果毒性代谢物通过氧化性碳-氢(C-H)键断裂而产生，则可合理地假定氘化类似物将极大地减少或消除不需要的代谢物的产生，即使特殊的氧化不是速控步骤。更多的关于涉及氘-氢交换的技术发展现状的信息可见于例如Hanzlik等, J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990, Reider等, J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987, Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985, Gillette等, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994，和Jarman等. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993。

本发明还涉及药物，该药物包含至少一种式I化合物和/或其药学上可接受的衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括其所有比例的混合物，和任选的赋形剂和/或辅助剂。

药物制剂可以每剂量单位包含预定量的活性成分的剂量单位形式给药。这样的单位可包含，例如0.5 mg-1 g，优选1 mg-700 mg，特别优选5 mg-100 mg的依据本发明的化合物，这取决于所治疗的病症、给药方法和患者的年龄、体重和身体状况，或者药物制剂可以剂量单位形式给药，该计量单位包含预定量的活性成分/剂量单位。优选的剂量单位制剂为包含日剂量或如上指明的部分剂量，或其活性成分对应部分的那些制剂。此外，这种类型的药物制剂可使用制药领域通常已知的方法制备。

药物制剂可适合于经由任何期望的合适方法，例如通过口服(包括颊下或舌下)、直肠、鼻、局部(包括颊下、舌下或透皮)、阴道或胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内或皮内)方法给药。这样的制剂可使用制药领域已知的所有方法，通过例如使活性成分与赋形剂或辅助剂组合来制备。

适合于口服给药的药物制剂可作为分开的单位，例如胶囊或片剂；散剂或颗粒剂；在水性或非-水性液体中的溶液剂或混悬剂；可食用泡沫剂或发泡食物；或水包油液体乳剂或油包水液体乳剂给予。

因此，例如，在以片剂或胶囊的形式口服给药的情况下，活性成分组分可与口服的、非毒性的和药学上可接受的惰性赋形剂，例如像乙醇、甘油、水等结合。散剂通过将化合物粉碎为合适的细尺寸并使其与以类似的方法粉碎的药用赋形剂（例如可食用碳水化合物，例如像淀粉或甘露醇）混合来制备。同样可存在矫味剂、防腐剂、分散剂和染料。

胶囊通过制备如上所述的粉末混合物并用其填充成形的明胶壳来制备。助流剂和润滑剂，例如，诸如高分散性硅酸、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体形式的聚乙二醇，可加入到粉末混合物中，然后进行填充操作。同样可加入崩解剂或增溶剂，例如，像琼脂、碳酸钙或碳酸钠，以改进胶囊被摄取后药物的可利用度。

此外，如果需要或必要，可同样将合适的粘合剂、润滑剂和崩解剂以及染料掺入到混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖（例如葡萄糖或β-乳糖）、由玉米制得的甜味剂、天然和合成橡胶（例如像阿拉伯胶、黄蓍胶或藻酸钠）、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。用于这些剂型的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括，但不限于，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。片剂通过以下配制：例如制备粉末混合物，将该混合物制粒或干压，加入润滑剂和崩解剂并压制整个混合物以得到片剂。粉末混合物通过将以合适的方式粉碎的化合物与如上所述的稀释剂或基质，和任选与粘合剂（例如像羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮）、溶解阻滞剂例如像石蜡，吸收促进剂例如像季胺盐，和/或吸收剂（例如像膨润土、高岭土或磷酸二钙）混合来制备。粉末混合物可通过将其用粘合剂例如糖浆、淀粉糊、阿拉伯胶或纤维素或聚合物材料的溶液湿润并将其压过筛来制粒。作为对制粒的备选方案，可使粉末混合物通过压片机，得到不均匀形状的块状物，将其破碎以形成颗粒。颗粒可通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石粉或矿物油进行润滑，以防止粘附在片剂铸模上。然后压制经润滑的混合物，得到片剂。依据本发明的化合物也可与自由流动的惰性赋形剂组合，然后无需进行制粒或干压步骤而直接压制，得到片剂。可存在由虫胶密封层、糖或聚合物材料层和蜡的光泽层组成的透明或不透明的保护层。可将染料加入到这些包衣料中，以便能够在不同的剂量单位之间进行区分。

口服液体，例如，诸如溶液、糖浆和酏剂，可以剂量单位的形式制备，以使给定的量包含预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶于含合适的矫味剂的水性溶液中制备，而酏剂使用无毒的醇性媒介物制备。混悬剂可通过将化合物分散于无毒的媒介物中来配制。同样可加入增溶剂和乳化剂，例如，诸如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚、防腐剂、香料添加剂，例如薄荷油或天然甜味剂或糖精，或其它人工甜味剂等。

如果需要，可将供口服给药的剂量单位制剂封装到微囊中。也可以一定方式来制备所述制剂，例如，诸如通过将颗粒原料包衣或包埋在聚合物、蜡等中，使得延长或延迟释放。

式I化合物及其盐、溶剂合物和生理功能衍生物也可以脂质体传递系统的形式给予，例如像小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡。脂质体可由多种磷脂，例如像胆固醇、硬脂胺或卵磷脂形成。

式I化合物及其盐、溶剂合物和生理功能衍生物也可使用作为化合物分子偶联的单个载体的单克隆抗体来传递。化合物也可偶联于作为靶向药物载体的可溶性聚合物。这样的聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰氨基苯酚、聚羟乙基天门冬氨酰基苯酚或聚氧化乙烯聚赖氨酸(被棕榈酰基取代)。化合物可以进一步偶合于一类可生物降解的聚合物，其适合于实现药物的控制释放，所述聚合物有例如聚乳酸、聚-ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二羟基吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或芳脂族嵌段共聚物。

适于经皮给药的药物制剂可以作为与接受者的表皮长期、紧密接触的独立糊剂来给药。因此，例如，活性成分可以通过离子电渗疗法(如Pharmaceutical Research，3(6)，318 (1986)的通用术语中所述)，由该糊剂来传递。

适于局部给药的药用化合物可以被配制成软膏、乳膏、混悬剂、洗剂、散剂、溶液剂、糊剂、凝胶、喷雾剂、气雾剂或油。

对于眼睛或其它外部组织例如口腔和皮肤的治疗而言，所述制剂优选作为局部软膏或乳膏施用。在给予软膏制剂的情况中，活性成分可以与石蜡或者水可混溶的乳膏基质一起使用。或者，可以将活性成分用水包油乳膏基质或油包水基质配制而得到乳膏。

适于局部施用于眼睛的药物制剂包括滴眼剂，其中活性成分被溶解或混悬于适宜的载体，特别是水性溶剂中。

适于局部施用于口腔的药物制剂包括锭剂、软锭剂和漱口剂。

适于直肠给药的药物制剂可以以栓剂或灌肠剂的形式给药。

其中所述载体物质为固体的适于鼻给药的药物制剂包含粒径为例如范围在20-500微米的粗粉末，其以用鼻吸入的方式给药，即通过经由鼻道从举到鼻子附近的包含所述粉末的容器中快速吸入来给药。用于以具有作为载体物质的液体的鼻喷雾或滴鼻剂给药的适宜制剂包含在水或油中的活性成分溶液。

适于通过吸入进行给药的药物制剂包含细颗粒粉尘或雾，其可以通过各种类型的具有气雾剂的加压分配器、喷雾器或吸入器来产生。

适于阴道给药的药物制剂可以作为阴道栓、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂给药。

适于胃肠外给药的药物制剂包括水性或非水性无菌注射溶液，其包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与待治疗的接受者的血液等渗的溶质；和可包含混悬介质和增稠剂的水性和非水性无菌混悬液。该制剂可以以单剂量或多剂量容器（例如密封安瓿和小瓶）给予，并且以冷冻干燥(冻干)状态储存，从而使得必需在临用前即刻仅加入无菌的液体载体，例如注射用水。根据处方制备的注射溶液和混悬液可以由无菌的粉末、颗粒和片剂来制备。

不言而喻，除上面特别提及的组分外，对特定类型的制剂而言，所述制剂还可包含本领域中常用的其它剂；因此，例如适于口服给药的制剂可包含矫味剂。

式I化合物的治疗有效量取决于许多因素，包括例如动物的年龄和体重、需要治疗的准确状况及其严重性、制剂的性质和给药方法，并且最终由进行治疗的医生或兽医确定。然而，本发明的化合物的有效量通常在每天0.1至100mg/kg接受者(哺乳动物)体重的范围内，并且特别典型地在每天1至10mg/kg体重的范围内。因此，对体重为70kg的成年哺乳动物而言，每天的实际数量通常为70至700mg，其中该量每天可以作为单剂量给予或者通常按每天一系列部分剂量(例如像两份、三份、四份、五份或六份)给予，从而使得总的日剂量相同。盐或溶剂合物或其生理学上的官能衍生物的有效量可以作为依据本发明的化合物本身有效量的分数来确定。可以推定相似的剂量也适用于治疗上述的其它状况。

所公开的式I的化合物可与其它已知的治疗剂联合给予，所述治疗剂包括用于治疗RA (类风湿性关节炎)的剂。本文使用的术语"用于治疗RA的剂"涉及对患有RA的患者给予的用于治疗RA目的的任何剂。

以下药物优选(但不是排他地)与式I的化合物联用：

1. NSAID (非甾族抗炎药物)和镇痛剂

2. 糖皮质激素(低口服剂量)

3. 常规的疾病调节抗风湿病药物(DMARD)

　 -氨甲喋呤

　 -来氟米特

　 -柳氮磺吡啶

　 -羟氯喹

　 -硫唑嘌呤

　 -环孢素

　 -米诺环素

　 -金

4. 生物响应改性剂(BRM)--> 涉及炎性过程的靶分子/免疫细胞，并且包括以下剂：

　 -TNF抑制剂

　　 -依那西普(Enbrel)

　　 -英夫利昔单抗(Remicade)

　　 -阿达木单抗(Humira)

　 -B-细胞-引导的治疗

　　 -利妥昔单抗(Rituxan)

　 -T-细胞/B-细胞共激活信号抑制剂

　　 -阿巴西普(Orencia)

　 -IL-1受体拮抗剂

　　 -阿那白滞素(Kineret)

借助于同时、连续或单独分配治疗的单个组分，可实现这种类型的联合治疗。这种类型的联用产物采用本发明的化合物。

此外，本发明涉及药物，所述药物包含至少一种式I的化合物和/或它们的药学上可接受的盐、溶剂合物和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，和至少一种其它药物活性成分。

本发明还涉及一种套装(试剂盒)，其由以下单独的包组成：

(a) 有效量的式I的化合物和/或它们的药学上可接受的盐、溶剂合物和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，

和

(b) 有效量的另外的药物活性成分。

药物套装包含合适的容器，例如盒、单个瓶、袋或安瓿。药物套装可例如包含单独的安瓿，每个安瓿含有有效量的式I化合物和/或它们的药学上可接受的盐、溶剂合物和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物。

和有效量的溶解或冻干形式的另外的药物活性成分。

本文使用的"治疗"指在处于发展疾病或病症的风险的受试者中整体或部分地减轻与病症或疾病相关的症状，或者减慢或停止那些症状进一步进展或恶化，或防止或预防疾病或病症。

术语"有效量"与式(I)的化合物结合时，可指这样的量：其能在具有或处于发展本文所公开的疾病风险的受试者中整体或部分地减轻与病症或疾病相关的症状，或者减慢或停止那些症状进一步进展或恶化，或防止或提供预防疾病或病症，例如炎性状况、免疫学状况、癌症、代谢状况或通过抑制激酶或激酶路径可治疗或可预防的状况，在一种实施方案中，所述激酶路径为Syk、FLT-3,JAKl和/或JAK2路径。在一种实施方案中，式(I)化合物的有效量为在细胞中(例如，体外或体内)抑制激酶的量。在一些实施方案中，与在未经治疗的细胞中激酶的活性相比，有效量的式(I)的化合物将细胞中的激酶抑制10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或99%。例如在药物组合物中，式(I)化合物的有效量可在实现期望效果的水平；对于口服和肠胃外给予二者，在单位剂量中有例如约0.005 mg/kg受试者体重-约10 mg/kg受试者的体重。

应用

本发明的化合物适合作为药物活性成分，用于哺乳动物，尤其是用于人，用于治疗酪氨酸激酶-诱导的疾病。

本发明包括使用式I的化合物和/或它们的生理可接受的盐和溶剂合物用于制备药物，所述药物用于治疗或预防类风湿性关节炎、系统狼疮、哮喘、过敏性鼻炎、ITP、多发性硬化、白血病、乳腺癌和恶性黑素瘤。

炎性疾病的实例包括类风湿性关节炎、牛皮癣、接触皮炎、延迟过敏症反应等。

还包括使用式I的化合物和/或它们的生理可接受的盐和溶剂合物用于制备药物，所述药物用于治疗或预防在哺乳动物中酪氨酸激酶-诱导的疾病或酪氨酸激酶-诱导的状况，其中在该方法中将治疗有效量的本发明的化合物给予需要这种治疗的生病的哺乳动物。治疗量根据具体的疾病而改变，并且可由本领域技术人员无需过度的努力地确定。

本发明还包括使用式I的化合物和/或它们的生理可接受的盐和溶剂合物用于制备药物，所述药物用于治疗或预防视网膜血管形成。

表述"酪氨酸激酶-诱导的疾病或状况"指取决于一种或多种酪氨酸激酶的活性的病理学状况。酪氨酸激酶直接或间接参与多种细胞活性的信号转导路径，包括增殖、粘着和迁移和分化。与酪氨酸激酶活性相关的疾病包括瘤细胞的增殖、促进实体瘤生长的病理学新血管形成、眼新血管形成(糖尿病性视网膜病、年龄-诱导的黄斑变性等)和发炎(牛皮癣、类风湿性关节炎等)。

本发明特别涉及式I的化合物和它们的药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，

用于治疗其中Syk的抑制、调整和/或调节抑制起作用的疾病。

本发明特别涉及式I的化合物和它们的药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，用于抑制Syk。

本发明涉及一种治疗增殖性、自身免疫、抗炎或感染疾病病症的方法，所述方法包括给予有需要的受试者治疗有效量的式I的化合物。

优选，本发明涉及一种其中所述疾病为癌症的方法。

特别优选，本发明涉及一种其中所述疾病为癌症的方法，其中给药与至少一种其它活性药物剂的给药同时、连续或交替。

所公开的式I的化合物可与其它已知的治疗剂联合给予，包括抗癌剂。本文使用的术语"抗癌剂"涉及给予患有癌症的患者用于治疗癌症目的的任何剂。

公开的式I化合物可与其它已知的治疗剂，包括抗癌剂组合给予。如在本文所用的，术语"抗癌剂"涉及为治疗癌症的目的而给予患有癌症的患者的任何剂。

本文定义的抗癌治疗可以作为单一的疗法应用或者除了本发明的化合物外，还可包括常规手术或放射性疗法或化学疗法。这样的化学疗法可以包括以下种类的抗肿瘤剂中的一个或多个：

(i) 如用于医学肿瘤学的抗增殖/抗肿瘤/DNA-破坏剂及其组合，例如烷基化剂(例如顺铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安和亚硝基脲)；抗代谢药(例如抗叶酸剂例如氟代嘧啶像5 氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、氨甲喋呤、阿糖胞苷、羟基脲和吉西他滨)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环霉素，像阿霉素、博来霉素、多柔比星、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素-C、放线菌素D和普卡霉素)；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱，像长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨，和紫杉烷类，像紫杉醇和泰素帝)；拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素，像依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康、伊立替康和喜树碱)和细胞分化剂(例如所有反式-视黄酸、13-顺式--视黄酸和芬维A胺)；

(ii) 细胞生长抑制剂，例如抗雌激素剂(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬(iodoxyfene))、雌激素受体下调剂(例如氟维司群)、抗雄激素剂(例如比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特和醋酸环丙孕酮)、LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕酮(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑和尹西美坦)和5α-还原酶抑制剂例如非那雄胺；

(iii) 抑制癌细胞侵袭的剂(例如金属蛋白酶抑制剂，像马立马司他和尿激酶纤溶酶激活剂受体功能的抑制剂)；

(iv) 生长因子功能的抑制剂，例如此类抑制剂包括生长因子抗体、生长因子受体抗体(例如抗-erbb2抗体曲妥珠单抗[HerceptinTM]和抗-erbbl抗体西妥昔单抗[C225])、法呢基转移酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂和丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂，例如表皮生长因子家族的抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，例如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(厄洛替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033))，例如血小板衍生的生长因子家族的抑制剂；和例如肝细胞生长因子家族的抑制剂；

(v) 抗血管生成剂，例如抑制血管内皮生长因子的作用的那些剂(例如抗血管内皮细胞生长因子抗体贝伐单抗[AvastinTM]，化合物例如在国际专利申请WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856和WO 98/13354)中公开的那些，和通过其它机理起作用的化合物(例如利诺胺、整联蛋白αvβ3功能抑制剂和血管他丁)；

(vi) 血管破坏剂，例如考布他汀A4和在国际专利申请WO 99/02166、WO 00/40529、WO00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO 02/08213中公开的化合物；

(vii) 反义疗法，例如导向上列靶标的那些，例如ISIS 2503、抗-Ras反义药物；

(viii) 基因治疗方法，包括例如替换异常基因例如异常p53或异常BRCA1或BRCA2的方法；GDEPT (基因引导的酶前药治疗)方法，例如用胞嘧啶脱酰胺酶、胸腺苷激酶或细菌硝基还原酶的那些方法，和增加患者对化疗或放疗的耐受性的方法，例如多重耐药性基因疗法；和

(ix) 免疫疗法，包括例如增加患者肿瘤细胞的免疫原性的离体和体内方法，例如用细胞因子例如白介素2、白介素4或粒细胞巨嗜细胞集落刺激因子转染；减少T细胞无反应性的方法；用转染的免疫细胞例如细胞因子-转染的树突细胞的方法；用细胞因子-转染的肿瘤细胞系的方法，和用抗独特型抗体的方法。

下表1的药物优选(但不排他地)与式I化合物组合。

本发明特别涉及式I的化合物和它们的药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，用于治疗类风湿性关节炎、系统狼疮、哮喘、过敏性鼻炎、ITP、多发性硬化、白血病、乳腺癌、恶性黑素瘤。

本发明特别涉及用于治疗或预防炎性状况、免疫学状况、自身免疫状况、过敏性状况、风湿病状况、血栓形成状况、癌症、感染、神经退行性疾病、神经炎性疾病、心血管疾病或代谢状况的方法，所述方法包括给予有需要的受试者有效量的式I的化合物或它们的药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或溶剂合物。

在另一方面，本文提供在表达所述激酶的细胞中抑制激酶的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的式I的化合物或它们的药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或溶剂合物接触。在一种实施方案中，激酶为Syk、FLT3、JAK1或JAK2或JAK3或BTK或它们的突变体或同种型，或者它们中的两个或更多个的组合。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性免疫学状况包括但不限于贝赫切特综合征、非变应性肥大细胞疾病(例如，肥大细胞增多症和治疗过敏性反应)、强直性脊柱炎、骨关节炎、类风湿性关节炎(RA)、多发性硬化、狼疮、炎性肠疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、重症肌无力、格雷夫斯病、移植排异反应、体液移植排异反应、非体液移植排异反应、细胞移植排异反应、免疫血小板减少性紫癜(ITP)、特发性血小板减少性紫癜、糖尿病、对细菌的免疫学响应、寄生物、寄生虫感染或病毒感染、湿疹、皮炎、移植相对宿主疾病、古德帕斯彻病、新生儿溶血病、自身免疫溶血贫血症、抗磷脂综合征、ANCA-相关的血管炎、丘-施综合征、韦格纳肉芽肿病、寻常天疱疮、血清病、混合冷沉球蛋白血症、与IgM抗体相关的外周神经病、显微多脉管炎、桥本甲状腺炎、斯耶格伦综合征、纤维化状况(例如取决于先天性或适合性免疫系统或局部间充质细胞的那些)或原发性胆汁性肝硬化。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性自身免疫状况包括但不限于自身免疫溶血性贫血症(A1HA)、贝赫切特综合征、克罗恩病、I型糖尿病、古德帕斯彻病、格雷夫斯病、桥本甲状腺炎、特发性血小板减少性紫癜、狼疮、多发性硬化、肌萎缩外侧硬化、重症肌无力、寻常天疱疮、原发性胆汁性肝硬化、类风湿性关节炎、硬皮病、斯耶格伦综合征、溃疡性结肠炎或韦格纳肉芽肿病。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性过敏性状况包括但不限于过敏性反应、枯草热、过敏性结膜炎、过敏性鼻炎、过敏性哮喘、特应性皮炎、湿疹、荨麻疹、粘膜病症、组织病症和某些胃肠病症。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性风湿病状况包括但不限于类风湿性关节炎、痛风、强直性脊柱炎或骨关节炎。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性炎性状况包括但不限于非ANCA (抗嗜中性白细胞胞浆自动抗体)血管炎(例如，其中Syk功能与嗜中性白细胞粘着、血细胞渗出和/或激活相关)、牛皮癣、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、荨麻疹、过敏性反应、支气管炎、慢性梗阻性肺病、囊性纤维变性、炎性肠疾病、应激性肠综合征、痛风、克罗恩病、粘液结肠炎、溃疡性结肠炎、对肠抗原的变应性(例如麸质肠病)、糖尿病(例如，I型糖尿病和II型糖尿病)和肥胖。在一些实施方案中，炎性状况为皮肤病状况，例如，牛皮癣、荨麻疹(urticaria)、荨麻疹(hives)、湿疹、硬皮病或皮炎。在其它实施方案中，炎性状况为炎性肺状况，例如，哮喘、支气管炎、慢性梗阻性肺病(COPD)或成人/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。在其它实施方案中，炎性状况为胃肠状况，例如，炎性肠疾病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、特发性炎性肠疾病、应激性肠综合征或痉挛性结肠。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性感染包括但不限于细菌、寄生物、蛋白病毒、病毒感染或寄生虫感染。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性癌症包括但不限于以下的癌症：头、颈、眼、嘴、喉、食道、支气管、喉、咽、胸、骨、肺、结肠、直肠、胃、前列腺、泌尿器膀胱、子宫、子宫颈、乳房、卵巢、睾丸或其它生殖器官、皮肤、甲状腺、血液、淋巴结、肾、肝、胰腺、脑、中枢神经系统、实体瘤和血液-骨瘤。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性心血管疾病包括但不限于再狭窄、动脉粥样硬化及其后果，例如中风、心肌梗塞、对心脏、肺、肠、肾、肝、胰腺、脾或脑的缺血性损伤。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性代谢状况包括但不限于肥胖和糖尿病(例如，I型和II型糖尿病)。在一个具体的实施方案中，本文提供了用于治疗或预防胰岛素抗性的方法。在某些实施方案中，本文提供了用于治疗或预防导致糖尿病(例如，II型糖尿病)的胰岛素抗性的方法。在另一实施方案中，本文提供了用于治疗或预防综合征X或代谢综合征的方法。在另一实施方案中，本文提供了用于治疗或预防以下的方法：II型糖尿病、I型糖尿病、缓慢发病I型糖尿病、尿崩症(例如，神经性尿崩症、肾原性尿崩症、致渴的尿崩症或促孕激素尿崩症)、糖尿病、妊娠期糖尿病、多囊卵巢综合征、成人糖尿病、少年糖尿病、胰岛素依赖性糖尿病、非胰岛素依赖性糖尿病、营养不良相关的糖尿病、酮症倾向糖尿病、糖尿病前期(例如，削弱的葡萄糖代谢)、囊性纤维变性相关的糖尿病、血色病和酮病-抗性糖尿病。

