一种诸氏鲻虾虎鱼或裸项栉鰕虎鱼性腺发育和繁殖的方法

摘要

本发明公开了一种诸氏鲻虾虎鱼性腺促熟和诱导产卵的方法。它是选择体长1.8-5.0cm，无伤、体格健壮的诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼，放入培育容器的水中，培育容器中的水温控制在18-32℃，溶解氧3-7mg/L，盐度为5-35‰，亲鱼培育期间，投喂鲜活饵料进行强化培育，每隔3-8天，每升养殖水体直接添加1500-6000国际单位.绒毛膜促性腺激素或10-60微克促黄体生成素释放激素类似物或地欧酮(DOM)4-20毫克或其它催产激素或组合使用，并在培育容器中设有产卵巢，所述的产卵巢内空间高为0.5-3.0cm。本发明能促使性腺发育成熟、诱导自然产卵受精，节省人力、物力，达到提高亲鱼利用效率、缩短亲鱼培育周期、全年孵出大量优质仔鱼的效果，从而为该鱼低成本全年大量繁殖及应用推广奠定基础。

说明书

技术领域

本发明属于鱼类性腺促熟和诱导产卵领域，具体涉及一种诸氏鲻虾虎鱼或裸项栉鰕虎 鱼性腺发育和繁殖的方法。

背景技术

诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)属于脊索动物门、辐鳍鱼纲(Actinopterygii)、鲈形 目(Perciformes)、虾虎亚目(Gobioidei)、虾虎科(Gobiidae)、鲻虾虎鱼属(Mugilogobius)， 分布于亚洲沿岸，北至日本，西至中印半島，南至菲律宾及印度尼西亚等西太平洋海域，喜 栖息于沿海、河口及潮流可达的内陆河流等的浅水区域，个体小、性格温顺、耐低氧、广温、 广盐、性成熟早、繁殖力强、寿命较长等诸多实验动物培育与应用优势，是理想的海水鱼类 实验动物培育对象。

大多数虾虎鱼类繁殖有季节性，如中华乌塘鳢适宜人工繁殖时间为5月下旬至6月中旬， 长江口纹缟虾虎鱼的繁殖季节为4-6月；矛尾复虾虎鱼的产卵盛期在4月中旬；斑尾复虾虎鱼 的产卵盛期在3-4月份。室内养殖条件不适宜时，诸氏鲻虾虎鱼不能繁殖。

虾虎鱼人工繁殖常规方法有两种：①打针催产：注射催产药剂，因鱼较小，技术要求高， 劳动强度大，且多次注射操作易导致亲鱼受伤感染死亡；②直接进行人工授精：将捕到的亲 鱼进行筛选后，直接取出精子与卵子进行人工授精，因亲鱼性腺发育成熟度较差，不同步， 导致受精卵质量较差，胚胎孵化时死亡率较高。

发明内容

本发明的目的是提供一种诸氏鲻虾虎鱼性腺促熟和诱导产卵的方法，该方法能够克服现 有虾虎鱼人工繁殖常规方法的缺陷，无需打针催产或人工受精，通过筛选合适亲鱼，控制适 宜生态环境，浸泡激素，促使性腺发育成熟、诱导自然产卵受精，达到便利操作、提高亲鱼 利用效率、缩短亲鱼培育周期、全年可孵出大量优质仔鱼的效果。

本发明的诸氏鲻虾虎鱼或裸项栉鰕虎鱼性腺促熟和诱导产卵的方法，其特征在于，包括 以下步骤：

选择体长1.8～5.0cm，无伤、体格健壮的诸氏鲻虾虎鱼或裸项栉鰕虎鱼雌雄亲鱼，放入培 育容器的水中，培育容器中的水温控制在18～32℃，溶解氧3-7mg/L，盐度为5-35‰，亲鱼培 育期间，补充鲜活饵料进行强化培育，每隔3-8天，每升养殖水体直接添加1500-6000国际 单位绒毛膜促性腺激素(HCG)或10-60微克促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A2)或 4-20毫克地欧酮(DOM)或其它催产激素或组合使用，浸泡时间2-5小时，浸泡结束后换水 1/3-1体积，并在培育容器中设有产卵巢，所述的产卵巢内空间高为0.5～3.0cm。

所述的放入培育容器中的亲鱼体长为2.0～4.0cm，雌雄亲鱼的数量比为1:1～2，所述的培 育容器中的水温控制在25±2℃，溶解氧为5±1.5mg/L，盐度为15±5‰，培养密度为200-250 尾/m²，所述的投喂鲜活饵料是每天2次投喂沙蚕、贝类或鱼虾肉，投喂量以诸氏鲻虾虎鱼或 裸项栉鰕虎鱼半小时摄食完毕为准，每隔4-6天，每升养殖水体直接添加3000-4800国际单 位绒毛膜促性腺