式I的化合物可用于治疗或预防的代表性神经退行性和神经炎性疾病包括但不限于亨廷顿舞蹈病、阿尔茨海默病、病毒(例如，HIV)或细菌相关的脑炎和损伤。

在另一实施方案中，本文提供了用于治疗或预防纤维化疾病和病症的方法。在一个具体的实施方案中，本文提供了用于治疗或预防特发性肺纤维变性、骨髓纤维变性、肝纤维变性、脂肪纤维变性和脂肪肝的方法。

在另一实施方案中，本文提供了用于治疗或预防与血栓形成事件相关的疾病的方法，例如但不限于动脉粥样硬化、心肌梗塞和缺血性中风。

本发明特别涉及式I的化合物和它们的药学上可接受的盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们按所有比率的混合物，用于治疗和/或预防炎性状况、免疫学状况、自身免疫状况、过敏性状况、风湿病状况、血栓形成状况、癌症、感染、神经变性疾病、神经炎性疾病、心血管疾病和代谢状况，所述方法包括给予有需要的受试者有效量的权利要求1的化合物。

此外，本发明特别涉及用于治疗和/或预防癌症的化合物，

其中待治疗的癌症为实体瘤或血液和免疫系统的瘤。

此外，本发明特别涉及用于治疗和/或预防癌症的化合物，其中所述瘤源自急性髓细胞白血病、慢性髓细胞白血病、急性淋巴白血病和/或慢性淋巴白血病。

此外，本发明特别涉及用于治疗和/或预防癌症的化合物，其中所述实体瘤源自上皮、膀胱、胃、肾、头颈、食道、子宫颈、甲状腺、肠、肝、脑、前列腺、泌尿生殖道、淋巴系统、胃、喉、骨（包括软骨肉瘤和尤因肉瘤）、胚芽细胞（包括胚胎组织瘤）和/或肺的瘤；源自单核细胞性白血病、肺腺癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、神经纤维瘤、血管肉瘤、乳腺癌和/或恶性黑素瘤。

此外，本发明特别涉及用于治疗和/或预防选自以下的疾病：类风湿性关节炎、系统狼疮、哮喘、多发性硬化、骨关节炎、缺血性损伤、巨细胞动脉炎、炎性肠疾病、糖尿病、囊性纤维变性、牛皮癣、斯耶格伦氏综合征和移植器官排斥反应。

此外，本发明特别涉及化合物用于治疗和/或预防选自以下的疾病：阿尔茨海默病、唐氏综合征、荷兰型遗传性大脑出血伴淀粉样变性、大脑淀粉样血管病、克罗伊茨费尔特-雅各布病、额颞骨痴呆、亨廷顿舞蹈病、帕金森病。

此外，本发明特别涉及化合物用于治疗和/或预防选自以下的疾病：利什曼虫、包括麻风分枝杆菌(M. leprae)、结核分枝杆菌(M. tuberculosis)和/或鸟分枝杆菌(M. avium)的分枝杆菌(mycobacteria)、利什曼虫、疟原虫、人免疫缺陷病毒、EB病毒、疱疹单纯病毒、丙肝病毒。

以下缩写分别指以下定义；

aq (含水)，h (小时)，g (克)，L (升)，mg (毫克)，MHz (兆赫)，min. (分钟)，mm (毫米)，mmol (毫摩尔)，mM (毫摩尔浓度)，m.p. (熔点)，eq (当量)，mL (毫升)，μL (微升)，ACN (乙腈)，AcOH (乙酸)，CDCl₃ (氘化氯仿)，CD₃OD (氘化甲醇)，CH₃CN (乙腈)，c-hex (环己烷)，DCC (二环己基碳二亚胺)，DCM (二氯甲烷)，DIC (二异丙基碳二亚胺)，DIEA (二异丙基乙基胺)，DMF (二甲基甲酰胺)，DMSO (二甲基亚砜)，DMSO-d₆ (氘化二甲基亚砜)，EDC (1-(3-二甲基-氨基-丙基)-3-乙基碳二亚胺)，ESI (电喷电离)，EtOAc (乙酸乙酯)，Et₂O (二乙醚)，EtOH (乙醇)，HATU (二甲基氨基-([1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)-亚甲基]-二甲基-六氟磷酸铵)，HPLC (高效液相色谱法)，i-PrOH (2-丙醇)，K₂CO₃ (碳酸钾)，LC (高效液相色谱法)，MeOH (甲醇)，MgSO₄ (硫酸镁)，MS (质谱法)，MTBE (甲基叔丁基醚)，NaHCO₃ (碳酸氢钠)，NaBH4 (硼氢化钠)，NMM (N-甲基吗啉)，NMR (核磁共振)，PyBOP (苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷子基-磷鎓六氟磷酸盐)，RT (室温)，Rt (保留时间)，SPE (固相萃取)，TBTU (2-(1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐)，TEA (三乙胺)，TFA (三氟乙酸)，THF (四氢呋喃)，TLC (薄层层析法)，UV (紫外)。

体外测定的描述

SYK快速板测定(flash palte assay)

按384-孔快速板测定(用于例如Topcount测量)或按384-孔图像-快速板测定(用于LEADseeker测量)实施激酶测定。

在30℃下，将2.5 nM SYK、400 nM 生物素-Aha-Aha-KEDPDYEWPSAKK和10 μM ATP (每个孔注入0.3 μCi 33P-ATP)在总体积50 μl (60 mM Hepes、10 mM MgCl₂、1.2 mM二硫代苏糖醇、0.02 % Brij35、0.1 % BSA，pH 7.5)中，带有或不带有测试化合物培育1小时。用25μl 200 mM EDTA停止反应。在30℃下30分钟后，除去液体，每一个孔用100 μl 0.9%氯化钠溶液洗涤三次。在0.1 μM星孢素存在下，测定非特异性反应。分别使用Topcount (当使用快速板时)或使用LEADseeker (当使用图像-快速板时)测量放射性。使用由IT部门提供的程序工具(例如Symyx Assay Explorer，Genedata Screener)计算结果(例如IC50-值)。

体内测定

CIA

对于骨胶原-诱导的关节炎(CIA)的诱导，在第21天，对雄性DBA/1小鼠腹膜内注射500 μl姥鲛烷。在第0天，小鼠用在完全Freund辅药(CFA)中的100 μg鸡骨胶原II型(CII)皮内免疫，在第0天，经耳廓和后背上的一个部位分布。在第21天，使用在PBS中的可溶性CII，小鼠接受腹膜内加强免疫(100 μg)。Syk抑制剂的给药是预防性的：在第0天开始，继续直至第10天，在第20天在加强前开始，继续直至第30天。以3、10和30 mg/kg的剂量，口服给予化合物，每天两次。

每天记录体重和临床分数。基于单个爪中发炎的评定，使用临床评分系统，将关节炎严重性分级。对于每一个单独的爪，该临床分数的等级在0-4范围。

GIA

对于葡萄糖-6-磷酸盐异构酶-诱导的关节炎(GIA)的诱导，对雌性DBA/1小鼠用完全Freund辅药(CFA)中的100 μg G6PI皮内免疫，在第0天，经耳廓和后背上的一个部位分布。Syk抑制剂的给药是预防性的：在第0天开始，继续直至第14天。以3、10和30 mg/kg的剂量，化合物口服给予，每天两次。

每天记录体重和临床分数。基于单个爪中发炎的评定，使用临床评分系统，将关节炎严重性分级。对于每一个单独的爪，该临床分数的等级在0-4范围。

上下文中，所有温度用℃指示。在以下实施例中，"常规的后处理"指：如果需要，加入水，如果需要，调节pH至2-10的值，根据终产物的组成，混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，将各相分离，有机相经硫酸钠干燥，蒸发，残余物通过层析法在硅胶上和/或通过结晶纯化。在硅胶上的Rf值；洗脱液：乙酸乙酯/甲醇9:1。

如下得到在以下描述的实施例中提供的HPLC数据(给定保留时间)。

方法A：1分钟99 % A。2.5分钟后，从99 % A到100 % B；接着，1.5 分钟100 % B和1分钟99 % A；Column Chromolith SpeedRod RP-18e；50-4.6mm；检测220 nM (溶剂A：H₂O (0.1 % TFA)，溶剂B：ACN (0.1% TFA)；

方法A：柱：XBridge C8 (50×4.6 mm，3.5 μm)；

A-0.1 % TFA在H₂O中，B-0.1 % TFA在ACN中：流速-2.0 mL/分钟。

在实施例中提供的LCMS数据连同保留时间、纯度和/或质量(以m/z计)给出。如下得到结果：质谱：LC/MS Waters ZMD (ESI)或HP 1100系列的Hewlett Packard System (离子来源：电喷(正模式)；扫描：100-1000 m/z；碎裂-电压：60 V；气体-温度：300℃，DAD：220 nm。流速：2.4 ml/分钟。对于MS，在DAD后，所用的分离器降低流速至0.75ml/分钟；柱：Chromolith Speed ROD RP-18e 50-4.6；溶剂：得自Merck KGaA公司的LiChrosolv-品质或如在以下方法中提及：

方法A：柱：XBridge C8 (50×4.6mm，3.5μm)，+ve模式；A-0.1 % TFA在H₂O中，B-0.1 % TFA在ACN中：流速-2.0 mL/分钟；柱：XBridge C8 (50×4.6mm，3.5μm)，+ve模式。

方法B：柱：XBridge C8 (50×4.6mm，3.5μm)，-ve模式；A-0.1 % NH₄HCO₃在H₂O中，B-ACN：流速-1.0 mL/分钟。

方法C：柱：Chromolith SpeedROD RP-18e 50-4.6mm；溶剂A：水+0.05%甲酸；溶剂B：乙腈+0.04%甲酸，流量：2.4ml/分钟；梯度：在2.8分钟内，从4% B到100% B

方法D：柱：Chromolith Speed Rod RP18e-50-4.6；流量：2.4ml/分钟；溶剂A：水+0.1% TFA；溶剂B：乙腈+0.1% TFA；WL：220 nm

梯度：在2.6分钟内：从4%B到100%B，接着，0.7分钟100 % B

在Agilent 1200上实施制备型HPLC。柱：Chromolith prep RP 18e Merck KGaA。流动相：0.1%甲酸在水中/0.1%甲酸在乙腈中。

在Bruker DPX-300、DRX-400或AVII-400光谱计上记录¹H NMR，使用氘化溶剂的残余信号作为内参。化学位移(δ)相对于残余的溶剂信号(对于1H NMR，在DMSO-d₆中，δ=2.49 ppm)报道，以ppm计。如下报道1H NMR数据：化学位移(多重性，偶合常数，和氢的数量)。多重性如下缩写：s (单峰)，d (双重峰)，t (三重峰)，q (四重峰)，m (多重峰)，br (宽)。

在得自Personal Chemistry的单一模式微波反应器Emrys^TM Optimiser上实施微波化学。

实施例

制备反应物

2-(2-氯-4-异硫氰酸根合-苯基硫烷基)-1-甲基-4,5-二氢-1H-咪唑("A1")

在0℃下，在N₂惰性气氛下，向3-氯-4-(1-甲基-4,5-二氢-1H-咪唑-2-基硫烷基)-苯基胺(5.0 g，21 mmol)和二异丙基乙基胺(5.37 g，41.6 mmol)在无水四氢呋喃中的搅动的溶液中逐滴加入四氢呋喃中的硫光气(2.39 g，21 mmol)，搅拌20分钟。当反应完成时，在室温下浓缩反应混合物，溶解于二氯甲烷(100 mL)中，用水(2×50 mL)洗涤，经无水MgSO₄干燥，以得到褐色固体状的产物(5.8 g，99%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(8/2) R_f—0.4。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，282.0)，Rt (分钟)：3.43，面积% 71.5 (最大)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：d 7.72 (d，J=2.16 Hz，1H)，7.57 (s，1H)，7.31 (m，1H)，7.28 (m，1H)，6.43 (d，J=8.56 Hz，1H)，3.61(s，3H)。

2,2-二氟-6-异硫氰酸根合-4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮("A2")

由6-氨基-2,2-二氟-4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮起始，采用用于中间体"A1"的方案，制备褐色固体状的中间体"A2" (2.2 g，91%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(8/2) R_f—0.2；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 12.13 (br s，1H)，7.37 (d，J=8.8 Hz，1H)，7.21 (m，1H)，7.04 (s，1H)。

1-苄基-6-异硫氰酸根合-1H-吲唑("A3")

由1-苄基-1H-吲唑-6-基胺起始，采用用于中间体"A1"的方案，制备褐色固体状的中间体"A3" (2.9 g，98%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(8/2) R_f—0.4。LCMS (方法B)：质量实测值(M+H⁺，266.2)，Rt (分钟)：4.58 面积% 94.8 (最大)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 8.16 (s，1H)，7.97 (s，1H)，7.82 (d，J=8.52 Hz，1H)，7.24 (m，5H)，7.15 (m，1H)，5.64 (s，2H)。

6-异硫氰酸根合-2,2-二甲基-4H-吡啶并[3,2-b]噁嗪-3-酮("A4")

由6-氨基-2,2-二甲基-4H-吡啶并[3,2-b]噁嗪-3-酮起始，采用用于中间体A1的方案，制备褐色固体状的中间体"A4" (2.0 g，83%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(8/2) R_f—0.4。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，236.0)，Rt (分钟)：4.12 面积% 83.8 (最大)，82.18 (220 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 11.44 (br s，1H)，7.43 (d，J=8.24 Hz，1H)，6.99 (d，J=8.24 Hz，1H)，1.42 (s，6H)。

N-(叔丁氧基羰基)-O-(均三甲苯基磺酰基)-羟基胺

向2-均三甲苯磺酰氯(2.0 g，9.14 mmol)在无水THF (50 mL)中的溶液中加入N-Boc-羟基胺(1.21 g，9.14 mmol)，并且在N₂气氛下冷却至0℃。将反应混合物搅拌5分钟。经10分钟，向该混合物中缓慢加入三乙胺(1.1 g，11 mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，完成后，真空除去溶剂。将残余物再溶解于二氯甲烷(50 mL)中，用水(2×50 mL)、10% NaHCO₃水溶液(50 mL)洗涤，经MgSO₄干燥。其随后在室温下减压浓缩，以得到米色固体状的产物；(2.1 g，73%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(8/2) R_f—0.4。¹H NMR (DMSO-d₆；400 MHz)：δ 11.16 (s，1H)，7.12 (s，2H)，2.49 (s，6H)，2.28 (s，3H)，1.23 (s，9H)。

2-[(氨基氧基)-磺酰基]-1,3,5-三甲基苯

在0℃下，在氮气气氛下，向固体产物N-(叔丁氧基羰基)-O-(均三甲苯基磺酰基)-羟基胺(2.1 g，6.6 mmol)中缓慢加入三氟乙酸(20 mL)。将反应混合物搅拌30分钟，接着缓慢加入水(60 mL)。让反应在0℃下保持15分钟。过滤沉淀的固体，水洗若干次，直至滤液的pH为中性。在布氏漏斗中干燥白色固体(1.4 g，98%)，立即用于下一个反应；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 6.73 (s，2H)，2.48 (s，6H)，2.15 (s，3H)。

1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(mesitylenate)

在0℃下，在N₂气氛下，经10分钟，向2-氨基-3-氯-吡嗪(1.4 g，11 mmol)在无水二氯甲烷(25 mL)中的溶液中加入2-[(氨基氧基)-磺酰基]-1,3,5-三甲基苯(2.91 g，13.5 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。向该反应混合物中加入二乙醚(100 mL)，搅拌15分钟。过滤沉淀的固体，用二乙醚洗涤，以得到浅褐色固体状的产物(3 g，80%)；¹H NMR (DMSO-d₆，400 MHz)：δ 9.07 (br s，2H)，8.11 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.78 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.28 (s，1H)，6.72 (s，1H)，2.48 (s，6H)，2.15 (s，3H)。

8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-(3,5-二甲基-苯基)-胺("B1")

向3,5-二甲基异硫氰酸酯(200 mg，1.2 mmol)在二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1:1) (5.0 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(0.59 g，0.0017 mol)和二异丙基乙基胺(791 mg，6.1 mmol)。将反应混合物搅拌1小时。加入EDCI (93 mg，5 mmol)，将溶液在室温下搅拌2小时，随后浓缩至干。将残余物溶解于水中，搅拌5分钟，过滤沉淀的固体，水洗，干燥，以得到浅褐色固体状的产物(0.25 g，75%)。TLC：石油醚/乙酸乙酯(6/4) R_f—0.4。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，274.0)，Rt (分钟)：4.47 面积% 98.0 (最大)，98.47 (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 9.99 (s，1H)，8.95 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.91 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.28 (s，2H)，6.58 (s，1H)，2.24(s，6H)。

8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-(3,5-二甲氧基-苯基)-胺("B2")

向3,5-二甲氧基异硫氰酸酯(0.4 g，2 mmol)在二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1:1) (25.0 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(0.98 g，2.8 mmol)和二异丙基乙基胺(1.32 g，10 mmol)。将反应混合物搅拌1小时，接着加入EDCI (0.79 g，4 mmol)。将反应物在室温下搅拌5小时，浓缩至干。将残余物溶解于水中，搅拌15分钟。过滤沉淀的固体，水洗，干燥，以得到浅褐色固体状的产物(0.5 g，80%)。TLC：氯仿/甲醇(9/1) R_f—0.5。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，306.0)，Rt (分钟)：3.81 面积% 98.7 (最大)，98.77 (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 10.10 (s，1H)，8.95 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.91 (d，J=4.32 Hz，1H)，6.91 (m，2H)，6.13 (m，1H)，3.73 (s，6H)。

8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-(3-三氟甲基-苯基)-胺("B3")

向3-(三氟甲基)异硫氰酸酯(0.6 g，3 mmol)在二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1:1) (25.0 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(1.42 g，4.1 mmol)和二异丙基乙基胺(1.9 g，14.5 mmol)。将其搅拌1小时，加入EDCI (1.12 g，6 mmol)，将反应混合物在室温下搅拌2小时。当反应完成时，将其浓缩至干，将溶解于水中的残余物搅拌5分钟。过滤沉淀的固体，水洗，干燥，以得到浅褐色固体状的产物(0.8 g，87%)。TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.5。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，314.0)，Rt (分钟)：4.75 面积% 95.9 (最大)，96.13(254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 10.55 (s，1H)，9.00 (d，J=4 Hz，1H)，8.07 (s，1H)，7.97 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.90 (d，J=7.92 Hz，1H)，7.56 (t，J=8.04 Hz，1H)，7.27(d，J=7.64 Hz，1H)。

8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-间-甲苯基-胺("B4")

向间-甲苯基异硫氰酸酯(0.25 g，1.6 mmol)在二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1:1) (15.0 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(0.8 g，2.3 mmol)、二异丙基乙基胺(1.07 g，8.3 mmol)，搅拌1小时。加入EDCI (0.64 g，3.3 mol)，在室温下搅拌6小时。浓缩反应混合物至干，将残余物溶解于水中。将其搅拌5分钟，过滤沉淀的固体，水洗，干燥，以得到浅褐色固体状的产物(0.35 g，80.8%)。TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.5。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，260.0)，Rt (分钟)：4.13 面积% 97.4 (最大)，97.11(254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 10.07 (s，1H)，8.94 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.92 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.50 (d，J=8.12 Hz，1H)，7.43 (s，1H)，7.19 (t，J=7.76 Hz，1H)，6.75 (d，J=7.4 Hz，1H)，2.29 (s，3H)。

8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-苯基-胺("B5")

向苯基异硫氰酸酯(0.25 g，1.8 mmol)在二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺(1:1) (15.0 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(0.89 g，2.5 mmol)、二异丙基乙基胺(1.19 g，9.2 mmol)，搅拌1小时。加入EDCI (0.7 g，3.7 mmol)，在室温下搅拌6小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于水中，搅拌5分钟，过滤沉淀的固体，水洗，干燥，以得到浅褐色固体状的产物(0.4 g，88%)。TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.5。LCMS (方法A)：质量实测值(M+H⁺，246.0)，Rt (分钟)：3.74 面积% 98.2 (最大)，98.39 (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ 10.14 (s，1H)，8.95 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.93 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.67 (m，2H)，7.32 (t，J =8.63 Hz，2H)，6.94 (t，J=7.32 Hz，1H)。

采用以上程序制备实施例"B6"-"B9"。

[3-氯-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基硫烷基)-苯基]-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺("B6")

浅褐色固体，49.5 mg (收率：73.2%)，HPLC纯度：94.1%，Rt：2.9分钟，观察到[M+H]⁺ 392.0；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ 10.45 (s，1H)，8.97 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.95 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.91 (d，J=2.2 Hz，1H)，7.46 (m，2H)，7.10 (s，1H)，6.70 (d，J=8.72 Hz，1H)，3.62 (s，3H)。

6-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-2,2-二氟-4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮("B7")

米色固体，16.9 mg (收率：72.2%)，HPLC纯度：97%，Rt：3.85分钟，观察到[M+H]⁺ 353.0；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ 11.99 (br s，1H)，10.31 (s，1H)，8.88 (d，J=4.12 Hz，1H)，7.94 (d，J=4.08 Hz，1H)，7.49 (s，1H)，7.41 (d，J=8.84 Hz，1H)，7.26 (m，1H)。

6-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-2,2-二甲基-4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-3-酮("B8")

浅褐色固体，25.8 mg (收率：71.4%)，HPLC纯度：98.6%，Rt：3.47分钟，观察到[M+H]⁺ 346.0；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ 11.00 (br s，1H)，10.29 (s，1H)，8.95 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.95 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.64 (d，J=8.68 Hz，1H)，7.41 (d，J=8.64 Hz，1H)，1.39 (s，6H)。

(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺("B9")

浅褐色固体，43.5 mg (收率：75.3%)，HPLC纯度：97.2%，Rt：4.28分钟，观察到[M+H]⁺ 376.0；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ 10.37 (s，1H)，8.96 (d，J=4.28 Hz，1H)，8.13 (s，1H)，7.97 (m，2H)，7.68 (d，J=8.72 Hz，1H)，7.26 (m，6H)，5.56 (s，2H)。

4-(4-异硫氰酸根合-苯基)-吗啉

在0℃下，在N₂下，向4-吗啉代-4-基-苯基胺(2 g，11.22 mmol)和二异丙基乙基胺(2.89 g，22.42 mmol)在无水二氯甲烷(100 ml)中的搅动的溶液中逐滴加入二氯甲烷中的硫光气(1.54 g，13.46 mmol)，搅拌30分钟。反应混合物用水(100 ml)猝灭，将各层分离，有机层用水(50 ml×2)洗涤，经无水MgSO₄干燥，以得到褐色结晶固体状的产物(2.4 g，97.56%)；TLC：石油醚/乙酸乙酯(6/4)

R_f—0.5；

¹H-NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.29 (d，J=6.92 Hz，2H)，6.95 (d，J=6.96 Hz，2H)，3.71 (t，J=4.96 Hz，4H)，3.14 (t，J=4.84 Hz，4H)。

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺

向4-吗啉代苯基异硫氰酸酯(2 g，8.99 mmol)在无水二氯甲烷(200 ml)中的溶液中加入1,2-二氨基-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(3.86 g，11.24 mmol)、二异丙基乙基胺(5.81 g，44.99 mmol)和EDCI (3.44 g，17.98 mmol)，搅拌6小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于水(100 ml)中，研磨，过滤，水洗(50 ml×2)，干燥，粗固体通过使用(60-120)目的二氧化硅柱纯化，以得到浅褐色固体状的标题产物(2.5g，84.17%)；TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.3；HPLC纯度(方法A) 98%；Rt (分钟)：2.21；LCMS：质量实测值(M+，331.0)，Rt (分钟)：2.08；

¹H-NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.85 (s，1H)，8.90 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.90 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.52 (dd，J=7.04，2.00 Hz，2H)，6.93 (d，J=9.04 Hz，2H)，3.73 (t，J=4.92 Hz，4H)，3.02 (t，J=4.80 Hz，4H)。

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-胺

向2-甲氧基吡啶基-5-异硫氰酸酯(3 g，18.07 mmol)在无水二氯甲烷(200 ml)中的溶液中加入1,2-二氨基-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(7.77 g，22.5 mmol)、二异丙基乙基胺(11.67 g，90.35 mmol)和EDCI (3.44 g，36.14 mmol)，搅拌6小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于水(100 ml)中，研磨，过滤，用水(50 ml×2)和己烷中50%二乙醚洗涤，以得到浅褐色固体状的标题产物(4 g，80.32 %)；TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.3；HPLC纯度(方法A) 98%，Rt (分钟)：2.41；LCMS：质量实测值(M+，277.0)，Rt (分钟)：2.36)；

¹H-NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.02 (s，1H)，8.91 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.46 (d，J=2.72 Hz，1H)，7.97 (dd，J=8.88，2.84 Hz，1H)，7.93 (d，J=4.32 Hz，1H)，6.83 (d，J=8.88 Hz，1H)，3.81 (s，3H)。

5-异硫氰酸根合-1,3-二氢-吲哚-2-酮

在0℃下，在N₂下，向5-氨基-1,3-二氢-吲哚-2-酮盐酸盐(2 g，10.83 mmol)和二异丙基乙基胺(4.19 g，32.49 mmol)在无水二氯甲烷(100 ml)中的搅动的溶液中逐滴加入二氯甲烷中的硫光气(1.49 g，10.83 mmol)，搅拌30分钟。反应混合物用水(100 ml)猝灭，将各层分离，有机层用水(50 ml×2)洗涤，经无水MgSO₄干燥，以得到褐色结晶固体状的产物(2.03 g，99.02 %)；TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5) R_f—0.5；

¹H-NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.60 (s，1H)，7.31 (s，1H)，7.25 (d，J=7.88 Hz，1H)，6.82 (d，J=8.24 Hz，1H)，3.50 (s，2H)。

5-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-1,3-二氢-吲哚-2-酮

向5-异硫氰酸根合-1,3-二氢-吲哚-2-酮(2.3 g，12.09 mmol)在无水二氯甲烷(200ml)中的溶液中加入1,2-二氨基-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(5.21 g，15.12 mmol)、二异丙基乙基胺(7.81 g，60.45 mmol)和EDCI (4.63 g，24.18 mmol)，搅拌6小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于水(100 ml)中，研磨，过滤，粗固体通过使用(60-120)目的二氧化硅柱纯化，以得到黄色固体状的标题产物(2.0 g，55%)；TLC：氯仿/甲醇(9.5/0.5)

R_f—0.3；HPLC纯度(方法A)：97%，Rt (分钟)：2.40；LCMS：质量实测值(M+，301.0)，Rt (分钟)：2.36；

¹H-NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.24 (s，1H)，9.95 (s，1H)，8.92 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.91 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.56 (s，1H)，7.44 (dd，J=8.38，2.20 Hz，1H)，6.77 (d，J=8.36 Hz，1H)，3.49 (s，2H)。

MC825_骨架

步骤1-IS081 15-029

O-(2,2-二甲基丙酰基)-N-[(均三甲苯基磺酰基)氧基]羟基胺

程序：向2-三甲基苯(mestylene)磺酰氯(5 g，22.8 mmol)在无水四氢呋喃(75 mL)中的溶液中加入N-boc-羟基胺(3.34 g，25.1 mmol)，冷却至0℃。经10分钟，缓慢加入三乙胺(3.8 mL，27.4 mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于二氯甲烷(75 mL)中，用水(2×75mL)、NaHCO₃水溶液 (10%，75 mL)洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：96 % (7 g，米色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 11.16 (s，1H)，7.12 (s，2H)，2.49 (s，6H)，2.28 (s，3H)，1.23 (s，9H)。

步骤2-IS081 15-031

2-[(氨基氧基)磺酰基]-1,3,5-三甲基苯

程序：在0℃下，向O-(2,2-二甲基丙酰基)-N-[(均三甲苯基磺酰基)氧基]羟基胺(10 g，31.7 mmol)的固体产物中缓慢加入三氟乙酸(60 mL)。将反应混合物搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，缓慢加入冷水，搅拌15分钟。过滤沉淀的固体，水洗若干次，直至pH变为中性。将固体干燥，立即用于下一步。收率：73 % (~5 g，白色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm ] 6.73 (s，2H)，2.48 (s，6H)，2.15 (s，3H)。

步骤3-IS081 15-032

1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐

程序：在室温下，向2-氨基-3-氯吡嗪(3 g，23.1 mmol)在无水二氯甲烷(50 mL)中的溶液中加入2-[(氨基氧基)磺酰基]-1,3,5-三甲基苯(7.5 g，34.7 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。浓缩反应混合物至最小量，加入冷二乙醚(50 mL)，搅拌15分钟。过滤沉淀的固体，用冷二乙醚洗涤，以得到产物。收率：88 % (7 g，米色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.07 (br s，2H)，8.11 (d，J= 4.3 Hz，1H)，7.78 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.28 (s，1H)，6.72 (s，1H)，2.48 (s，6H)，2.15 (s，3H)。

MC825_SC01

步骤1-FS08115-048

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲氧基-苯基)-胺

程序：向4-甲氧基苯基异硫氰酸酯(0.6 g，3.63 mmol)在无水二氯甲烷(30 mL)中的溶液中加入1,2-二氨基-3-氯-吡嗪鎓均三甲苯磺酸盐(1.56 g，4.54 mmol)和二异丙基乙基胺(3.15 mL，18.1 mmol)，搅拌1小时。加入EDC.HCl (1.38 g，7.26 mmol)，搅拌6小时。反应完成后(通过TLC监测)，浓缩反应混合物，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱)。收率：80 % (800 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 276.0 (M+H)，RT. 3.4分钟，99.0 % (最大)，98.7 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.90 (s，1H)，8.92 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.91 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.57 (dd，J=2.2，6.8 Hz，2H)，6.92 (dd，J=2.2，6.8 Hz，2H)，3.72 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.5分钟，99.1 % (最大)，99.2 % (254 nm)。

MC825_010

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲氧基-苯基)-胺(C1")

程序：向(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲氧基-苯基)-胺(100 mg，0.36 mmol)在乙腈/水(9:1，4 mL)中的溶液中加入联苯基硼酸(108 mg，0.54 mmol)、2-二环己基膦基-2,4,6-三异丙基联苯(8 mg，0.02 mmol)、乙酸钯(4 g，0.02 mmol)和碳酸钾(151 mg，1.1 mmol)，简短脱气，在120℃下微波辐照40分钟。反应完成后(通过TLC监测)，将反应混合物通过硅藻土(celite)，用二氯甲烷/甲醇(1:1，10 mL)洗涤，浓缩滤液，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：5% (11 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 394(M+H)，RT. 4.8分钟，95.78% (最大)。96.60 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.58 (s，1H)，8.76 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.99 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.70 (dd，J=7.88，1.08 Hz，1H)，7.64-7.55 (m，1H)，7.45 (t，J=1.44 Hz，2H)，7.44 (dd，J=6.86，2.24 Hz，2H)，7.19-7.10 (m，5H)，6.86 (d，J=2.20 Hz，2H)，3.70 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.8分钟，95.88 % (最大)，96.08 % (254 nm)。

MC825_028

(4-甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C2")

如对MC825_010所述合成

收率：12% (14 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 322 (M+H)，RT. 3.4分钟，92.08% (最大)。94.91% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.71 (s，1H)，8.68 (d，J=4.28 Hz，1H)，8.64 (s，1H)，8.37 (s，1H)，8.02 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.63 (d，J=9.04 Hz，2H)，6.93 (d，J=9.04 Hz，2H)，3.98 (s，3H)，3.73 (s，3H)，HPLC：(方法A) RT 3.3分钟，94.64 % (最大)，94.3 % (254 nm)。

MC825_SC02

步骤1-FS08115-049

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2,5-二甲氧基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：24 % (29 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 306.0 (M+H)，RT. 3.9分钟，98.3 % (最大)，98.8 % (254 nm)。

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.97 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.71 (s，1H)，7.95 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.81 (d，J=2.9 Hz，1H)，6.96 (d，J=8.8 Hz，1H)，6.55 (dd，J=2.9，8.8 Hz，1H)，3.80 (s，3H)，3.73 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.0分钟，98.7 % (最大)，98.5 % (254 nm)。

MC825_011

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2,5-二甲氧基-苯基)-胺("C3")

如对MC825_010所述合成

收率：7% (15.3 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 424.3(M+H)，RT. 5.1分钟，97.80% (最大)。97.73% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.82 (d，J=4.36 Hz，1H)，8.31 (s，1H)，8.03 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.77 (d，J=3.00 Hz，1H)，7.72 (dd，J=7.20，2.36 Hz，1H)，7.64-7.60 (m，1H)，7.55-7.51 (m，2H)，7.17-7.07 (m，5H)，6.90 (d，J=8.84 Hz，1H)，6.48 (dd，J=8.80，3.00 Hz，1H)，3.76 (s，3H)，3.71 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 5.2分钟，95.63 % (最大)，96.94 % (254 nm)。

MC825_027

(2,5-二甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并 [1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C4")

如对MC825_010所述合成

收率：6.5 % (11 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 352.3 (M+H)，RT. 3.7分钟，96.47% (最大)。96.43 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.74 (t，J=8.16 Hz，2H)，8.36 (d，J=11.64 Hz，2H)，8.07 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.96 (d，J=2.96 Hz，1H)，6.97 (d，J=8.84 Hz，1H)，6.52 (dd，J=8.82，3.00 Hz，1H)，3.97 (s，3H)，3.84 (s，3H)，3.77 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.7分钟，96.24 % (最大)，96.92 % (254 nm)。

MC825_SC03

步骤1-FS08115-050

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3,4-二甲氧基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：29 % (74 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 306.0 (M+H)，RT. 3.1分钟，98.3 % (最大)，99.1 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.89 (s，1H)，8.92 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.92 (d，J=6.1 Hz，1H)，7.32 (d，J=2.5 Hz，1H)，7.22 (dd，J=8.60，2.50 Hz，1H)，6.93 (d，J=8.7 Hz，1H)，3.77 (s，3H)，3.72 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.2分钟，99.6 % (最大)，99.8 % (254 nm)。

MC825_007

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3,4-二甲氧基-苯基)-胺("C5")

如对MC825_010所述合成

收率：16.7% (34.9 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 424.3 (M+H)，RT. 4.5分钟，98.94% (最大)。99.92% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.61 (s，1H)，8.76 (d，J=3.98 Hz，1H)，7.97 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.73 (t，J=1.04 Hz，1H)，7.59-7.63 (m，1H)，7.52 (dd，J=7.48，1.36 Hz，2H)，7.27 (d，J=2.48 Hz，1H)，7.19 (t，J=1.72 Hz，3H)，7.15-7.11 (m，3H)，6.89-6.86 (m，1H)，3.71 (s，3H)，3.69 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.6分钟，99.45 % (最大)，99.75 % (254 nm)。

MC825_031

(3,4-二甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并 [1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C6")

如对MC825_010所述合成

收率：55% (95 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 352.3 (M+H)，RT. 3.0分钟，98.78% (最大)。99.06% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.72 (s，1H)，8.68 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.65 (s，1H)，8.39 (d，J=0.44 Hz，1H)，8.03 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.52 (d，J=2.48 Hz，1H)，7.20 (dd，J=8.68，2.52 Hz，1H)，6.93 (d，J=8.76 Hz，1H)，3.97 (s，3H)，3.91 (s，3H)，3.72 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.0分钟，97.52 % (最大)，98.55 % (254 nm)。

MC825_SC04

步骤1-FS08115-051

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-甲氧基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：34 % (145 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 276.0 (M+H)，RT. 3.6分钟，98.1 % (最大)，98.4 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.14 (s，1H)，8.96 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.94 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.36-7.35 (t，J=1.2 Hz，1H)，7.21 (dd，J=4.0，0.9 Hz，2H)，6.55-6.52 (m，1H)，3.75 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.8分钟，99.1 % (最大)，99.2 % (254 nm)。

MC825_008

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-甲氧基-苯基)-胺("C7")

如对MC825_010所述合成

收率：43% (123 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 394(M+H)，RT. 4.9分钟，98.25% (最大)。98.97 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.85 (s，1H)，8.82 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.02 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.74 (d，J=7.52 Hz，1H)，7.63 (t，J=6.48 Hz，1H)，7.55 (t，J=7.40 Hz，2H)，7.30 (s，1H)，7.20-7.09 (m，7H)，6.50 (dd，J=7.92，2.16 Hz，1H)，3.74 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 5.0分钟，99.02% (最大)，99.20 % (254 nm)。

MC825_030

(3-甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C8")

如对MC825_010所述合成

收率：35% (69.5 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 322.3 (M+H)，RT. 3.5分钟，95.35% (最大)。96.72% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.96 (s，1H)，8.74 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.67 (s，1H)，8.41 (s，1H)，8.07 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.50 (d，J=2.04 Hz，1H)，7.24 (d，J=7.84 Hz，2H)，6.54 (d，J=7.28 Hz，1H)，3.99 (s，3H)，3.77 (s，3H)。；HPLC：(方法A) RT 3.6分钟，98.12 % (最大)，98.34 % (254 nm)。

MC825_SC05

步骤1-IS081 15-044

1-异硫氰酸根合-2,3-二甲氧基-苯

程序：在0℃下，向2,3-二甲氧基-苯基胺(1 g，6.52 mmol)在无水二氯甲烷(25 mL)中的溶液中加入二异丙基乙基胺(2.3 mL，13 mmol)，搅拌5分钟。加入硫光气(0.55 mL，7.2 mmol)，在0℃下搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，分离各层，用水(3×25mL)、盐水洗涤有机层，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：55 % (0.7 g，无色胶)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.09-7.06 (m，2H)，6.89-6.86 (m，1H)，3.82 (s，3H)，3.81 (s，3H)。

步骤2-FS081 15-045

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2,3-二甲氧基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：43 % (378 mg，白色固体)。LCMS：(方法A) 306.0 (M+H)，RT. 3.8分钟，98.7 % (最大)，99.5 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.03 (s，1H)，8.96 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.96 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.79 (dd，J=8.3，1.2 Hz，1H)，7.07 (t，J=8.2 Hz，1H)，6.74 (dd，J=8.3，1.2 Hz，1H)，3.83 (s，3H)，3.77 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.9分钟，99.7 % (最大)，99.7 % (254 nm)。

MC825_012

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2,3-二甲氧基-苯基)-胺("C9")

如对MC825_010所述合成

收率：15% (42 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 424.3(M+H)，RT. 5.0分钟，94.50% (最大)。96.31% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.80 (d，J=4.36 Hz，1H)，8.58 (s，1H)，8.04 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.71 (d，J=1.64 Hz，1H)，7.69-7.60 (m，2H)，7.55-7.51 (m，2H)，7.18-7.10 (m，5H)，7.08-7.02 (m，1H)，6.67 (dd，J=8.32，1.20 Hz，1H)，3.79 (s，3H)，3.71 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 5.1分钟，95.12% (最大)，95.56 % (254 nm)。

MC825_032

(2,3-二甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并 [1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C10")

如对MC825_010所述合成

收率：24% (56 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 352.3 (M+H)，RT. 3.6分钟，94.27% (最大)。94.56% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.71 (d，J=4.40 Hz，2H)，8.61 (s，1H)，8.38 (d，J=0.52 Hz，1H)，8.06 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.90 (dd，J=8.32，1.28 Hz，1H)，7.09 (t，J=8.32 Hz，1H)，6.72 (dd，J=8.36，1.28 Hz，1H)，3.98 (s，3H)，3.82 (s，3H)，3.80 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.6分钟，94.40 % (最大)，94.73 % (254 nm)。

MC825_SC06

步骤1-IS08027-086

6-硝基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑

程序：在0℃下，向氢化钠(60%) (1.46 g，36.7mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(75 mL)中的悬浮液中加入6-硝基吲唑(5 g，30.6 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(25 mL)中的溶液，搅拌1小时。加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(5.4 mL，30.6 mmol)，在室温下搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，浓缩，将残余物溶解于乙酸乙酯中，用水(2×75mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)，以得到区域异构体的混合物。收率：73 % (6.6 g，红褐色油)。LCMS：(方法A) 294.0 (M+H)，RT. 5.5，5.6分钟，46.4，53.3 % (最大)。

步骤2-IS08027-096

1-(2-三甲基加硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-6-基胺

程序：向6-硝基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑(6.6 g，22.5 mmol)在无水酒精(100 mL)中的溶液中加入Pd/C (10%，0.66 g)，在1 Kg/cm³的氢压力下搅拌。反应混合物通过硅藻土过滤，用无水酒精(100 mL)洗涤。浓缩滤液，以得到产物。收率：94 % (5.6 g，红褐色油)。LCMS：(方法A) 294.0 (M+H)，RT. 3.4，3.5分钟，21.9，67.2 % (最大)，15.6，64.5 % (254 nm)。

步骤3-IS08027-097

6-异硫氰酸根合-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑

程序：在0℃下，向1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-6-基胺(5.5 g，20.8 mmol)在无水二氯甲烷(75 mL)中的溶液中加入二异丙基乙基胺(7.2 mL，41.8 mmol)，搅拌5分钟。加入硫光气(1.82 mL，23 mmol)，在0℃下搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，分离各层，用水(3×75mL)、盐水洗涤有机层，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：98 % (6.3 g，红褐色油)。LCMS：(方法A) 416.0 (M+H)，RT. 4.8，5.1分钟，13.3，84 % (最大)，15.3，83.4 % (254 nm)。

步骤4-IS08027-098

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-6-基]-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：58 % (5 g，黄色固体)。LCMS：(方法A) 416.0 (M+H)，RT. 4.8，5.1分钟，13.3，84.0 % (最大)，15.3，83.4 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.43 (s，1H)，8.96 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.17-8.16 (m，1H)，8.00-7.95 (m，2H)，7.68-7.70 (m，1H)，7.37-7.34 (m，1H)，5.67 (s，2H)，3.55 (t，J=8.0 Hz，2H)，0.83 (t，J=7.7 Hz，2H)，-0.12 (s，9H)。

MC825_016

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1H-吲唑-6-基)-胺("C11")

如对MC825_010所述合成，在用THF中的TBAF使SEM基团脱保护后，得到最终的化合物。收率：8% (12.7 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 404.3 (M+H)，RT. 3.9分钟，94.83% (最大)。94.44% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆：δ [ppm] 12.84 (s，1H)，10.20 (s，1H)，8.81 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.96 (s，1H)，7.90 (s，1H)，7.74 (t，J=1.08 Hz，1H)，7.64-7.54 (m，5H)，7.15-7.11 (m，6H)。HPLC：(方法A) RT 4.0分钟，94.63 % (最大)，94.03 % (254 nm)。

MC825_037

(1H-吲唑-6-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C12")

如对MC825_010所述合成，在用THF中的TBAF使SEM基团脱保护后，得到最终的化合物。收率：12% (17 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 332.3 (M+H)，RT. 2.7分钟，96.20% (最大)。97.96% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆：δ [ppm] 12.86 (s，1H)，10.13 (s，1H)，8.73 (d，J=4.28 Hz，1H)，8.68 (s，1H)，8.41 (d，J=0.36 Hz，1H)，8.17 (s，1H)，8.08 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.93 (s，1H)，7.65 (d，J=8.68 Hz，1H)，7.27 (dd，J=8.76，1.80 Hz，1H)，4.01 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.6分钟，97.75 % (最大)，98.73 % (254 nm)。

MC825_SC07

步骤1-IS08149-040

3-异硫氰酸根合-苯磺酰胺

使用如对MC825_SC05_步骤1所述的程序合成。

收率：80% (1 g，褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.80-7.76 (m，2H)，7.65-7.64 (m，2H)，7.51 (br s，2H)。

步骤2-FS08115-047

3-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-苯磺酰胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：20% (14 mg，浅橙色固体)。LCMS：(方法A) 325.0 (M+H)，RT. 2.5分钟，95.1 % (最大)，93.3 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.50 (s，1H)，8.96 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.12 (t，J=1.9 Hz，1H)，7.97 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.93-7.90 (m，1H)，7.53 (t，J=8.0 Hz，1H)，7.42-7.39 (m，1H)，7.36 (br s，2H)。HPLC：(方法A) RT 2.5分钟，95.9 % (最大)，93.9 % (254 nm)。

MC825_020

3-(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-苯磺酰胺("C13")

如对MC825_010所述合成

收率：11% (22.5 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 443 (M+H)，RT. 3.9分钟，96.2% (最大)。96.5% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆：δ [ppm] 10.22 (s，1H)，8.81 (d，J=4.4 Hz，1H)，8.06 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.01 (t，J=1.8 Hz，1H)，7.81 (d，J=1.4 Hz，1H)，7.79 (d，J=1.4 Hz，1H)，7.74 (t，J=8.1 Hz，1H)，7.65-7.61 (m，2H)，7.56-7.46 (m，1H)，7.37-7.31 (m，3H)，7.17-7.11 (m，5H)。HPLC：(方法A) RT 4.0分钟，96.7 % (最大)，95.8 % (254 nm)。

MC825_033

3-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯磺酰胺("C14")

如对MC825_010所述合成

收率：2.6% (9 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 371 (M+H)，RT. 2.5分钟，97.0% (最大)。96.2% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.36 (s，1H)，8.80 (s，1H)，8.72 (dd，J=4.6，4.3 Hz，2H)，8.34 (s，1H)，8.09 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.69 (td，J=4.46，1.4 Hz，1H)，7.52 (t，J=8.0 Hz，1H)，7.53-7.41 (m，1H)，7.42-7.36 (m，2H)，4.00 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.6分钟，97.5% (最大)，96.9 % (254 nm)。

MC825_SC08

步骤1-IS08149-041

4-异硫氰酸根合-苯磺酰胺

使用如对MC825_SC05_步骤1所述的程序合成。

收率：80% (1 g，褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.86-7.83 (m，2H)，7.62-7.59 (m，2H)，7.49 (br s，2H)。

步骤2-FS08149-042

4-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-苯磺酰胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：40% (1 g，褐色固体)。LCMS：(方法A) 325.0 (M+H)，RT. 2.3分钟，91.1 % (最大)，84.0 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.62 (s，1H)，9.00 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.99 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.76-7.81 (m，4H)，7.20 (br s，2H)。HPLC：(方法A) RT 2.5分钟，89.2 % (最大)，87.9 % (254 nm)。

MC825_001

4-(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-苯磺酰胺("C15")

如对MC825_010所述合成

收率：5.6% (11.5 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 443.0 (M+H)，RT. 3.8分钟，97.1% (最大)。97.2% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，CDCl₃)：δ [ppm] 8.32 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.09 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.88 (d，J=8.8 Hz，2H)，7.75 (d，J=7.0 Hz，1H)，7.62-7.54 (m，5H)，7.16-7.14 (m，5H)。HPLC：(方法A) RT 3.9分钟，95.5 % (最大)，94 % (254 nm)。

MC825_021

4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯磺酰胺("C16")

如对MC825_010所述合成

收率：3% (9 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 371.0 (M+H)，RT. 2.5分钟，95.9% (最大)。92.6% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.43 (s，1H)，8.76 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.68 (s，1H)，8.39 (s，1H)，8.10 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.86 (d，J=9.0 Hz，2H)，7.79 (d，J=8.9 Hz，2H)，7.18 (s，2H)，3.99 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.5分钟，97.2% (最大)，92.9% (254 nm)。

MC825_SC09

步骤1-IS08027-080

4-(3-异硫氰酸根合-苯基)-吗啉

使用如对MC825_SC05_步骤1所述的程序合成。

收率：73% (0.9 g，褐色油)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.26 (t，J=7.9 Hz，1H)，6.97-6.94 (m，2H)，6.83-6.80 (m，1H)，3.71 (t，J=4.7 Hz，4H)，3.13 (t，J=4.8 Hz，4H)。

步骤2-FS08115-053

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-吗啉-4-基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：37% (500 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 331.0 (M+H)，RT. 2.5分钟，99.2 % (最大)，99.5 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.00 (s，1H)，8.95 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.93 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.26 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.20-7.14 (m，2H)，6.55-6.58 (m，1H)，3.76 (t，J=4.8 Hz，4H)，3.10 (t，J=4.7 Hz，4H)。HPLC：(方法A) RT 2.6分钟，99.7 % (最大)，99.7 % (254 nm)。

MC825_014

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-吗啉-4-基-苯基)-胺("C17")

如对MC825_010所述合成

收率：25% (68 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 449.3(M+H)，RT. 4.0分钟，96.0% (最大)。97.3% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.86 (s，1H)，8.78 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.99 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.73 (d，J=7.8 Hz，1H)，7.65-7.60 (m，1H)，7.55-7.51 (m，2H)，7.33 (s，1H)，7.18-7.08 (m，6H)，6.99-7.01 (m，1H)，6.49 (dd，J=2.0，8.2 Hz，1H)，3.73 (t，J=4.9 Hz，4H)，3.04 (t，J=4.7 Hz，4H)。HPLC：(方法A) RT 4.0分钟，99.1 % (最大)，99.3 % (254 nm)。

MC825_041

[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(3-吗啉-4-基-苯基)-胺("C18")

如对MC825_010所述合成

收率：20% (46 mg，褐色固体)。LCMS：(方法A) 377.3 (M+H)，RT. 2.6分钟，97.7% (最大)。94.8% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.80 (s，1H)，8.70 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.64 (s，1H)，8.40 (d，J=0.5 Hz，1H)，8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.46 (d，J=1.8 Hz，1H)，7.19-7.14 (m，2H)，6.57-6.54 (m，1H)，3.97 (s，3H)，3.77 (t，J=4.8 Hz，4H)，3.16-3.12 (m，4H)。HPLC：(方法A) RT 2.6分钟，98.99 % (最大)，97.49 % (254 nm)。

MC825_SC10

步骤1-IS08027-081

5-异硫氰酸根合-苯并[1,2,5]噻二唑

使用如对MC825_SC05_步骤1所述的程序合成。

收率：79% (1.5 g，浅褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.23-8.23 (m，1H)，8.16 (dd，J=0.6，9.2 Hz，1H)，7.75 (dd，J=2.0，9.2 Hz，1H)。

步骤2-FS08027-082

苯并[1,2,5]噻二唑-5-基-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：42% (1 g，褐色固体)。LCMS：(方法A) 304.0 (M+H)，RT. 3.6分钟，90.9 % (最大)，97.9 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.85 (s，1H)，9.11 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.58 (d，J=1.7 Hz，1H)，8.02-8.05 (m，2H)，7.79-7.76 (m，1H)。

MC825_013

苯并[1,2,5]噻二唑-5-基-(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺("C19")

如对MC825_010所述合成

收率：9% (18.8 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 422.0 (M+H)，RT. 4.9分钟，98.6% (最大)。99.5% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.53 (s，1H)，8.95 (d，J=4.4 Hz，1H)，8.46 (d，J=1.7 Hz，1H)，8.13 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.98 (d，J=9.4 Hz，1H)，7.76-7.74 (m，1H)，7.68-7.64 (m，2H)，7.61-7.55 (m，2H)，7.15-7.09 (m，5H)。HPLC：(方法A) RT 4.9分钟，98.4 % (最大)，98.7 % (254 nm)。

MC825_SC11

步骤1-IS08027-087

1-甲基-6-硝基-1H-吲唑

程序：在0℃下，向氢化钠(60%) (1.1 g，29.4 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(75 mL)中的悬浮液中加入6-硝基吲唑(4 g，24.5 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(25 mL)中的溶液，搅拌1小时。加入碘甲烷(1.8 mL，29.4 mmol)，在室温下搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，浓缩，将残余物溶解于乙酸乙酯中中，用水(2×75 mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。所需的区域异构体必须取出用于下一步骤。收率：46% (2 g，黄色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.59 (s，2H)，7.97-7.94 (m，1H)，7.81-7.78 (m，1H)，4.27 (s，3H)。

步骤2-IS08027-093

1-甲基-1H-吲唑-6-基胺

使用如对MC825_SC06_步骤2所述的程序合成。

收率：90% (1.5 g，白色固体)。LCMS：(方法A) 148.3 (M+H)，RT. 0.6分钟，92.7 % (最大)。

步骤3-IS08027-094

6-异硫氰酸根合-1-甲基-1H-吲唑

使用如对MC825_SC06_步骤3所述的程序合成。

收率：75% (1.5 g，褐色固体)。LCMS：(方法A) 190.0 (M+H)，RT. 3.9分钟，95.6 % (最大)。

步骤4-FS08027-095

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：31% (750 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 300.0 (M+H)，RT. 2.3分钟，98.4 % (最大)，99.6 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.17 (s，1H)，9.00 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.20 (s，1H)，8.13 (s，1H)，7.95 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.60 (d，J=8.8 Hz，1H)，7.12 (dd，J=8.9，1.8 Hz，1H)，4.09 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.4分钟，98.9 % (最大)，99.1 % (254 nm)。

MC825_018

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1-甲基-1H-吲唑-6-基)-胺("C20")

如对MC825_010所述合成

收率：22% (61 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 418.2 (M+H)，RT. 3.7分钟，98.8% (最大)。99.6% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.86 (s，1H)，8.85 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.16 (s，1H)，8.16-8.02 (m，2H)，7.72 (t，J=1.1 Hz，1H)，7.65-7.61 (m，1H)，7.57-7.53 (m，3H)，7.19-7.10 (m，5H)，7.09-7.00 (m，1H)，4.09 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.6分钟，99.7 % (最大)，99.6 % (254 nm)。

MC825_039

(1-甲基-1H-吲唑-6-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C21")

如对MC825_010所述合成

收率：72% (166 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 346.3 (M+H)，RT. 2.4分钟，99.0% (最大)。98.6% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.95 (s，1H)，8.77 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.66 (s，1H)，8.43 (s，1H)，8.18 (t，J=0.7 Hz，2H)，8.06 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.60 (d，J=9.0 Hz，1H)，7.20 (dd，J=1.8，9.0 Hz，1H)，4.10 (s，3H)，3.98 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.4分钟，96.5 % (最大)，97.9 % (254 nm)。

MC825_SC12

步骤1-IS081 15-060

1-异硫氰酸根合-4-甲磺酰基-苯

使用如对MC825_SC05_步骤1所述的程序合成。

收率：80 % (2 g，浅褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.98 (dd，J=1.9，6.7 Hz，2H)，7.67 (dd，J=1.9，6.7 Hz，2H)，3.25 (s，3H)。

步骤2-FS081 15-061

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲磺酰基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：44 % (1.8 g，黄色固体)。LCMS：(方法A) 324.0 (M+H)，RT. 2.8分钟，98.6 % (最大)，95.8 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.77 (s，1H)，9.01 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.00 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.87 (s，4H)，3.15 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.9分钟，99.0 % (最大)，98.2 % (254 nm)。

MC825_006

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲磺酰基-苯基)-胺("C22")

如对MC825_010所述合成

收率：80% (275 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 442(M+H)，RT. 4.2分钟，98.53% (最大)。96.90% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.52 (s，1H)，8.87 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.11 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.84-7.80 (m，2H)，7.73 (dd，J=7.14，1.64 Hz，3H)，7.66-7.62 (m，1H)，7.58-7.53 (m，2H)，7.18-7.10 (m，5H)，3.14 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.2分钟，99.35 % (最大)，97.70 % (254 nm)。

MC825_026

(4-甲磺酰基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C23")

如对MC825_010所述合成

收率：36.5% (104 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 370 (M+H)，RT. 2.8分钟，97.59% (最大)。97.47 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.59 (s，1H)，8.77 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.68 (s，1H)，8.39 (s，1H)，8.11 (d，J=4.36 Hz，1H)，7.96-7.87 (m，4H)，4.00 (s，3H)，3.15 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.8分钟，98.75 % (最大)，98.32 % (254 nm)。

MC825_SC13

步骤1-FS081 15-073

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2-甲氧基-苯基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：50 % (500 mg，白色固体)。LCMS：(方法A) 276.0 (M+H)，RT. 3.9分钟，96.6 % (最大)，98.4 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.93 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.69 (s，1H)，8.06 (dd，J=7.5，2.0 Hz，1H)，7.93 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.06-6.99 (m，3H)，3.85 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.0分钟，98.4 % (最大)，99.0 % (254 nm)。

MC825_009

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(2-甲氧基-苯基)-胺("C24")

如对MC825_010所述合成

收率：11% (40 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 394 (M+H)，RT. 5.1分钟，98.86% (最大)。99.35 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.79 (s，1H)，8.83 (s，1H)，8.03 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.97-7.94 (m，1H)，7.71-7.69 (m，1H)，7.62-7.60 (m，1H)，7.56-7.52 (m，2H)，7.18-7.08 (m，5H)，7.01-6.93 (m，3H)，3.81 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 5.2分钟，98.79% (最大)，98.87 % (254 nm)。

MC825_029

(2-甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C25")

如对MC825_010所述合成

收率：34% (99.9 mg，米色固体；LCMS：(方法A) 322 (M+H)，RT. 3.8分钟，98.07% (最大)。99.10% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.71 (d，J=4.20 Hz，2H)，8.36 (s，1H)，8.31 (s，1H)，8.20 (dd，J=7.38，1.80 Hz，1H)，8.05 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.06 (dd，J=7.30，2.24 Hz，1H)，7.02-6.98 (m，2H)，3.98 (s，3H)，3.89 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.9分钟，99.10 % (最大)，98.75 % (254 nm)。

MC825_SC14

步骤1-IS08149-051

1-甲基-4-硝基-1H-吡唑

程序：向4-硝基-1H-吡唑(5 g，44.2 mmol)在无水乙腈(100 mL)中的溶液中加入碳酸铯(28.8 g，88.4 mmol)和碘甲烷(4.1 mL，66.3 mmol)，加热至70℃达2小时。浓缩反应混合物，将残余物溶解于乙酸乙酯中，用水(2×75mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：53 % (3 g，黄色固体)。LCMS：(方法A) 128.0 (M+H)，RT. 1.3分钟，99.4 % (最大)，98.6 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.83 (s，1H)，8.22 (s，1H)，3.90 (s，3H)。

步骤2-IS081 15-071

1-甲基-1H-吡唑-4-基胺

使用如对MC825_SC06_步骤2所述的程序合成。

收率：100 % (2 g，白色胶状固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 6.95 (s，1H)，6.85 (s，1H)，4.34 (s，2H)，3.63 (s，3H)。

步骤3-IS081 15-072

4-异硫氰酸根合-1-甲基-1H-吡唑

使用如对MC825_SC06_步骤3所述的程序合成。

收率：70 % (2 g，褐色胶状固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.93 (s，1H)，7.42 (s，1H)，3.78 (s，3H)。

步骤4-FS081 15-074

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：40 % (500 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 250.0 (M+H)，RT. 2.0分钟，95.9 % (最大)，98.5 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.69 (s，1H)，8.85 (d，J=4.0 Hz，1H)，7.88 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.79 (s，1H)，7.45 (s，1H)，3.81 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.1分钟，95.6 % (最大)，98.7 % (254 nm)。

MC825_034

(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C26")

如对MC825_010所述合成

收率：22% (65 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 296 (M+H)，RT. 2.2分钟，98.69% (最大)。98.55% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆：δ [ppm] 9.54 (s，1H)，8.63 (t，J=4.36 Hz，2H)，8.35 (d，J=0.52 Hz，1H)，8.00 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.84 (s，1H)，7.49 (d，J=0.64 Hz，1H)，3.98 (s，3H)，3.83 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.3分钟，97.66 % (最大)，98.48 % (254 nm)。

MC825_SC15

步骤1-IS08149-057

4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯

程序：在0℃下，向1-boc-4-哌啶酮(5 g，25.1 mmol)在无水酒精(100 mL)中的溶液中加入硼氢化钠(1.4 g，37.6 mmol)，在室温下搅拌2小时。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，浓缩，将残余物溶解于乙酸乙酯(75 mL)中，用水(2×75mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：97 % (4.9 g，白色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 4.68 (d，J=4.2 Hz，1H)，3.67-3.57 (m，3H)，2.93-2.91 (m，2H)，1.69-1.64 (m，2H)，1.37 (s，9H)，1.28-1.19 (m，2H)。

步骤2-IS08149-058

4-(4-硝基-吡唑-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯

程序：在0℃下，向4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.6 g，48.6 mmol)在无水四氢呋喃(150 mL)中的溶液中加入4-硝基-1H-吡唑(3.1 g，27.4 mmol)和三苯基膦(8.6 g，32.9 mmol)，搅拌5分钟。缓慢逐滴加入二叔丁基偶氮二甲酸酯(8.2 g，35.6 mmol)，让反应混合物达到室温，搅拌16小时。反应完成后(通过TLC监测)，浓缩反应混合物，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：59 % (4.8 g，浅褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.94 (s，1H)，8.27 (s，1H)，4.48-4.42 (m，1H)，4.05-4.02 (m，2H)，2.89-2.87 (m，2H)，2.04-2.01 (m，2H)，1.85-1.75 (m，2H)，1.39 (s，9H)。

步骤3-IS081 15-078-A

4-(4-氨基-吡唑-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用如对MC825_SC06_步骤2所述的程序合成。

取得到的产物用于下一步骤。

收率：100 % (1.8 g，白色胶状固体)。

步骤4-IS081 15-078-B

4-(4-异硫氰酸根合-吡唑-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用如对MC825_SC06_步骤3所述的程序合成。

收率：70 % (1.4 g，无色胶状固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.25 (s，1H)，7.76 (s，1H)，4.35-4.29 (m，1H)，4.02-3.99 (m，2H)，2.87-2.85 (m，2H)，1.98-1.94 (m，2H)，1.73-1.67 (m，2H)，1.39 (s，9H)。

步骤5-IS081 15-079

4-[4-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-吡唑-1-基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：73 % (1 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 419.3 (M+H)，RT. 3.9分钟，99.2 % (最大)，99.6 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.69 (s，1H)，8.85 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.88 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.85 (s，1H)，7.50 (s，1H)，4.36-4.33 (m，1H)，4.05-4.01 (m，2H)，2.90-2.88 (m，2H)，1.99-1.97 (m，2H)，1.80-1.71 (m，2H)，1.41 (s，9H)。

步骤6-FS081 15-085

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-胺盐酸盐

程序：在0℃下，向4-[4-(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-吡唑-1-基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯(100 mg，0.24 mmol)在无水1,4-二氧杂环己烷(3 mL)中的溶液中加入1,4-二氧杂环己烷(3 mL)中的HCl，在室温下搅拌2小时。浓缩反应混合物，残余物用二乙醚研磨，过滤，以得到产物。收率：17 % (13 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 319.0 (M+H)，RT. 1.7分钟，96.7 % (最大)，97.8 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.77 (s，1H)，9.02 (br s，1H)，8.85 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.76 (br s，1H)，7.90 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.85 (s，1H)，7.54 (s，1H)，4.50-4.45 (m，1H)，3.40-3.36 (m，2H)，3.05-3.03 (m，2H)，2.17-2.11 (m，4H)。HPLC：(方法A) RT 1.7分钟，97.0 % (最大)，97.1 % (254 nm)。

MC825_019

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-胺)盐酸盐("C27")

如对MC825_010所述合成，如对MC825_SC15步骤6所报道的，在用二氧杂环己烷中的HCl使BOC基团脱保护后，得到最终的化合物。收率：6% (25.5 mg，红褐色固体)；LCMS：(方法A) 437 (M+H)，RT. 3.1分钟，93.70% (最大)。93.41% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.43 (s，1H)，8.95 (d，J=8.44 Hz，1H)，8.68 (dd，J=4.36，9.72 Hz，2H)，7.98 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.71 (t，J=6.72 Hz，2H)，7.64-7.60 (m，1H)，7.60-7.52 (m，2H)，7.44 (d，J=0.52 Hz，1H)，7.16 (s，3H)，4.48-4.40 (m，1H)，3.38 (t，J=5.36 Hz，2H)，3.09-3.02 (m，2H)，2.16-2.08 (m，4H)。HPLC：(方法A) RT 3.1分钟，94.47% (最大)，92.20% (254 nm)。

MC825_035

[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-胺盐酸盐("C28")

如对MC825_010所述合成，如对MC825_SC15步骤6所报道的，在用二氧杂环己烷中的HCl使BOC基团脱保护后，得到最终的化合物。收率：10% (47.8 mg，黄色固体)。LCMS：(方法A) 365.3 (M+H)，RT. 1.9分钟，94.67% (最大)。97.57% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 9.54 (s，1H)，8.63 (d，J=4.20 Hz，2H)，8.35 (d，J=7.36 Hz，1H)，8.00 (d，J=4.28 Hz，1H)，7.87 (d，J=0.80 Hz，1H)，7.53 (d，J=0.64 Hz，1H)，4.21-4.13 (m，1H)，3.97 (s，3H)，3.05-3.02 (m，2H)，2.62 (d，J=2.28 Hz，2H)，1.96 (d，J=2.32 Hz，2H)，1.80 (t，J=7.96 Hz，2H)；HPLC：(方法A) RT 1.9分钟，93.73 % (最大)，95.79 % (254 nm)。

MC825_SC16

步骤1-IS081 15-070

N2-甲基-4-硝基-苯-1,2-二胺

程序：向4-硝基-苯-1,2-二胺(5 g，32.6 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(30 mL)中的溶液中加入碘甲烷(1.6 mL，26.1 mmol)和饱和碳酸钠溶液(8 ml)，在室温下搅拌12小时。在高真空泵下浓缩反应混合物，用乙酸乙酯(75 mL)稀释，用水(2×75mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：55 % (3 g，红褐色固体)；LCMS：(方法A) 166.0 (M-H)，RT. 3.9分钟，98.5 % (最大)，98.1 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.71 (dd，J=2.4，8.5 Hz，1H)，7.54 (d，J=2.4 Hz，1H)，6.68 (d，J=8.5 Hz，1H)，3.82 (br s，3H)，2.94 (s，3H)。

步骤2-IS081 15-084

1-甲基-6-硝基-1H-苯并三唑

程序：在-5℃下，向N2-甲基-4-硝基-苯-1,2-二胺(1 g，6 mmol)在HCl水溶液(5M，20 mL)中的溶液中缓慢逐滴加入亚硝酸钠水溶液(0.82 g，11.9 mmol)，让反应混合物达到室温，搅拌12小时。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用氢氧化铵水溶液(25%)碱化至pH 8。反应混合物用乙酸乙酯(50 mL)萃取，用水(2×50mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：94 % (1 g，红褐色固体)。LCMS：(方法A) 179.0 (M+H)，RT. 2.4分钟，98.0 % (最大)，98.4 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.98 (d，J=2.0 Hz，1H)，8.28 (d，J=9.0 Hz，1H)，8.22-8.19 (m，1H)，4.45 (s，3H)。

步骤3-IS081 15-086-A

3-甲基-3H-苯并三唑-5-基胺

使用如对MC825_SC06_步骤2所述的程序合成。

取得到的产物用于下一步骤。

收率：96 % (0.8 g，红褐色固体)。

步骤4-IS081 15-086-B

6-异硫氰酸根合-1-甲基-1H-苯并三唑

使用如对MC825_SC06_步骤3所述的程序合成。

收率：70 % (0.7 g，褐色固体)。LCMS：(方法A) 191.0 (M+H)，RT. 3.7分钟，98.6 % (最大)，98.1 % (220 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.10-8.07 (m，2H)，7.42-7.40 (m，1H)，4.28 (s，3H)。

步骤5-FS081 15-087

(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基)-胺

使用如对MC825_SC01_步骤1所述的程序合成。

收率：47 % (0.5 g，褐色固体)。LCMS：(方法A) 301.0 (M+H)，RT. 2.7分钟，97.2 % (最大)，97.1 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.62 (s，1H)，9.01 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.16 (d，J=2.1 Hz，1H)，7.99 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.95 (d，J=8.9 Hz，1H)，7.51 (dd，J=9.0，1.9 Hz，1H)，4.24 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.9分钟，96.8 % (最大)，96.5 % (254 nm)。

MC825_015

8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基)-胺("C29")

如对MC825_010所述合成

收率：26% (55 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 419 (M+H)，RT. 4.1分钟，98.86% (最大)。99.35 % (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.33 (s，1H)，8.86 (d，J=4.32 Hz，1H)，8.08 (dd，J=5.98，4.36 Hz，2H)，7.90 (t，J=0.48 Hz，1H)，7.79 (d，J=1.36 Hz，1H)，7.77-7.77 (m，1H)，7.67-7.54 (m，2H)，7.40 (dd，J=9.04，1.96 Hz，1H)，7.18 (t，J=1.56 Hz，5H)，4.23 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 4.1分钟，98.48% (最大)，99.00 % (254 nm)。

MC825_036

(3-甲基-3H-苯并三唑-5-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C30")

如对MC825_010所述合成

收率：52% (90 mg，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 347 (M+H)，RT. 4.0分钟，95.97% (最大) 94.27% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.44 (s，1H)，8.77 (t，J=4.52 Hz，2H)，8.40 (d，J=2.72 Hz，2H)，8.11 (d，J=4.40 Hz，1H)，7.95 (d，J=8.96 Hz，1H)，7.49 (dd，J=1.36，9.02 Hz，1H)，4.30 (s，3H)，4.01 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.7分钟，94.15 % (最大)，93.93 % (254 nm)。

MC825_005

步骤1-IS08149-083

3-联苯-2-基-吡嗪-2-基胺

程序：向2-氨基-3-氯吡嗪(1.0 g，7.7 mmol)在1,4-二氧杂环己烷/水(9:1，20 mL)中的溶液中加入联苯基硼酸(2.3 g，11.6 mmol)、2-二环己基膦基-2,4,6-三异丙基联苯(0.22 g，0.46 mmol)、乙酸钯(0.05 g，0.23 mmol)和碳酸钾(3.2 g，23.1 mmol)，简短脱气，在密封的管中在90℃下加热6小时。反应完成后(通过TLC监测)，将反应混合物通过硅藻土，用二氯甲烷/甲醇(1:1，50 mL)洗涤，浓缩滤液，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：52 % (1 g，浅褐色固体)；LCMS：(方法A) 248.3 (M+H)，RT. 2.7分钟，91.2 % (最大)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.81 (d，J=2.7 Hz，1H)，7.70 (d，J=2.7 Hz，1H)，7.56-7.45 (m，3H)，7.38-7.36 (m，1H)，7.24-7.19 (m，3H)，7.15-7.13 (m，2H)，5.61 (br s，2H)。

步骤2-IS08149-083

8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺

程序：向3-联苯-2-基-吡嗪-2-基胺(1 g，4.04 mmol)在无水四氢呋喃(25 mL)中的溶液中加入乙氧基羰基异硫氰酸酯(0.63 g，4.85 mmol)，加热至50℃达12小时。浓缩反应混合物，悬浮于乙醇/甲醇(1:1，50 mL)的混合物中，加入羟胺盐酸盐(1.8 g，26.4 mmol)和二异丙基乙基胺(2.7 mL，15.8 mmol)，加热至80℃达3小时。反应完成后(通过TLC监测)，浓缩反应混合物，将残余物溶解于水中，用二氯甲烷(30 mL)萃取，用水(2×30mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：72 % (0.8 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 288.3 (M+H)，RT. 3.2分钟，95.9 % (最大)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.54 (s，1H)，7.82 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.66-7.63 (m，1H)，7.60-7.55 (m，1H)，7.51-7.47 (m，2H)，7.19-7.13 (m，3H)，7.05-7.03 (m，2H)，6.34 (br s，2H)。

步骤3-IS08149-085

(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-(4-甲烷亚磺酰基-苯基)-胺("C31")

程序：向8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺(150 mg，0.52 mmol)在无水叔丁醇(5 mL)中的溶液中加入1-溴-4-甲烷亚磺酰基-苯(303 mg，0.0.78 mmol)、2-二环己基膦基-2’-(N,N-二甲基氨基)联苯(20 mg，0.05mmol)、三(二苯叉基丙酮)合二钯(0) (20 mg，0.02 mmol)和六甲基二甲硅烷基酰胺钠(1M/THF) (0.8 mL，0.78 mmol)，简短脱气，在150℃下微波辐照达1小时。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷/甲醇(1:1，10 mL)洗涤，浓缩滤液，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：14 % (32 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 426.0 (M+H)，RT. 3.8分钟，93.0 % (最大)，93.3 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.21 (s，1H)，8.84 (d，J=4.4 Hz，1H)，8.07 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.73-7.69 (m，3H)，7.66-7.83 (m，5H)，7.18-7.70 (m，5H)，2.66 (s，3H)。

HPLC：(方法A) RT 3.7分钟，95.38 % (最大)，95.0 % (254 nm)。

MC825_025

步骤1-IS08149-084

3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,2-二氢-吡嗪-2-基胺

使用如对MC825_005_步骤1所述的程序合成。

收率：68 % (1.1 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法B) 176.0 (M+H)，RT. 2.4分钟，93.6 % (最大)，94.9 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.25 (s，1H)，7.93 (s，1H)，7.82 (d，J=2.6 Hz，1H)，7.79 (d，J=2.6 Hz，1H)，6.05 (br s，2H)，3.88 (s，3H)。

步骤2-IS08149-086

8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺

使用如对MC825_005_步骤2所述的程序合成。

收率：44 % (0.6 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 216.0 (M+H)，RT. 1.5分钟，99.9 % (最大)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.59 (s，1H)，8.49 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.29 (s，1H)，7.91 (d，J=4.3 Hz，1H)，6.45 (br s，2H)，3.95 (s，3H)。

步骤-3

(4-甲烷亚磺酰基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C32")

使用如对MC825_005_步骤3所述的程序合成。

收率：14 % (47 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 354 (M+H)，RT. 2.52分钟，99.07% (最大)。99.04 %(254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.34 (s，1H)，8.76 (d，J=4.28 Hz，1H)，8.67 (s，1H)，8.39 (s，1H)，8.09 (d，J=4.32 Hz，1H)，7.92 (d，J=8.76 Hz，2H)，7.67 (d，J=8.72 Hz，2H)，3.99 (s，3H)，2.72 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 2.4分钟，99.57 % (最大)，99.32 % (254 nm)。

MC825_022

步骤1-IS0839 1-054

6-溴-2-氯甲基-1H-苯并咪唑

程序：向4-溴苯-1,2-二胺(3 g，16 mmol)在无水酒精(50 mL)中的溶液中加入乙基-2-氯乙酰亚胺化物.盐酸盐(5 g，32 mmol)，在室温下搅拌12小时。反应完成后(通过TLC监测)，真空浓缩反应混合物。残余物溶解于二氯甲烷(60 mL)中，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：30 % (1.2 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法A) 246.0 (M+H)，RT. 2.3分钟，97.4 % (最大)，97.5 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.76 (s，1H)，7.52 (d，J=8.5 Hz，1H)，7.34 (dd，J=8.5,1.8 Hz，1H)，4.91 (s，2H)。

步骤2-IS0839 1-055

(6-溴-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-二甲基-胺

程序：向6-溴-2-氯甲基-1H-苯并咪唑(1.2 g，4.8 mmol)在无水四氢呋喃(20 mL)中的溶液中加入二甲基胺(40 %，5 mL)，在密封的管中在室温下搅拌2小时。反应完成后(通过TLC监测)，真空浓缩反应混合物。残余物溶解于二氯甲烷(30 mL)中，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到产物。收率：69 % (0.85 g，褐色固体)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 13.41 (br s，1H)，7.95 (s，1H)，7.68 (d，J=8.3 Hz，1H)，7.44 (dd，J=1.5，8.6 Hz，1H)，5.00 (s，2H)，3.26 (s，6H)。

步骤3-IS0839 1-056

[6-溴-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-2-基甲基]-二甲基-胺

程序：在0℃下，向氢化钠(60%) (0.15 g，3.8 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(15 mL)中的悬浮液中加入(6-溴-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-二甲基-胺(0.8 g，3.17 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(10 mL)中的溶液，搅拌1小时。加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(5.4 mL，30.6 mmol)，在室温下搅拌30分钟。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物用冷水猝灭，在高真空下浓缩，将残余物溶解于乙酸乙酯中，用水(2×25 mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)，以得到区域异构体的混合物。收率：49 % (0.6 g，褐色胶状固体)。LCMS：(方法A) 384.0 (M+H)，RT. 4.5分钟，85.3 % (最大)，88.7 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 7.86-7.80 (m，1H)，7.60-7.55 (m，1H)，7.35-7.32 (m，1H)，5.69 (s，2H)，3.69-3.68 (m，2H)，3.53-3.48 (m，2H)，2.20 (s，6H)，0.84-0.80 (m，2H)，-0.10 (s，9H)。

步骤4-IS08555-005

[2-二甲基氨基甲基-3-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-3H-苯并咪唑-5-基]-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺

程序：向8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺(50 mg，0.23 mmol)在无水叔丁醇(3 mL)中的溶液中加入[6-溴-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-2-基甲基]-二甲基-胺(130 mg，0.35 mmol)、2-二环己基膦基-2’-(N,N-二甲基氨基)联苯(9 mg，0.02mmol)、三(二苯叉基丙酮)合二钯(0) (9 mg，0.09 mmol)和六甲基二甲硅烷基酰胺钠(1M/THF) (0.47 mL，0.46 mmol)，简短脱气，在150℃下微波辐照达1小时。反应完成后(通过TLC监测)，反应混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷/甲醇(1:1，10 mL)洗涤，浓缩滤液，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：21 % (25 mg，浅褐色液体)。LCMS：(方法A) 519.3 (M+H)，RT. 3.6，3.8分钟，45.3，45.8 % (最大)。

步骤5-FS08555-008

(2-二甲基氨基甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C33")

程序：向2-二甲基氨基甲基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-5-基]-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺(25 mg，0.24 mmol)在无水甲醇(3 mL)中的溶液中加入甲醇(3 mL)中的HCl，在70℃下微波辐照达1小时。反应完成后(通过TLC监测)，真空浓缩反应混合物。残余物溶解于二氯甲烷(15 mL)中，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，MeOH/DCM梯度洗脱)。收率：12% (16 mg，浅黄色固体)。LCMS：(方法A) 389 (M+H)，RT. 2.3分钟，97.88% (最大)。99.00% (254 nm)；¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 12.21 (s，1H)，9.86 (s，1H)，8.68 (m，2H)，8.42 (s，1H)，8.04 (t，J=4.32 Hz，2H)，7.45-7.35 (m，2H)，3.99 (s，3H)，3.63 (s，2H)，2.24 (s，6H)。HPLC：(方法A) RT 2.0分钟，98.91 % (最大)，99.19% (254 nm)。

MC825_043

步骤1-IS0839 1-077

2-(4-溴-2-硝基-苯基)-丙二酸二甲酯

程序：在0℃下，向氢化钠(60%) (2.13 g，53.3 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(50 mL)中的悬浮液中加入丙二酸二甲酯(12 mL，104.2 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(20 mL)中的溶液。将反应混合物加热至100℃达20分钟。在室温下，逐滴加入无水N,N-二甲基甲酰胺(20 mL)中的2,5-二溴硝基苯(5 g，17.8 mmol)，加热至100℃达3小时。反应完成后(通过TLC监测)，将反应混合物冷却至0℃，用冷水猝灭。在高真空下浓缩反应混合物，将残余物溶解于乙酸乙酯(75 mL)中，用水(2×75 mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：80 % (4.7 g，浅橙色固体)。LCMS：(方法B) 330.0 (M-H)，RT. 5.8分钟，91.1 % (最大)，90.8 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.30 (d，J=2.16 Hz，1H)，8.01 (dd，J=8.3，2.1 Hz，1H)，7.50 (d，J=8.3 Hz，1H)，5.49 (s，1H)，3.69 (s，6H)。

步骤2-IS0839 1-079

4-溴-2-硝基-苯甲酸甲酯

程序：向2-(4-溴-2-硝基-苯基)-丙二酸二甲酯(4.7 g，14.2 mmol)在DMSO (10 mL)中的溶液中加入氯化锂(1.2 g，28.4 mmol)和水(0.3 mL)，加热至100℃达24小时。反应完成后(通过TLC监测)，在高真空下浓缩反应混合物。残余物用二氯甲烷(50 mL)稀释，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：20 % (0.8 g，浅褐色固体)。LCMS：(方法B) 274.0 (M-H)，RT. 5.8分钟，94.0 % (最大)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.28 (d，J=2.1 Hz，1H)，7.96 (dd，J=8.2，2.0 Hz，1H)，7.54 (d，J=8.2 Hz，1H)，4.06 (s，2H)，3.61 (s，3H)。

步骤3-IS0839 1-082

2-(4-溴-2-硝基-苯基)-2-甲基-丙酸甲酯

程序：在0℃下，向氢化钠(60%) (0.28 g，7.22 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(15 mL)中的悬浮液中加入4-溴-2-硝基-苯甲酸甲酯(0.8 g，2.9 mmol)、碘甲烷(0.72 mL，11.5 mmol)和18-冠醚-6 (0.8 g，0.3 mmol)，在室温下搅拌2小时。反应完成后(通过TLC监测)，将反应混合物冷却至0℃，用冷水猝灭。在高真空下浓缩反应混合物，将残余物溶解于乙酸乙酯(30 mL)中，用水(2×30 mL)、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，浓缩，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：91 % (0.8 g，褐色油)。LCMS：(方法B) 301.0 (M-H)，RT. 6.2分钟，96.3 % (最大)，93.5 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 8.14 (d，J=2.2 Hz，1H)，7.94 (dd，J=8.6，2.2 Hz，1H)，7.71 (d，J=8.6 Hz，1H)，3.53 (s，3H)，1.56 (s，6H)。

步骤4-IS0839 1-083

6-溴-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮

程序：向2-(4-溴-2-硝基-苯基)-2-甲基-丙酸甲酯(0.6 g，1.96 mmol)在冰醋酸(10 mL)中的溶液中加入铁粉(0.55 g，9.8 mmol)，加热至100℃达2小时。反应完成后(通过TLC监测)，在高真空下浓缩反应混合物，用二氯甲烷稀释，并通过硅藻土。浓缩滤液，以得到粗产物。粗产物通过柱层析法纯化(硅胶，EA/PE梯度洗脱)。收率：35 % (210 mg，白色固体)。LCMS：(方法B) 240.0 (M-H)，RT. 5.1分钟，99.5 % (最大)，99.0 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.45 (s，1H)，7.24 (d，J=7.9 Hz，1H)，7.13 (dd，J=7.8，1.7 Hz，1H)，6.97 (d，J=1.8 Hz，1H)，1.22 (s，6H)。

步骤5-FS08391-085

3,3-二甲基-6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C34")

使用如对MC825_005_步骤3所述的程序合成。

收率：17 % (15 mg，白色固体)。LCMS：(方法A) 375.0 (M+H)，RT. 3.1分钟，98.3 % (最大)，99.4 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 10.37 (s，1H)，9.92 (s，1H)，8.67 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.66 (s，1H)，8.38 (s，1H)，8.05 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.40 (d，J=1.8 Hz，1H)，7.26 (dd，J=8.1，1.9 Hz，1H)，7.19 (d，J=8.0 Hz，1H)，3.99 (s，3H)，1.23 (s，6H)。HPLC：(方法A) RT 3.3分钟，99.7 % (最大)，99.7 % (254 nm)。

MC825_044

4-(8-联苯-2-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-2-羟基-苄腈("C35")

使用如对MC825_005_步骤3所述的程序合成。

收率：16 % (22 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 405.2 (M+H)，RT. 4.4分钟，99.5 % (最大)，97.3 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，CDCl₃)：δ [ppm] 8.16-8.13 (m，1H)，7.79-7.65 (m，1H)，7.63-7.53 (m，4H)，7.42-7.37 (m，2H)，7.18-7.14 (m，6H)，6.95-6.93 (m，1H)。HPLC：(方法A) RT 4.4分钟，97.4 % (最大)，96.1 % (254 nm)。

MC825_045

步骤1-FS08555-007

2-羟基-4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苄腈("C36")

使用如对MC825_005_步骤3所述的程序合成。

收率：5 % (6 mg，米色固体)。LCMS：(方法A) 333.2 (M+H)，RT. 3.4分钟，99.6 % (最大)，98.9 % (254 nm)。¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆)：δ [ppm] 11.04 (s，1H)，10.44 (s，1H)，8.71 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.68 (s，1H)，8.41 (s，1H)，8.10 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.57 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.51 (d，J=8.6 Hz，1H)，7.20 (dd，J=8.6，1.9 Hz，1H)，3.99 (s，3H)。HPLC：(方法A) RT 3.0分钟，99.7 % (最大)，98.7 % (254 nm)。

合成8-碘-[1,2,4]三唑并吡嗪-2-基胺

将8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺(5.500 g；32.43 mmol)悬浮于水(40.0 ml)中，随后加入HI (67%，21.855 ml；194 mmol)。混合物在50℃下搅拌16小时，通过HPLC监测。将混合物冷却至室温，用水稀释。加入NaOH直至达到pH 14后，将所得到的悬浮液冷却至0℃，滤除所有固体，得到黄色固体状的8-碘-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺(7.850 g；30.074 mmol)。

用于Suzuki-Miyaura偶联的通用程序1

在装载搅拌棒的微波管中加入1当量8-卤代-[1,2,4]三唑并吡嗪-2-基胺、1.1当量硼酸(或相应的硼酸酯)、0.03当量乙酸钯(II)、0.06当量X-Phos和2当量碳酸钾。将管密封，抽空，用氩气反充。在氮气下，经由注射器，加入乙腈和水(2:1 v/v，4mL/mmol)的混合物(通过在超声辐照下使氩气鼓泡通过混合物10分钟或抽空和用氩气反充，简短地脱气)。在微波辐照下，将管在150℃下加热适当的时间，通过HPLC-MS监测。完成后，混合物用乙酸乙酯稀释，经硅藻土塞过滤，减压蒸发。

将粗产物负载于二氧化硅上，经由柱层析法纯化。

用于Buchwald-Hartwig胺化的通用程序2

在螺杆封口或微波小瓶中，将1当量三唑并吡嗪、1.1当量卤素偶联配对物和0.03当量氯[2-二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2,′-4′-6′-三-异丙基-1,′1-联苯基[2-(2氨基乙基)苯基)Pd(II) (Brettphose-Precat)溶解于叔丁醇(5 mL/mmol)中。通过抽空和用氮气反充3次，使混合物脱气，随后加入LHMDS (2当量，1.1 M，在THF中)，将反应混合物加热至110℃，通过HPLC监测。完成后，混合物用水猝灭，用乙酸乙酯稀释，经硅藻土过滤。真空除去溶剂，残余物经由层析法或制备型HPLC纯化。

用于亲核芳族取代的通用程序3

向微波小瓶搅拌棒中加入1当量三唑并吡嗪，加入1.1当量相应的胺和碳酸钾(2当量)、N,N-二甲基甲酰胺(3 mL/mmol)，将悬浮液在微波中在180℃下加热。反应通过HPLC监测。完成后，混合物用乙酸乙酯稀释，经硅藻土过滤，浓缩。残余物经由柱层析法或制备型HPLC纯化。

N-(4-吗啉代苯基)-8-吡啶并[2,3-b]吡嗪-7-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺("C37")

将8-碘-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺、7-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-吡啶并[2,3-b]吡嗪(1.1当量)、乙酸钯(II) (0.03当量)、碳酸钾(3当量)合并，并且悬浮于乙腈和水中。悬浮液用N₂吹扫，加入2-(二环己基膦基)-2′,4′,6′-三异丙基联苯(0.1当量)。将反应容器在N₂下密封，通过微波辐照加热至150℃下达1小时。粗材料经由快速层析法纯化，用于下一步骤。

将8-吡啶并[2,3-b]吡嗪-7-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺、4-(4-氯-苯基)-吗啉(1.1当量)、氯[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-异丙基-1,1'-联苯基]2-(2-氨基乙基)苯基)Pd(II) (0.25当量)、2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2′-4′-6′-三-异丙基-1,1′-联苯；BrettPhos (0.25当量)合并，悬浮于叔丁醇中。悬浮液用N₂吹扫，加入双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(3当量；20% (约1.06M)溶液在THF/乙基苯中)。在N₂下将容器密封，加热至65℃达2小时，随后加热至110℃达2小时。将混合物过滤，浓缩。经由制备型HPLC纯化，得到标题化合物。

HPLC纯度(方法C)：100%，Rt：1.76分钟，观察到[M+H]=426.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (d，J=2.4 Hz，1H)，9.98-9.92 (m，2H)，9.24-9.16 (m，2H)，9.06-9.02 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.39-8.34 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.67-7.61 (d，J=9.0 Hz，2H)，7.01-6.96 (d，J=9.0 Hz，2H)，3.79-3.71 (m，4H)，3.10-3.04 (m，4H)。

8-(4-甲基磺酰基苯基)-N-(4-吗啉代苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺("C38")

与"C37"类似的合成，使用2-(4-甲磺酰基-苯基)-4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷用于Suzuki-偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,84分钟，观察到[M+H]=451.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm]9.86-9.82 (s，1H)，8.98-8.92 (m，3H)，8.29-8.25 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.17-8.12 (d，J=8.6 Hz，2H)，7.65-7.59 (d，J=9.0 Hz，2H)，7.00-6.94 (d，J=9.0 Hz，2H)，3.78-3.72 (m，5H)，3.08-3.02 (m，3H)。

8-[4-(吗啉代甲基)苯基]-N-(4-吗啉代苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺("C39")

使用4-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基]-吗啉和8-碘-[1,2,4]三唑并吡嗪-2-基胺作为Suzuki Miyaura偶联中的偶联配对物，通过采用通用程序1，得到标题化合物。

与"C37"类似，实施Buchwald胺化。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,35分钟，观察到[M+H]=472.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.77-9.73 (s，1H)，8.87-8.83 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.72-8.67 (d，J=8.3 Hz，2H)，8.22-8.17 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.65-7.59 (d，J=9.0 Hz，2H)，7.56-7.50 (d，J=8.4 Hz，2H)，7.00-6.94 (d，J=9.1 Hz，2H)，3.79-3.73 (m，5H)，3.64-3.59 (m，5H)，3.59-3.56 (s，2H)，3.08-3.02 (m，4H)，2.44-2.39 (m，4H)。

[8-(3-氟-4-吗啉-4-基甲基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺("C40")

采用通用程序1，使用4-[2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基]-吗啉和8-碘-[1,2,4]三唑并吡嗪-2-基胺作为偶联配对物，和采用通用程序2，使用4-(4-氯-苯基)-吗啉用于Buchwald-Hartwig胺化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1.42分钟，观察到[M+H]=490.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm]9.81-9.77 (s，1H)，8.93-8.88 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.62-8.51 (m，2H)，8.24-8.19 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.68-7.59 (m，3H)，7.00-6.94 (m，2H)，3.78-3.74 (m，5H)，3.65-3.62 (s，2H)，3.62-3.58 (m，4H)，3.08-3.03 (m，4H)，2.48-2.42 (m，4H)。

吗啉-4-基-{4-[2-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-苯基}-甲酮("C41")

使用通用程序2胺化之前，使用通用程序1，使吗啉-4-基-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯基]-甲酮与8-碘-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺反应。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,71分钟，观察到[M+H]=486.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.83-9.79 (s，1H)，8.93-8.88 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.83-8.77 (d，J=8.4 Hz，2H)，8.26-8.21 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.67-7.59 (m，3H)，7.00-6.94 (d，J=9.1 Hz，2H)，3.79-3.74 (m，4H)，3.08-3.02 (m，4H)。

N-{4-[2-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-苯基}-甲磺酰胺("C42")

与通用程序1类似，N-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯基]-甲磺酰胺与8-碘-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺反应，以得到N-[4-(2-氨基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)-苯基]-甲磺酰胺，其与4-(4-氯-苯基)-吗啉反应，以得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,80分钟，观察到[M+H]=466.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.77-9.72 (s，1H)，8.87-8.81 (m，1H)，8.76-8.69 (m，1H)，8.21-8.15 (m，1H)，7.66-7.59 (m，2H)，7.44-7.36 (m，1H)，7.02-6.94 (m，2H)，3.80-3.73 (m，4H)，3.15-3.08 (d，J=0.9 Hz，3H)，3.08-3.02 (m，4H)。

4-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌嗪-2-酮("C43")

将哌嗪-2-酮(1.1当量)、8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺(1当量)溶解于DMF中，采用通用程序3，在微波中，加热至180℃达1小时。在如通用程序3中描述的胺化条件下，中间体与1-氯-3,5-二甲氧基-苯反应，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,79分钟，观察到[M+H]=370.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.76-9.71 (s，1H)，8.24-8.18 (d，J=4.4 Hz，1H)，8.14-8.09 (s，1H)，7.62-7.56 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.96-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.04 (t，J=2.2 Hz，1H)，4.61-4.56 (s，2H)，4.36-4.28 (m，2H)，3.76-3.71 (s，6H)。

(3,5-二甲氧基-苯基)-(8-吗啉-4-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺("C44")

与"C43"类似，使用吗啉代替哌嗪-2-酮作为步骤1中的反应配对物，合成(3,5-二甲氧基-苯基)-(8-吗啉-4-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,10分钟，观察到[M+H]=357.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.70-9.65 (s，1H)，8.22-8.16 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.60-7.54 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.94-6.89 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.04 (t，J=2.2 Hz，1H)，4.11-4.04 (m，4H)，3.77-3.73 (m，4H)，3.73-3.71 (s，6H)。

1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌啶-3-甲酸(2-羟基-乙基)-酰胺("C45")

与"C44"类似，在第一步中使用N-(2-羟基乙基)哌啶-3-甲酰胺作为亲核试剂代替吗啉，制备标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,80分钟，观察到[M+H]=442.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.67-9.62 (s，1H)，8.16-8.10 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.89-7.82 (m，1H)，7.59-7.53 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.95-6.89 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.04 (t，J=2.2 Hz，1H)，5.22-5.15 (d，J=12.4 Hz，2H)，5.12-5.05 (d，J=13.1 Hz，1H)，4.72-4.64 (t，J=5.4 Hz，1H)，3.75-3.70 (s，6H)，3.17-3.09 (m，2H)，2.49-2.38 (m，2H)，1.96-1.87 (m，5H)，1.77-1.69 (d，J=10.5 Hz，1H)，1.61-1.50 (m，3H)。

(3,5-二甲氧基-苯基)-[8-(4-甲基-哌嗪-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C46")

与"C44"类似，在第一步中使用N-甲基哌嗪作为亲核试剂代替吗啉，制备标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,46分钟，观察到[M+H]=370.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.69-9.64 (s，1H)，8.19-8.12 (m，2H)，7.58-7.52 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.95-6.89 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.04 (t，J=2.2 Hz，1H)，4.13-4.05 (m，4H)，3.75-3.70 (s，6H)，2.48-2.45 (m，4H)，2.27-2.22 (s，3H)。

1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌啶-3-甲酸("C47")

与"C44"类似，在第一步中使用哌啶-3-甲酸作为亲核试剂代替吗啉，制备标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,02分钟，观察到[M+H]=399.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.67-9.62 (s，1H)，8.17-8.11 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.58-7.52 (d，J=4.3 Hz，1H)，6.95-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.09-6.03 (t，J=2.2 Hz，1H)，5.08-4.92 (m，2H)，3.75-3.70 (s，6H)，2.08-1.99 (m，1H)，1.81-1.63 (m，2H)，1.63-1.53 (m，1H)。

{4-[2-(2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-苯基}-吗啉-4-基-甲酮("C48")

在氮气下，将[4-(2-氨基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)-苯基]-吗啉-4-基-甲酮(参见"C41")、5-溴-2-甲基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑(1.1当量)、氯[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-异丙基-1,1'-联苯]2-(2-氨基乙基)苯基)Pd(II) (0.03当量)、2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2′-4′-6′-三-异丙基-1,1′-联苯(0.03当量)溶解于无水叔丁醇中，随后加入双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(3当量，20% (约1.06M)溶液在THF/乙基苯中)。将所得到的混合物加热至110℃达1小时。如通用程序3中所描述的后处理得到SEM-保护的中间体。

将(4-{2-[2-甲基-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-苯并咪唑-5-基氨基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基}-苯基)-吗啉-4-基-甲酮溶解于乙醇中。加入浓HCl，将反应混合物加热至65℃达4小时，通过LCMS监测。完成后，混合物用饱和NaHCO₃溶液中和，将各层分离，水相用DCM萃取3次。合并的有机相用Na₂SO₄干燥，浓缩。纯化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,37分钟，观察到[M+H]=455.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.00-9.96 (s，1H)，8.95-8.90 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.86-8.80 (d，J=8.0 Hz，2H)，8.28-8.23 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.06-8.02 (s，1H)，7.69-7.63 (d，J=8.0 Hz，2H)，7.43-7.38 (d，J=6.8 Hz，2H)，3.66-3.62 (bs，8H)，2.51-2.47 (s，4H)。

1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-4-(2-羟基-乙基)-哌啶-4-醇("C49")

与"C44"类似，在第一步中使用4-(2-羟基乙基)哌啶-4-醇作为亲核试剂代替吗啉，制备标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,72分钟，观察到[M+H]=415.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.65-9.60 (s，1H)，8.12-8.06 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.55-7.49 (d，J=4.3 Hz，1H)，6.95-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.09-6.03 (t，J=2.2 Hz，1H)，4.82-4.74 (d，J=12.8 Hz，2H)，4.43-4.31 (m，2H)，3.75-3.70 (s，6H)，3.62-3.52 (m，3H)，1.66-1.55 (m，6H)。

[8-(4-氨基-哌啶-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(3,5-二甲氧基-苯基)-胺("C50")

与"C44"类似，在第一步中使用N-(4-哌啶基)氨基甲酸叔丁酯作为亲核试剂代替吗啉，制备标题化合物。

在标准条件下解离Boc-保护基团，得到固体状的[8-(4-氨基-哌啶-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(3,5-二甲氧基-苯基)-胺。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,47分钟，观察到[M+H]=370.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.68-9.63 (s，3H)，8.38-8.33 (s，3H)，8.18-8.12 (d，J=4.4 Hz，3H)，7.59-7.53 (d，J=4.4 Hz，3H)，6.95-6.90 (d，J=2.2 Hz，6H)，6.10-6.04 (m，3H)，5.12-5.04 (d，J=13.3 Hz，6H)，3.26-3.14 (m，8H)，2.56-2.51 (s，1H)，1.98-1.90 (d，J=12.3 Hz，6H)，1.54-1.40 (m，6H)。

1-{4-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌嗪-1-基}-乙酮("C51")

使用标准条件，将N-(3,5-二甲氧基苯基)-8-哌嗪-1-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺(如前所述合成)转化为乙酸盐。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,90分钟，观察到[M+H]=398.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.71-9.67 (s，1H)，8.23-8.18 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.61-7.56 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.95-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.05 (m，1H)，5.77-5.73 (s，1H)，4.14-4.05 (m，3H)，3.75-3.71 (s，6H)，3.64-3.58 (m，3H)，2.09-2.05 (s，3H)。

(3,5-二甲氧基-苯基)-[8-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C52") 

在标准条件下，通过用甲磺酰氯处理，将N-(3,5-二甲氧基苯基)-8-哌嗪-1-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺(如前所述合成)转化为甲磺酸盐。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,1分钟，观察到[M+H]=434.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.72-9.68 (s，1H)，8.25-8.20 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.62-7.57 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.94-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.06 (t，J=2.2 Hz，1H)，5.76-5.72 (s，0H)，4.25-4.19 (m，4H)，3.75-3.71 (s，6H)，3.29-3.26 (m，6H)，2.93-2.89 (s，3H)。

N-{1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌啶-4-基}-甲磺酰胺("C53")

使用标准条件，将[8-(4-氨基-哌啶-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(3,5-二甲氧基-苯基)-胺转化为标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,0分钟，观察到[M+H]=448.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.69-9.64 (s，1H)，8.18-8.12 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.59-7.53 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.17-7.10 (d，J=7.3 Hz，1H)，6.96-6.91 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.11-6.05 (t，J=2.2 Hz，1H)，5.04-4.95 (d，J=13.4 Hz，2H)，3.76-3.71 (s，6H)，3.56-3.47 (s，1H)，3.00-2.95 (s，3H)，2.01-1.93 (d，J=12.2 Hz，2H)，1.59-1.46 (m，2H)。

(3,5-二甲氧基-苯基)-[8-(3-苯基-哌嗪-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C54")

根据通用程序3，使8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺和3-苯基哌嗪-1-甲酸叔丁酯偶联。分离中间体，使用1-氯-3,5-二甲氧基-苯，采用通用程序2，进行Buchwald Hartwig胺化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,65分钟，观察到[M+H]=432.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.63-9.59 (s，1H)，8.17-8.12 (m，2H)，7.58-7.54 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.51-7.45 (m，2H)，7.40-7.27 (m，3H)，6.91-6.87 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.08-6.03 (t，J=2.2 Hz，1H)，5.22-5.12 (m，2H)，3.88-3.81 (m，1H)，3.18-3.08 (m，2H)，3.02-2.88 (m，2H)。

(3,5-二甲氧基-苯基)-[8-(4-甲基-2-苯基-哌嗪-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C55")

根据通用程序3，使8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺和1-甲基-3-苯基-哌嗪偶联。分离中间体，使用1-氯-3,5-二甲氧基-苯，采用通用程序2，进行Buchwald Hartwig胺化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,68分钟，观察到[M+H]=446.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.68-9.64 (s，2H)，8.19-8.14 (m，2H)，7.58-7.53 (d，J=4.4 Hz，2H)，7.47-7.42 (m，4H)，7.33-7.26 (m，3H)，7.24-7.18 (m，1H)，6.92-6.87 (d，J=2.2 Hz，4H)，6.08-6.03 (m，2H)，3.69-3.65 (s，12H)，2.87-2.81 (d，J=11.9 Hz，1H)，2.50-2.43 (m，2H)，2.25-2.21 (s，5H)，2.19-2.10 (m，2H)。

1-{4-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌嗪-1-基}-2-羟基-乙酮("C56")

在标准条件下，如前所述合成的3,5-二甲氧基-苯基)-(8-哌嗪-1-基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)-胺与2-羟基乙酸反应，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,80分钟，观察到[M+H]=414.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.71-9.67 (s，1H)，8.23-8.18 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.61-7.56 (d，J=4.4 Hz，1H)，6.94-6.90 (d，J=2.2 Hz，2H)，6.10-6.06 (m，1H)，4.66-4.60 (m，1H)，4.19-4.15 (d，J=5.5 Hz，2H)，4.13-4.08 (m，4H)，3.75-3.71 (s，6H)，3.66-3.62 (s，2H)，3.55-3.50 (d，J=5.3 Hz，2H)。

(2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-[8-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C57")

与"C49"类似，在Suzuki反应中，使用4-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基]-吗啉作为偶联配对物，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,10分钟，观察到[M+H]=441.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.98-9.94 (s，1H)，8.90-8.85 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.76-8.70 (m，2H)，8.24-8.20 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.17-8.13 (s，1H)，8.08-8.04 (d，J=1.8 Hz，1H)，7.60-7.54 (m，2H)，7.47-7.38 (m，2H)，3.67-3.61 (m，3H)，3.54-3.49 (d，J=4.2 Hz，4H)，3.42-3.38 (s，4H)，2.57-2.53 (s，2H)，2.49-2.47 (s，2H)。

[8-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺("C58")

与"C49"和"C38"类似，合成[8-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,41分钟，观察到[M+H]=420.0；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.01-9.97 (s，1H)，9.02-8.96 (m，3H)，8.33-8.25 (m，2H)，8.20-8.15 (m，2H)，8.08-8.01 (m，2H)，7.42-7.37 (m，2H)，3.34-3.32 (s，3H)，2.49-2.46 (s，3H)。

[8-(3-氟-4-吗啉-4-基甲基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺("C59")

与"C49"和"C38"类似，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,15分钟，观察到[M+H]=459.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.95-9.91 (s，1H)，8.94-8.89 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.63-8.54 (m，2H)，8.26-8.21 (m，1H)，8.01-7.97 (s，1H)，7.69-7.62 (m，1H)，7.41-7.37 (m，2H)，3.64-3.63 (s，2H)，3.62-3.60 (m，4H)，2.49-2.47 (s，3H)，2.47-2.43 (m，7H)。

6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C60")

根据通用程序2，如前所述合成的8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺与6-氯-羟吲哚偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,56分钟，观察到[M+H]=347.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.49-10.44 (s，1H)，9.98-9.93 (s，1H)，8.76-8.69 (m，2H)，8.48-8.42 (m，1H)，8.15-8.08 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.48-7.43 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.35-7.27 (m，1H)，7.23-7.16 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.08-4.03 (s，3H)，3.49-3.44 (s，2H)。

2-{4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-丙-2-醇("C61")

如在通用程序2中描述的，在Buchwald Hartwig条件下，2-(4-溴苯基)丙-2-醇和8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺反应。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1.71分钟，观察到[M+H]=350.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.84-9.79 (s，1H)，8.74-8.64 (m，2H)，8.43-8.37 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.08-8.02 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.69-7.62 (d，J=8.7 Hz，2H)，7.46-7.39 (d，J=8.7 Hz，2H)，4.90-4.85 (s，1H)，4.02-3.97 (s，3H)，1.46-1.41 (s，7H)。

(4-叔丁基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C62")

根据通用程序2，如前面描述的8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺与1-溴-4-叔丁基-苯偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2.46分钟，观察到[M+H]=348.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.81-9.76 (s，1H)，8.72-8.63 (m，2H)，8.42-8.37 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.07-8.01 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.69-7.62 (d，J=8.7 Hz，2H)，7.39-7.32 (d，J=8.7 Hz，2H)，4.02-3.97 (s，3H)，1.31-1.26 (s，9H)。

1-{4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲腈("C63")

采用通用程序2，使8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺与1-(4-氯苯基)-1-环丙烷甲腈反应，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：2,00分钟，观察到[M+H]=357.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.04-10.00 (s，1H)，8.74-8.69 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.68-8.64 (s，1H)，8.41-8.37 (d，J=0.8 Hz，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.78-7.72 (d，J=8.7 Hz，2H)，7.35-7.30 (d，J=8.7 Hz，2H)，4.01-3.97 (s，3H)，1.72-1.65 (m，2H)，1.47-1.41 (m，2H)。

1-{4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲酰胺("C64")

将1-{4-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲腈溶解于甲醇中，随后加入碳酸钾(5当量)、DMSO (3.5当量)和过氧化氢(30%溶液，5当量)。将混合物搅拌5小时，经由LCMS MS监测。加入DMSO (3.5当量)和过氧化氢(30%溶液，5当量)，将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物浓缩，粗材料经由柱层析法纯化。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1.70分钟，观察到[M+H]=375.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.98-9.94 (s，1H)，8.74-8.69 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.68-8.64 (s，1H)，8.41-8.37 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.08-8.03 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.74-7.69 (d，J=8.6 Hz，2H)，7.36-7.30 (d，J=8.6 Hz，2H)，7.01-6.97 (s，1H)，6.05-6.01 (s，1H)，4.01-3.97 (s，3H)，1.35-1.28 (m，2H)，0.97-0.90 (m，2H)。

1-{4-[8-(1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲腈("C65")

使用通用程序1，使8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺首先与4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑反应，随后采用通用程序2，与1-(4-氯苯基)-1-环丙烷甲腈反应。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,84分钟，观察到[M+H]=343.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 13.37-13.33 (s，1H)，10.03-9.99 (s，1H)，8.74-8.69 (m，2H)，8.46-8.42 (d，J=2.0 Hz，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.78-7.72 (d，J=8.7 Hz，2H)，7.35-7.29 (d，J=8.7 Hz，2H)，1.72-1.65 (m，2H)，1.48-1.41 (m，2H)。

1-{4-[8-(1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲酰胺("C66")

与"C64"类似，将1-{4-[8-(1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-苯基}-环丙烷甲腈皂化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,56分钟，观察到[M+H]=361.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 13.38-13.34 (s，1H)，9.96-9.92 (s，1H)，8.75-8.69 (m，2H)，8.46-8.42 (s，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.74-7.69 (m，2H)，7.35-7.29 (m，2H)，7.00-6.96 (s，1H)，6.06-6.02 (s，1H)，1.34-1.28 (m，2H)，0.97-0.91 (m，2H)。

3,3-二甲基-6-[8-(1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C67")

使用通用程序2，在Buchwald Hartwig条件下，如前面描述合成的8-(1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮反应。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,67分钟，观察到[M+H]=361.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 13.43-13.39 (s，1H)，10.43-10.39 (s，1H)，9.94-9.90 (s，1H)，8.78-8.74 (s，1H)，8.73-8.68 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.50-8.46 (s，1H)，8.11-8.06 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.44-7.39 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.34-7.28 (m，1H)，7.25-7.19 (d，J=8.1 Hz，1H)，1.28-1.24 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C68")

使用通用程序2，在Buchwald Hartwig条件下，8-(1,3,5-三甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺(采用程序1，通过8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺与(1,3,5-三甲基吡唑-4-基)硼酸反应而合成)与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮偶联。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,69分钟，观察到[M+H]=419.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.36-10.31 (s，1H)，9.83-9.78 (s，1H)，8.76-8.70 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.17-8.11 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.36-7.31 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.27-7.20 (m，1H)，7.20-7.12 (m，1H)，3.80-3.75 (s，3H)，2.39-2.34 (s，3H)，2.28-2.23 (s，3H)，1.25-1.20 (s，6H)。

6-[8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C69")

与"C68"类似，但是使用1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑作为在第一Suzuki反应中的硼酸，合成标题分子。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,90分钟，观察到[M+H]=389.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.34-10.29 (s，1H)，9.89-9.84 (s，1H)，8.81-8.76 (s，1H)，8.65-8.59 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.10-8.04 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.42-7.36 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.30-7.15 (m，2H)，3.95-3.90 (s，3H)，2.60-2.55 (s，3H)，1.27-1.22 (s，6H)。

6-[8-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C70")

使用通用程序2，在Buchwald Hartwig条件下，如前所述合成的8-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,95分钟，观察到[M+H]=449.0；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.42-10.37 (s，1H)，10.13-10.08 (s，1H)，9.02-8.94 (m，3H)，8.35-8.29 (d，J=4.2 Hz，1H)，8.23-8.15 (d，J=8.6 Hz，2H)，7.47-7.41 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.34-7.27 (m，1H)，7.26-7.19 (m，1H)，3.35-3.32 (s，3H)，1.27-1.25 (m，6H)。

3-羟基-3-甲基-6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C71")

8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-胺与6-溴-3-羟基-3-甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮(可经由向6-溴-靛红加入甲基溴化镁得到)反应，以得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,51分钟，观察到[M+H]=377.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.26-10.22 (s，1H)，9.98-9.94 (s，1H)，8.70-8.64 (m，2H)，8.41-8.37 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.08-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.39-7.35 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.30-7.19 (m，2H)，5.71-5.67 (s，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，1.38-1.34 (s，3H)。

2-{6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1H-吲唑-3-基}-丙-2-醇("C72")

经由以下序列合成2-(6-溴-1H-吲唑-3-基)-丙-2-醇：

在30℃下，6-溴-1H-吲哚-2,3-二酮用氢氧化钠(1.1当量)在水中处理，直至所有固体溶解。在该温度下缓慢加入溶解于少量水中的亚硝酸钠(1.1当量)，将溶液搅拌另外的30分钟。在0℃下，向硫酸(1.9当量)的水溶液中缓慢加入混合物，保持内部温度低于10℃。在该温度下另外的20分钟后，缓慢加入水中的氯化锡(II)(2.4当量)和盐酸的混合物。在0℃下搅拌2小时后，通过经硅藻土过滤、用丙酮洗涤、真空除去溶剂来后处理，得到中间体羧酸。

采用标准程序，将6-溴-1H-吲唑-3-甲酸转化为相应的甲基酯。

在0℃下，6-溴-1H-吲唑-3-甲酸甲酯用甲基溴化镁(6.6当量)处理，随后缓慢温热至室温。完成后，混合物用饱和氯化铵猝灭，粗材料经由层析法纯化。

8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺和2-(6-溴-1H-吲唑-3-基)-丙-2-醇反应，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,58分钟，观察到[M+H]=390.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 12.42-12.38 (s，1H)，10.07-10.03 (s，1H)，8.74-8.66 (m，2H)，8.44-8.40 (s，1H)，8.10-8.05 (m，2H)，7.91-7.85 (d，J=8.8 Hz，1H)，7.25-7.19 (m，1H)，5.12-5.08 (s，1H)，4.03-3.99 (s，3H)，1.61-1.57 (s，6H)。

6-[8-((R)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C73")

使用通用程序2，在Buchwald Hartwig条件下，(R)-1-(2-氨基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)-吡咯烷-3-醇(采用通用程序3，通过8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺和(R)-吡咯烷-3-醇反应而合成)与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,41分钟，观察到[M+H]=380.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.59-9.55 (s，1H)，7.96-7.91 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.50-7.45 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.34-7.30 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.24-7.18 (m，1H)，7.16-7.10 (d，J=8.1 Hz，1H)，5.01-4.97 (d，J=3.6 Hz，1H)，4.46-4.40 (m，1H)，3.95-3.88 (s，5H)，3.20-3.15 (d，J=5.3 Hz，2H)，2.07-1.98 (m，1H)，1.97-1.90 (m，1H)，1.24-1.20 (s，6H)。

6-[8-(3-羟基-氮杂环丁烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C74")

在如通用程序2中描述的胺化条件下，1-(2-氨基-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)-氮杂环丁烷-3-醇(使用通用程序3，可通过用氮杂环丁烷-3-醇亲核取代8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺而得到)与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮反应，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,44分钟，观察到[M+H]=366.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.37-10.24 (s，1H)，9.69-9.57 (s，1H)，8.10-7.93 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.52-7.43 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.39-7.31 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.21-7.17 (m，1H)，7.16-7.11 (m，1H)，4.73-4.61 (m，1H)，4.61-4.49 (d，J=3.3 Hz，1H)，4.18-4.04 (m，1H)，3.24-3.13 (s，1H)，1.27-1.18 (s，6H)。

顺式-6-[8-(4-羟基-环己基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C75")

使用如对于"C74"所描述的程序，使用顺式-4-氨基-环己醇作为亲核取代中的偶联配对物，得到标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,50分钟，观察到[M+H]=408.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.31-10.17 (s，1H)，9.60-9.44 (s，1H)，8.06-7.82 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.54-7.44 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.33-7.26 (dd，J=8.1，2.0 Hz，1H)，7.25-7.21 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.18-7.08 (d，J=8.1 Hz，1H)，6.70-6.56 (d，J=7.7 Hz，1H)，4.44-4.36 (d，J=3.1 Hz，1H)，3.83-3.71 (d，J=3.7 Hz，1H)，3.22-3.14 (d，J=5.2 Hz，4H)，1.91-1.79 (m，2H)，1.73-1.62 (m，4H)，1.62-1.49 (m，2H)，1.28-1.20 (s，6H)。

反式-6-[8-(4-羟基-环己基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C76")

使用如对于"C74"所描述的程序，使用反式-4-氨基-环己醇作为亲核取代中的偶联配对物，得到标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,50分钟，观察到[M+H]=408.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.27-10.23 (s，1H)，9.44-9.40 (s，1H)，7.96-7.91 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.48-7.43 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.32-7.26 (dd，J=8.1，2.0 Hz，1H)，7.23-7.19 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.17-7.11 (d，J=8.1 Hz，1H)，6.83-6.78 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.60-4.53 (m，1H)，4.01-3.93 (m，1H)，3.49-3.40 (m，2H)，3.40-3.36 (s，1H)，3.20-3.15 (d，J=5.3 Hz，1H)，1.99-1.84 (m，4H)，1.52-1.42 (m，2H)，1.34-1.23 (m，2H)，1.23-1.21 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(哌啶-3-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C77")

溶解于乙腈中的8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺与3-氨基-哌啶-1-甲酸叔丁酯和N-乙基二异丙基胺一起，在120℃下加热18小时。使用通用程序1，使用6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮使分离的中间体Buchwald Hartwig胺化，在标准条件下解离Boc-基团后，得到标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,53分钟，观察到[M+H]=393.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.25 (s，1H)，9.45-9.41 (s，1H)，8.20-8.16 (s，1H)，8.05-8.00 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.50-7.45 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.33-7.27 (m，1H)，7.27-7.19 (m，2H)，7.17-7.12 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.42-4.36 (m，1H)，3.15-3.14 (s，2H)，2.95-2.87 (m，1H)，2.81-2.77 (s，1H)，2.00-1.95 (d，J=4.8 Hz，1H)，1.89-1.83 (m，1H)，1.76-1.68 (m，2H)，1.25-1.21 (s，6H)。

6-[8-(环己基-甲基-氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C78")

使用如对于"C76"所描述的程序，使用环己基-甲基-胺作为亲核取代中的反应配对物，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1.85分钟，观察到[M+H]=406.2。

6-[8-(4-羟基-2-苯基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C79")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,87分钟，观察到[M+H]=456.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.59-9.55 (s，1H)，7.96-7.91 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.38-7.34 (s，1H)，7.32-7.26 (s，1H)，7.27-7.23 (d，J=4.3 Hz，4H)，7.22-7.18 (m，1H)，7.17-7.10 (m，2H)，4.46-4.39 (m，1H)，4.35-4.31 (s，1H)，2.45-2.37 (m，1H)，1.98-1.94 (s，1H)，1.25-1.21 (d，J=1.3 Hz，6H)。

2,2-二甲基-6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮("C80")

使用通用程序2，使8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺与6-氯-2,2-二甲基-4H-苯并[1,4]噁嗪-3-酮(可通过在碱性条件下，2-氨基-4-氯苯酚与2-溴-2-甲基-丙酰溴反应而得到)偶联，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,88分钟，观察到[M+H]=391.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.71-10.67 (s，1H)，9.83-9.79 (s，1H)，8.69-8.62 (m，2H)，8.42-8.38 (s，1H)，8.07-8.03 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.42-7.38 (d，J=2.5 Hz，1H)，7.28-7.22 (m，1H)，6.94-6.89 (d，J=8.6 Hz，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，1.42-1.38 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.4]辛-6-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C81")

采用如对于"C76"所描述的相同序列，但是使用2-氧杂-6-氮杂-螺[3.4]辛烷作为在第一步中的亲核体，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,52分钟，观察到[M+H]=406.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.25 (s，1H)，9.61-9.56 (s，1H)，7.99-7.93 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.50-7.44 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.34-7.28 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.24-7.17 (m，1H)，7.16-7.09 (m，1H)，4.65-4.59 (d，J=6.1 Hz，2H)，4.59-4.52 (d，J=6.1 Hz，2H)，4.20-4.15 (s，2H)，3.91-3.86 (s，2H)，3.20-3.14 (d，J=4.5 Hz，1H)，2.32-2.23 (m，2H)，1.25-1.20 (s，6H)。

3-羟基-3-异丙基-6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C82")

在-78℃下，向THF中的6-溴靛红加入异丙基氯化镁，在通常的后处理后，得到6-溴-3-羟基-3-异丙基-1,3-二氢-吲哚-2-酮，使用通用程序2，其与8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺反应，以得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,70分钟，观察到[M+H]=405.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.26-10.22 (s，1H)，10.00-9.96 (s，1H)，8.70-8.64 (m，2H)，8.41-8.37 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.39-7.34 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.29-7.23 (m，1H)，7.21-7.15 (d，J=8.1 Hz，1H)，5.63-5.59 (s，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，2.12-2.02 (m，1H)，1.03-0.97 (d，J=6.8 Hz，3H)，0.68-0.63 (d，J=6.8 Hz，3H)。

6-[8-((S)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C83")

使用对于6-[8-((R)-3-羟基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮所描述的程序，用(S)-3-羟基-吡咯烷作为亲核体，合成该化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,42分钟，观察到[M+H]=380.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.38-10.18 (s，1H)，9.70-9.46 (s，1H)，8.07-7.83 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.56-7.40 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.39-7.29 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.26-7.17 (dd，J=8.1，2.0 Hz，1H)，7.17-7.07 (m，1H)，5.09-4.89 (d，J=3.6 Hz，1H)，4.55-4.36 (m，1H)，3.98-3.77 (s，3H)，2.18-1.82 (m，1H)，1.31-1.13 (s，6H)。

6-[8-((S)-2-羟甲基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C84")

使用如对于"C76"所描述的序列，使用(S)-(+)-2-(羟甲基)-吡咯烷作为亲核取代中的反应配对物，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,52分钟，观察到[M+H]=394.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.26-10.22 (s，1H)，9.57-9.53 (s，1H)，7.98-7.94 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.51-7.46 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.34-7.30 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.26-7.20 (m，1H)，7.16-7.10 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.79-4.73 (m，1H)，4.73-4.69 (s，1H)，4.11-4.04 (m，1H)，4.04-4.01 (s，1H)，3.94-3.90 (s，1H)，3.72-3.64 (m，1H)，3.54-3.45 (m，1H)，3.20-3.15 (d，J=5.2 Hz，2H)，2.11-2.04 (m，2H)，2.00-1.92 (m，2H)，1.25-1.21 (s，6H)。

使用以下序列之一，合成以下化合物。

序列A：

将8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺溶解于DMF或乙腈中。加入适当的碱(例如Cs₂CO₃、K₂CO₃或N-乙基二异丙基胺；2.5当量)和所需的亲核体(1.5当量)，通过常规的加热或通过微波辐照，将混合物加热至130℃(在乙腈中)或180℃(在DMF中)，经由LCMS监测。完成后，通常的后处理(例如经硅藻土过滤以及经由层析法纯化)得到期望的8-取代的三唑并吡嗪。

在Buchwald-Hartwig条件下，该中间体与6-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮在叔丁醇中，用氯[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-异丙基-1,1'-联苯基]2-(2-氨基乙基)苯基)Pd(II) (0.05当量)作为催化剂和LHMDS (2当量)作为碱，在110℃下反应，经由LCMS监测。

后处理和经由制备型LCMS或柱层析法纯化，得到期望的化合物。

在一些情况下，需要另外的脱保护步骤，以得到期望的产物。

序列B：

通过常规的加热或通过微波辐照，在130℃或180℃下，6-[(8-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)氨基]-3,3-二甲基-二氢吲哚-2-酮(可通过前面描述的方法得到)与期望的亲核体(1.5当量)在DMF或乙腈中与适当的碱(例如Cs₂CO₃、K₂CO₃或N-乙基二异丙基胺；2.5当量)反应，经由LCMS监测。

后处理和经由制备型LCMS或柱层析法纯化得到期望的化合物。

在一些情况下，需要另外的脱保护步骤，以得到期望的产物。

3,3-二甲基-6-[8-((S)-哌啶-3-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C85")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,42分钟，观察到[M+H]=393.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.25 (s，1H)，9.44-9.40 (s，1H)，8.21-8.17 (s，2H)，8.04-7.99 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.50-7.45 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.33-7.20 (m，3H)，7.17-7.11 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.43-4.36 (m，1H)，3.36-3.30 (d，J=8.9 Hz，1H)，3.17-3.10 (d，J=12.7 Hz，1H)，2.96-2.88 (m，1H)，2.81-2.77 (s，1H)，2.02-1.94 (m，1H)，1.89-1.83 (m，1H)，1.76-1.68 (m，2H)，1.24-1.21 (s，6H)。

6-[8-((S)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C86")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,30分钟，观察到[M+H]=379.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.24 (s，1H)，9.58-9.53 (s，1H)，7.94-7.88 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.49-7.43 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.34-7.29 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.23-7.16 (m，1H)，7.15-7.08 (m，1H)，4.34-4.26 (t，J=5.1 Hz，1H)，3.64-3.57 (m，1H)，3.50-3.38 (m，1H)，2.12-2.02 (m，1H)，1.79-1.69 (m，1H)，1.24-1.19 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-((R)-哌啶-3-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C87")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,52分钟，观察到[M+H]=393.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.45-9.41 (s，1H)，8.23-8.19 (s，2H)，8.03-7.98 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.49-7.44 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.32-7.26 (dd，J=8.1，2.0 Hz，1H)，7.23-7.11 (m，3H)，4.37-4.30 (m，1H)，3.28-3.23 (d，J=3.8 Hz，1H)，3.10-3.03 (d，J=12.7 Hz，1H)，2.90-2.82 (m，1H)，2.79-2.70 (m，1H)，1.98-1.92 (m，1H)，1.86-1.79 (m，1H)，1.75-1.61 (m，2H)，1.24-1.20 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(甲基-哌啶-3-基-氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C88")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,33分钟，观察到[M+H]=407.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.28 (s，1H)，9.46-9.41 (s，1H)，8.36-8.31 (s，2H)，7.98-7.92 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.48-7.41 (m，2H)，7.33-7.26 (m，1H)，7.24-7.19 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.17-7.10 (d，J=8.1 Hz，1H)，2.79-2.66 (m，1H)，2.15-2.06 (m，1H)，1.84-1.70 (m，2H)，1.62-1.51 (m，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

6-[(1S,4S)-8-(2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C89")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,51分钟，观察到[M+H]=437.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.29 (s，1H)，9.64-9.60 (s，1H)，8.26-8.22 (s，1H)，8.03-7.98 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.52-7.47 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.35-7.31 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.21-7.10 (m，2H)，4.02-3.98 (s，1H)，3.16-3.10 (d，J=9.5 Hz，1H)，3.09-3.03 (d，J=10.2 Hz，1H)，2.00-1.94 (d，J=9.8 Hz，1H)，1.87-1.81 (d，J=10.2 Hz，1H)，1.24-1.20 (s，6H)。

6-[8-(1H-吲唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C90")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,92分钟，观察到[M+H]=411.1；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 13.32-13.27 (s，1H)，10.37-10.32 (s，1H)，10.05-10.00 (s，1H)，8.98-8.91 (d，J=7.3 Hz，1H)，8.89-8.81 (m，2H)，8.38-8.32 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.80-7.73 (d，J=8.2 Hz，1H)，7.65-7.56 (m，1H)，7.41-7.36 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.35-7.28 (m，1H)，7.24-7.17 (d，J=8.1 Hz，1H)，1.27-1.22 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚-6-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C91")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,52分钟，观察到[M+H]=392.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.34-10.30 (s，1H)，9.66-9.62 (s，1H)，8.05-8.00 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.51-7.46 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.42-7.37 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.21-7.11 (m，2H)，4.79-4.75 (s，4H)，4.54-4.50 (s，4H)，1.25-1.21 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(2-氧杂-6-氮杂-螺[3.5]壬-6-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C92")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：2,13分钟，观察到[M+H]=420.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.16-10.12 (s，1H)，9.71-9.67 (s，1H)，8.12-8.08 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.57-7.52 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.38-7.33 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.27-7.21 (m，1H)，7.16-7.11 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.41-4.36 (d，J=5.9 Hz，2H)，4.35-4.33 (s，2H)，4.33-4.30 (d，J=5.9 Hz，2H)，4.00-3.94 (m，2H)，1.95-1.89 (m，2H)，1.63-1.57 (m，2H)，1.24-1.20 (s，6H)。

6-{8-[(2-羟基-乙基)-哌啶-4-基-氨基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基}-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C93")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,40分钟，观察到[M+H]=437.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.68-9.64 (s，1H)，8.29-8.25 (s，1H)，8.11-8.06 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.56-7.51 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.29-7.25 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.23-7.17 (m，1H)，7.16-7.11 (m，1H)，5.06-4.98 (m，2H)，3.54-3.48 (m，2H)，3.27-3.18 (m，2H)，2.77-2.71 (m，2H)，2.02-1.95 (m，1H)，1.41-1.37 (s，2H)，1.26-1.20 (s，8H)。

6-[8-((R)-3-氨基-哌啶-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C94")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,40分钟，观察到[M+H]=393.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.67-9.63 (s，1H)，8.08-8.03 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.54-7.50 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.29-7.25 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.25-7.19 (m，1H)，7.17-7.11 (m，1H)，5.04-4.97 (m，1H)，4.88-4.80 (m，1H)，3.23-3.13 (m，1H)，2.95-2.86 (dd，J=12.6，9.5 Hz，1H)，2.79-2.71 (m，1H)，1.95-1.88 (m，1H)，1.83-1.75 (m，1H)，1.57-1.46 (m，1H)，1.35-1.26 (m，3H)，1.25-1.21 (s，6H)。

7-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬烷-1,3-二酮("C95")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,51分钟，观察到[M+H]=447.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.33-11.29 (s，1H)，10.30-10.26 (s，1H)，9.60-9.56 (s，1H)，8.02-7.97 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.52-7.47 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.33-7.28 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.23-7.17 (m，1H)，7.16-7.11 (m，1H)，4.13-4.09 (s，1H)，2.90-2.83 (m，1H)，2.81-2.74 (m，1H)，2.39-2.28 (m，1H)，2.23-2.14 (m，1H)，1.25-1.21 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(3-氧杂-8-氮杂-双环[3.2.1]辛-8-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C96")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,71分钟，观察到[M+H]=406.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.29 (s，1H)，9.68-9.64 (s，1H)，8.13-8.08 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.59-7.54 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.31-7.27 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.21-7.12 (m，2H)，5.24-5.20 (s，2H)，3.78-3.71 (m，2H)，3.68-3.61 (m，2H)，2.57-2.53 (s，1H)，2.08-1.96 (m，3H)，1.25-1.21 (s，6H)。

6-[8-(反式-3-氨基-环丁基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C97")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,45分钟，观察到[M+H]=379.2。

6-[8-(顺式-3-氨基-环丁基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C98")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,46分钟，观察到[M+H]=379.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.25 (s，1H)，9.46-9.42 (s，1H)，8.24-8.20 (s，2H)，8.01-7.96 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.47-7.41 (m，2H)，7.33-7.27 (m，1H)，7.26-7.22 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.16-7.11 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.39-4.30 (m，1H)，3.47-3.40 (m，1H)，2.76-2.67 (m，2H)，2.30-2.20 (m，2H)，1.25-1.21 (s，6H)。

6-[8-((S)-3-氨基-哌啶-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C99")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：分钟，观察到[M+H]=393.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.29 (s，1H)，9.71-9.67 (s，1H)，8.17-8.12 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.58-7.53 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.31-7.26 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.23-7.17 (m，1H)，7.17-7.11 (m，1H)，4.97-4.91 (d，J=13.3 Hz，1H)，4.73-4.66 (m，1H)，3.53-3.46 (m，1H)，3.44-3.40 (s，2H)，2.10-2.03 (m，1H)，1.89-1.82 (m，1H)，1.70-1.57 (m，2H)，1.24-1.20 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-[8-(2-苯基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C100")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,41分钟，观察到[M+H]=440.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.37-10.20 (s，1H)，9.56-9.43 (s，1H)，7.97-7.88 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.54-7.33 (d，J=4.9 Hz，1H)，7.32-7.03 (m，8H)，4.52-3.93 (m，1H)，2.45-2.28 (m，1H)，2.12-1.95 (m，1H)，1.95-1.82 (m，2H)，1.30-1.16 (d，J=2.3 Hz，6H)。

3,3-二甲基-6-{8-[甲基-(四氢-吡喃-4-基)-氨基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基}-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C101")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,79分钟，观察到[M+H]=408.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.25 (s，1H)，9.58-9.53 (s，1H)，8.07-8.01 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.57-7.51 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.36-7.29 (m，1H)，7.23-7.12 (m，2H)，5.48-5.37 (m，1H)，4.05-3.96 (m，2H)，3.55-3.42 (m，2H)，3.34-3.29 (s，3H)，2.00-1.85 (m，2H)，1.74-1.65 (m，2H)，1.30-1.21 (s，6H)。

3-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-苯磺酰胺("C102")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,92分钟，观察到[M+H]= 450.0.

3,3-二甲基-6-[8-(1,4,6,7-四氢-咪唑并[4,5-c]吡啶-5-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C103")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,67分钟，观察到[M+H]=416.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.88-11.82 (m，1H)，10.32-10.28 (s，1H)，9.72-9.68 (s，1H)，8.15-8.09 (m，1H)，7.60-7.55 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.54-7.48 (s，1H)，7.33-7.21 (m，2H)，7.19-7.13 (d，J=8.1 Hz，1H)，5.06-5.00 (m，2H)，4.53-4.49 (s，1H)，4.49-4.43 (m，1H)，3.21-3.16 (d，J=5.3 Hz，2H)，2.85-2.70 (m，1H)，1.26-1.22 (s，6H)。

3,3-二甲基-6-{8-[4-(2-氧代-咪唑烷-1-基)-哌啶-1-基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基}-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C104")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,71分钟，观察到[M+H]=462.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.25 (s，1H)，9.69-9.64 (s，1H)，8.11-8.05 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.57-7.51 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.31-7.26 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.23-7.10 (m，2H)，6.25-6.20 (s，1H)，5.36-5.28 (d，J=13.0 Hz，2H)，3.90-3.80 (m，1H)，3.34-3.17 (m，8H)，3.13-3.01 (m，2H)，1.73-1.65 (m，3H)，1.25-1.20 (s，6H)。

6-[8-(3,3-二氟-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C105")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2,0分钟，观察到[M+H]=400.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.28 (s，1H)，9.66-9.61 (s，1H)，8.13-8.07 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.58-7.52 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.35-7.29 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.25-7.12 (m，2H)，4.38-4.27 (m，2H)，4.20-4.11 (m，2H)，2.67-2.50 (m，5H)，1.26-1.21 (s，6H)。

5-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯("C106")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：2.25分钟，观察到[M+H]=488.2。

3,3-二甲基-6-[8-(1-甲基-哌啶-3-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C107")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,31分钟，观察到[M+H]=407.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.27-10.22 (s，1H)，9.53-9.48 (s，1H)，8.17-8.12 (s，1H)，7.99-7.93 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.49-7.43 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.29-7.17 (m，2H)，7.17-7.10 (d，J=8.1 Hz，1H)，6.74-6.67 (d，J=8.2 Hz，1H)，4.26-4.21 (s，1H)，3.20-3.15 (s，1H)，2.76-2.68 (d，J=10.4 Hz，1H)，2.26-2.21 (s，3H)，1.73-1.68 (s，2H)，1.64-1.55 (d，J=17.6 Hz，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

7-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-1,3,7-三氮杂-螺[4.4]壬烷-2,4-二酮("C108")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,47分钟，观察到[M+H]=448.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.89-10.84 (s，1H)，10.30-10.25 (s，1H)，9.61-9.56 (s，1H)，8.51-8.46 (s，1H)，8.05-7.99 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.54-7.48 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.31-7.25 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.24-7.10 (m，2H)，4.13-4.08 (s，4H)，2.45-2.31 (m，1H)，2.23-2.12 (m，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

合成3,7,9-三氮杂螺[4.4]壬烷-6,8-二酮：

将3-氧代-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1当量)和氰化钾(1.3当量)溶解于乙醇中，随后加入水中的碳酸铵(8当量)。将混合物加热至90℃达2小时，通过LCMS监测。完成后，真空除去溶剂。残余物用水稀释，滤除产物。在标准条件下使Boc-脱保护，得到作为HCl-盐的期望的乙内酰脲，准备用于其它改性。

2-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,5,7-三氮杂-螺[3.4]辛烷-6,8-二酮("C109")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,49分钟，观察到[M+H]=434.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.90-10.85 (s，1H)，10.32-10.27 (s，1H)，9.70-9.65 (s，1H)，8.63-8.58 (s，1H)，8.14-8.08 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.57-7.51 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.44-7.39 (d，J=1.8 Hz，1H)，7.19-7.09 (m，2H)，4.66-4.61 (s，2H)，4.46-4.41 (s，2H)，1.24-1.19 (s，6H)。

合成2,6,8-三氮杂螺[3.4]辛烷-5,7-二酮

将3-氧代-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1当量)和氰化钾(1.3当量)溶解于乙醇中，随后加入水中的碳酸铵(8当量)。将混合物加热至90℃达19小时，通过LCMS监测。完成后，真空除去溶剂。残余物用水稀释，滤除产物。在标准条件下Boc-脱保护，得到作为HCl-盐的期望的乙内酰脲，准备用于其它改性。

7-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-1,3,7-三氮杂-螺[4.5]癸烷-2,4-二酮("C110")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,61分钟，观察到[M+H]=462.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.78-10.72 (d，J=1.7 Hz，1H)，10.25-10.20 (s，1H)，9.66-9.61 (s，1H)，8.47-8.42 (d，J=1.8 Hz，1H)，8.10-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.55-7.49 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.37-7.32 (s，2H)，7.28-7.07 (m，7H)，5.05-4.97 (d，J=13.1 Hz，1H)，4.85-4.80 (s，1H)，4.21-4.16 (s，1H)，3.87-3.79 (d，J=13.1 Hz，1H)，1.88-1.73 (m，3H)，1.25-1.20 (s，6H)。

合成2,4,9-三氮杂螺[4.5]癸烷-1,3-二酮

将3-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯和氰化钾(1.3当量)溶解于乙醇中，随后加入水中的碳酸铵(8当量)。将混合物加热至90℃达2小时，通过LCMS监测。完成后，真空除去溶剂。残余物用水稀释，滤除产物。在标准条件下Boc-脱保护，得到作为HCl-盐的期望的乙内酰脲，准备用于其它改性。

1H-吲哚-6-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C111")

使用通用程序2，通过8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺的胺化，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,91分钟，观察到[M+H]=331.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.99-10.94 (t，J=2.2 Hz，1H)，9.76-9.72 (s，1H)，8.70-8.64 (m，2H)，8.43-8.39 (s，1H)，8.06-7.99 (m，2H)，7.48-7.42 (d，J=8.5 Hz，1H)，7.27-7.18 (m，2H)，6.37-6.32 (m，1H)，4.02-3.98 (s，3H)。

2,2,2-三氟-1-{6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1H-吲哚-3-基}-乙酮("C112")

在通用程序2中描述的条件下，8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺与1-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-2,2,2-三氟-乙酮(可通过6-溴-1H-吲哚(1当量)与TFA (1.6当量)在DMF中在120℃下反应1小时而得到)反应。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：2,10分钟，观察到[M+H]=427.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 12.65-12.61 (s，1H)，10.12-10.08 (s，1H)，8.72-8.67 (m，2H)，8.45-8.37 (m，2H)，8.26-8.21 (d，J=1.9 Hz，1H)，8.11-8.05 (m，2H)，7.58-7.51 (m，1H)，4.03-3.99 (s，3H)。

1,1,1-三氟-2-{6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1H-吲哚-3-基}-丙-2-醇("C113")

在-78℃至室温下，1-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-2,2,2-三氟-乙酮用甲基氯化镁处理，以得到2-(6-溴-1H-吲哚-3-基)-1,1,1-三氟-丙-2-醇，采用通用程序2，其与8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺偶联。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,92分钟，观察到[M+H]=443.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.08-11.03 (d，J=2.5 Hz，1H)，9.77-9.73 (s，1H)，8.70-8.64 (m，2H)，8.43-8.39 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.19-8.15 (s，1H)，8.06-8.02 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.01-7.97 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.70-7.65 (d，J=8.6 Hz，1H)，7.27-7.19 (m，2H)，6.26-6.22 (s，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，1.77-1.73 (s，3H)。

4,4-二甲基-7-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,4-二氢-苯并[d][1,3]噁嗪-2-酮("C114")

通过2-(2-氨基-4-溴-苯基)-丙-2-醇(1当量)与1,1'-羰基二咪唑(2当量)在THF中在室温下反应16小时，得到7-溴-4,4-二甲基-1,4-二氢-苯并[d][1,3]噁嗪-2-酮。分离中间体，并且采用通用程序2，与8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺偶联。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,81分钟，观察到[M+H]=391.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.28-10.24 (s，1H)，10.01-9.97 (s，1H)，8.70-8.63 (m，2H)，8.42-8.38 (d，J=0.6 Hz，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.40-7.31 (m，2H)，7.23-7.17 (d，J=8.4 Hz，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，1.61-1.57 (s，6H)。

(2,2-二氧代-2,3-二氢-1H-2l6-苯并[c]异噻唑-5-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C115")

使用通用程序2，经由8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺的胺化，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,66分钟，观察到[M+H]=383.0；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.10-9.06 (s，1H)，8.65-8.61 (m，2H)，8.37-8.33 (s，1H)，7.98-7.94 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.31-7.26 (d，J=2.4 Hz，1H)，7.17-7.11 (m，1H)，6.28-6.22 (d，J=8.4 Hz，1H)，4.00-3.96 (s，3H)，3.73-3.69 (s，2H)。

1,3,3-三甲基-6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C116")

使用甲基碘和正丁基锂，使"C34"甲基化，得到固体状的标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,98分钟，观察到[M+H]=389.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.01-9.97 (s，1H)，8.73-8.67 (m，2H)，8.42-8.38 (s，1H)，8.10-8.05 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.63-7.59 (d，J=1.8 Hz，1H)，7.34-7.24 (m，2H)，4.01-3.97 (s，3H)，3.22-3.18 (s，3H)，1.30-1.26 (s，6H)。

(1-甲基-2,2-二氧代-2,3-二氢-1H-2l6-苯并[c]异噻唑-5-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("C117")

使用MeI和正丁基锂，使(2,2-二氧代-2,3-二氢-1H-2l6-苯并[c]异噻唑-5-基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺甲基化。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,84分钟，观察到[M+H]=397.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 9.92-9.88 (s，1H)，8.72-8.64 (m，2H)，8.39-8.35 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.07-8.02 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.79-7.74 (m，1H)，7.72-7.65 (dd，J=8.6，2.3 Hz，1H)，6.98-6.93 (d，J=8.6 Hz，1H)，4.72-4.68 (s，2H)，4.01-3.97 (s，3H)，3.04-3.00 (s，3H)。

7-[2-(4,4-二甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-苯并[d][1,3]噁嗪-7-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-1,3,7-三氮杂-螺[4.4]壬烷-2,4-二酮("C118")

中间体的合成描述于"C114"和"C108"中。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,50分钟，观察到[M+H]=464.1；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.89-10.84 (s，1H)，10.19-10.14 (s，1H)，9.73-9.68 (s，1H)，8.52-8.47 (s，1H)，8.04-7.98 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.55-7.49 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.30-7.21 (m，2H)，7.17-7.10 (d，J=8.3 Hz，1H)，4.14-4.09 (s，3H)，2.43-2.30 (m，1H)，2.24-2.13 (m，1H)，1.59-1.54 (s，6H)，1.10-1.01 (m，6H)。

4,4-二异丙基-7-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,4-二氢-苯并[d][1,3]噁嗪-2-酮("C119")

与"C114"类似，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：2,14分钟，观察到[M+H]=447.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.06-10.02 (s，1H)，10.02-9.98 (s，1H)，8.70-8.62 (m，2H)，8.43-8.38 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.09-8.04 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.35-7.29 (m，2H)，7.07-7.01 (d，J=8.3 Hz，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，2.41-2.31 (m，2H)，0.90-0.85 (d，J=6.5 Hz，6H)，0.84-0.79 (d，J=6.8 Hz，6H)。

7-[8-(1H-吲唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-4,4-二甲基-1,4-二氢-苯并[d][1,3]噁嗪-2-酮("C120")

与"C114"类似，合成标题化合物。

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,89分钟，观察到[M+H]=427.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 13.32-13.28 (s，1H)，10.26-10.22 (s，1H)，10.17-10.13 (s，1H)，8.97-8.92 (d，J=7.2 Hz，1H)，8.88-8.82 (m，2H)，8.40-8.35 (d，J=4.2 Hz，1H)，7.80-7.74 (d，J=8.3 Hz，1H)，7.63-7.56 (m，1H)，7.46-7.40 (m，1H)，7.34-7.30 (d，J=2.1 Hz，1H)，7.25-7.19 (d，J=8.4 Hz，1H)，1.63-1.59 (s，6H)。

6-[8-(2,4-二羟基-7,8-二氢-5H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-6-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C121")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,66分钟，观察到[M+H]=460.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.09-11.04 (s，1H)，10.89-10.84 (s，1H)，10.21-10.16 (s，1H)，9.73-9.68 (s，1H)，8.18-8.11 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.61-7.55 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.36-7.30 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.26-7.18 (m，1H)，7.17-7.10 (m，1H)，4.75-4.70 (s，2H)，4.37-4.32 (s，1H)，2.65-2.57 (m，2H)，1.25-1.20 (s，6H)。

1-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-吡咯烷-3-甲酸甲酯("C122")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,64分钟，观察到[M+H]=422.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.24 (s，1H)，9.62-9.57 (s，1H)，8.01-7.95 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.52-7.45 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.33-7.27 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.24-7.17 (m，1H)，7.16-7.09 (m，1H)，4.21-4.16 (s，1H)，4.11-4.06 (s，1H)，4.01-3.96 (s，1H)，3.93-3.88 (s，1H)，3.38-3.31 (d，J=7.1 Hz，1H)，2.35-2.22 (m，1H)，2.22-2.13 (m，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

1-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-吡咯烷-3-甲酰胺("C123")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,64分钟，观察到[M+H]=422.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.24 (s，1H)，9.62-9.57 (s，1H)，8.01-7.95 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.52-7.45 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.33-7.27 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.24-7.17 (m，1H)，7.16-7.09 (m，1H)，4.21-4.16 (s，1H)，4.11-4.06 (s，1H)，4.01-3.96 (s，1H)，3.93-3.88 (s，1H)，3.38-3.31 (d，J=7.1 Hz，1H)，2.35-2.22 (m，1H)，2.22-2.13 (m，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

1-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-吡咯烷-3-甲酸环丙基酰胺("C124")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,54分钟，观察到[M+H]=447.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.59-9.55 (s，1H)，8.15-8.10 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.97-7.92 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.50-7.45 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.32-7.27 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.23-7.17 (m，1H)，7.16-7.10 (m，1H)，3.04-2.97 (t，J=7.7 Hz，1H)，2.70-2.63 (m，1H)，2.20-2.04 (m，2H)，1.24-1.20 (s，6H)，0.67-0.60 (m，2H)，0.46-0.39 (m，2H)。

6-[8-((2R,4S)-4-羟基-2-苯基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C125")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,87分钟，观察到[M+H]=456.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.31-10.26 (s，1H)，9.59-9.54 (s，1H)，7.97-7.91 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.40-7.33 (m，1H)，7.33-7.10 (m，8H)，5.11-5.05 (d，J=3.7 Hz，1H)，4.46-4.39 (m，1H)，4.36-4.31 (s，2H)，2.47-2.36 (m，1H)，2.03-1.92 (m，1H)，1.26-1.21 (s，6H)。

6-[8-((2R,4R)-4-羟基-2-苯基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C126")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,83分钟，观察到[M+H]=456.3；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.24 (s，1H)，9.57-9.52 (s，1H)，7.97-7.91 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.40-7.34 (d，J=4.5 Hz，1H)，7.32-7.18 (m，6H)，7.16-7.08 (m，2H)，4.56-4.51 (s，1H)，4.48-4.41 (m，1H)，4.15-4.10 (s，1H)，2.73-2.61 (m，1H)，1.93-1.85 (m，1H)，1.25-1.20 (s，6H)。

7-[2-(4,4-二甲基-2-氧代-1,2,3,4-四氢-喹啉-7-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬烷-1,3-二酮("C127")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,56分钟，观察到[M+H]=461.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.33-11.29 (s，1H)，10.12-10.08 (s，1H)，9.57-9.53 (s，1H)，7.99-7.94 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.51-7.46 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.35-7.31 (s，2H)，7.27-7.11 (m，7H)，3.11-3.02 (m，2H)，2.89-2.81 (m，1H)，2.81-2.73 (m，1H)，2.33-2.29 (s，2H)，1.23-1.16 (m，6H)。

6'-[[8-(1-甲基吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]氨基]螺[环丁烷-1,3'-二氢吲哚]-2'-酮("C128")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,91分钟，观察到[M+H]=387.1；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.09-10.04 (s，1H)，9.76-9.71 (s，1H)，8.52-8.45 (m，2H)，8.23-8.18 (s，1H)，7.90-7.84 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.32-7.25 (d，J=8.1 Hz，1H)，7.20-7.10 (m，2H)，3.84-3.79 (s，3H)，3.13-3.08 (s，3H)，2.35-2.19 (m，4H)，2.15-1.95 (m，3H)。

[8-(2,7-二氮杂-螺[4.4]壬-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-(4,4-二甲基-1,2,3,4-四氢-喹啉-7-基)-胺("C129")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,38分钟，观察到[M+H]=419.2。

6-[8-(1,4-二氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬-7-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C130")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,65分钟，观察到[M+H]=422.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.61-9.57 (s，1H)，8.02-7.97 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.51-7.46 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.31-7.26 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.22-7.17 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.16-7.10 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.00-3.95 (m，4H)，3.20-3.15 (d，J=5.2 Hz，3H)，2.20-2.13 (m，2H)，1.24-1.20 (s，6H)。

N-{1-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-吡咯烷-3-基}-N-甲基-乙酰胺("C131")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,52分钟，观察到[M+H]=435.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.29-10.25 (s，1H)，9.61-9.57 (s，1H)，8.02-7.96 (m，1H)，7.52-7.47 (m，1H)，7.32-7.25 (m，1H)，7.22-7.16 (m，1H)，7.16-7.10 (m，1H)，5.17-5.08 (m，1H)，4.17-4.13 (s，2H)，3.81-3.77 (s，2H)，3.20-3.15 (d，J=5.2 Hz，1H)，2.95-2.91 (s，2H)，2.80-2.76 (s，1H)，2.23-2.17 (d，J=8.7 Hz，1H)，2.15-2.03 (m，5H)，1.24-1.20 (s，6H)。

6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-吡啶-3-磺酰胺("C132")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,49分钟，观察到[M+H]=372.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 11.03-10.99 (s，1H)，8.80-8.75 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.73-8.64 (m，2H)，8.43-8.39 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.32-8.26 (m，1H)，8.25-8.18 (m，1H)，8.16-8.11 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.41-7.37 (s，2H)，4.03-3.99 (s，3H)。

8-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,8-二氮杂-螺[4.5]癸-1-酮("C133")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,62分钟，观察到[M+H]=447.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.31-10.27 (s，1H)，9.67-9.63 (s，1H)，8.11-8.06 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.60-7.53 (m，2H)，7.31-7.26 (d，J=1.9 Hz，1H)，7.22-7.11 (m，2H)，4.98-4.91 (m，1H)，3.46-3.35 (m，3H)，2.12-2.05 (m，2H)，1.80-1.70 (m，2H)，1.53-1.46 (d，J=13.6 Hz，1H)，1.24-1.20 (s，6H)。

6-{8-[(1-乙酰基-哌啶-4-基)-甲基-氨基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基}-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C134")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,67分钟，观察到[M+H]=449.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.30-10.26 (s，1H)，9.57-9.53 (s，1H)，8.07-8.02 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.57-7.52 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.32-7.26 (dd，J=8.1，2.0 Hz，1H)，7.23-7.19 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.18-7.12 (d，J=8.1 Hz，1H)，5.39-5.35 (s，1H)，4.63-4.55 (m，1H)，4.01-3.94 (m，1H)，3.29-3.25 (s，3H)，3.21-3.11 (m，1H)，2.67-2.50 (m，2H)，2.10-2.04 (m，3H)，1.88-1.74 (m，3H)，1.72-1.64 (dd，J=12.2，4.5 Hz，2H)，1.27-1.21 (s，7H)。

6-{8-[5-((R)-1-氨基-乙基)-2-甲氧基-苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基}-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C135")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,49分钟，观察到[M+H]=444.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.29 (s，1H)，9.90-9.86 (s，1H)，8.91-8.86 (d，J=4.3 Hz，1H)，8.56-8.51 (d，J=5.6 Hz，3H)，8.20-8.15 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.73-7.67 (m，1H)，7.63-7.58 (d，J=2.5 Hz，2H)，7.43-7.39 (s，4H)，7.32-7.18 (m，11H)，7.17-7.11 (d，J=7.9 Hz，1H)，4.45-4.40 (d，J=6.2 Hz，1H)，3.81-3.77 (s，3H)，3.19-3.15 (s，4H)，1.57-1.52 (d，J=6.8 Hz，3H)，1.24-1.20 (s，6H)。

(R)-7-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬烷-1,3-二酮("C136")

"C95"的单一对映异构体；经由手性LCMS层析法分离。未确定绝对构型。

(S)-7-[2-(3,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-6-基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬烷-1,3-二酮("C137")

"C95"的单一对映异构体；经由手性LCMS层析法分离。未确定绝对构型。

3,3-二甲基-6-[8-(甲基-哌啶-4-基-氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C138")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,40分钟，观察到[M+H]=407.2；

¹H NMR (400 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.33-10.28 (s，1H)，9.60-9.55 (s，1H)，8.40-8.35 (s，1H)，8.08-8.02 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.57-7.51 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.34-7.26 (m，1H)，7.25-7.20 (d，J=2.0 Hz，1H)，7.19-7.12 (d，J=8.1 Hz，1H)，5.34-5.29 (s，1H)，2.91-2.80 (m，2H)，2.55-2.43 (m，2H)，1.86-1.78 (d，J=12.1 Hz，2H)，1.26-1.21 (s，6H)。

6-[8-(6-氧代-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C139")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,60分钟，观察到[M+H]=433.2。

3,3-二甲基-6-[8-(8-氧代-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C140")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,45分钟，观察到[M+H]=433.2。

2,4-二甲基-3-{6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1H-吲唑-3-基}-戊-3-醇("C141")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,98分钟，观察到[M+H]=446.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 12.53-12.49 (s，1H)，10.02-9.98 (s，1H)，8.73-8.67 (m，2H)，8.44-8.40 (d，J=0.7 Hz，1H)，8.10-8.03 (m，2H)，7.98-7.92 (d，J=8.8 Hz，1H)，7.19-7.13 (dd，J=8.9，1.9 Hz，1H)，4.34-4.30 (s，1H)，4.03-3.99 (s，3H)，2.38-2.21 (m，2H)，0.86-0.81 (d，J=6.7 Hz，6H)，0.81-0.76 (d，J=6.7 Hz，6H)。

2-甲基-1-{6-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-1H-吲唑-3-基}-丙-1-醇("C142")

LCMS纯度(方法D)：100%，Rt：1,77分钟，观察到[M+H]=404.1；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 12.51-12.47 (s，1H)，10.07-10.03 (s，1H)，8.74-8.67 (m，2H)，8.44-8.40 (s，1H)，8.12-8.05 (m，2H)，7.79-7.73 (d，J=8.7 Hz，1H)，7.25-7.19 (dd，J=8.8，1.9 Hz，1H)，5.21-5.16 (d，J=4.5 Hz，1H)，4.56-4.50 (m，1H)，4.03-3.99 (s，3H)，2.20-2.09 (m，1H)，1.04-0.99 (d，J=6.6 Hz，3H)，0.78-0.72 (d，J=6.8 Hz，3H)。

6-[8-(4-羟基-2-苯基-吡咯烷-1-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,3-二甲基-1,3-二氢-吲哚-2-酮("C143")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,82分钟，观察到[M+H]=456.2；(顺式异构体的混合物)；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.28-10.24 (s，1H)，9.57-9.53 (s，1H)，8.16-8.12 (s，1H)，7.96-7.91 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.39-7.34 (d，J=4.4 Hz，1H)，7.32-7.18 (m，6H)，7.15-7.07 (m，2H)，5.64-5.60 (s，1H)，5.01-4.96 (m，1H)，4.58-4.50 (s，1H)，4.48-4.40 (m，1H)，4.15-4.11 (s，1H)，3.19-3.15 (s，1H)，2.71-2.62 (m，1H)，1.92-1.86 (m，1H)，1.25-1.21 (d，J=1.5 Hz，6H)。

4,4-二甲基-7-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基]-3,4-二氢-1H-喹啉-2-酮("C144")

LCMS纯度(方法C)：100%，Rt：1,89分钟，观察到[M+H]=389.2；

¹H NMR (500 MHz，DMSO-d₆) δ [ppm] 10.23-10.19 (s，1H)，9.88-9.84 (s，1H)，8.70-8.62 (m，2H)，8.42-8.38 (d，J=0.6 Hz，1H)，8.08-8.03 (d，J=4.3 Hz，1H)，7.34-7.29 (m，2H)，7.26-7.20 (d，J=8.1 Hz，1H)，4.02-3.98 (s，3H)，2.36-2.32 (s，2H)，2.11-2.07 (s，1H)，1.25-1.21 (s，6H)。

与以上提及的实施例类似，得到以下化合物。

4-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌嗪-1-甲酸叔丁酯("D1")；

1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌啶-3-甲酰胺("D2")；

(2,3-二甲氧基-苯基)-[8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-2-基]-胺("D3")；

{1-[2-(3,5-二甲氧基-苯基氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基]-哌啶-4-基}-氨基甲酸叔丁酯("D4")。

类似地得到以下化合物

类似地得到以下化合物

药理学数据

表1　一些代表性式I化合物的Syk和GCN2抑制

IC：<0.1 μM=AA；0.1-0.3 μM=A；

0.3-3 μM=B；3-50 μM=C

以下实施例涉及药物:

实施例A: 注射小瓶

用2 N盐酸将100 g的式I的活性成分和5g磷酸氢二钠在3l重蒸馏水中的溶液调节至pH 6.5，无菌过滤，转移至注射小瓶中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个注射小瓶含有5mg活性成分。

实施例B: 栓剂

将20 g的式I的活性成分与100g大豆卵磷脂和1400g可可酯的混合物熔化，倾入模具中并使之冷却。每个栓剂含有20mg活性成分。

实施例C：溶液

由1 g式I的活性成分、9.38 g NaH2PO4?2 H2O、28.48g Na2HPO4?12 H2O和0.1 g苯扎氯铵在940ml重蒸馏水制备溶液。将pH调节至6.8，并使溶液补充至1 l并经辐照灭菌。这种溶液可用于滴眼剂形式。

实施例D：软膏剂

将500mg式I的活性成分与99.5g凡士林在无菌条件下混合。

实施例E：片剂

将1 kg式I的活性成分、4 kg乳糖、1.2 kg马铃薯淀粉、0.2 kg滑石粉和0.1 kg硬脂酸镁的混合物以常规方式压制，得到片剂，以这样一种方式得到的每一片剂含有10mg活性成分。

实施例F：糖衣丸

类似于实施例E压制片剂，随后用蔗糖、马铃薯淀粉、滑石粉、黄蓍胶和染料的包衣料以常规方式包衣。

实施例G: 胶囊

将2 kg式I的活性成分以常规方式引入硬明胶胶囊，以这样一种方式获得的每粒胶囊含有20mg活性成分。

实施例H：安瓿

将1 kg式I的活性成分在60 l重蒸馏水中的溶液无菌过滤，转移至安瓿中，在无菌条件下冻干并在无菌条件下密封。每个安瓿含有10mg活性成分。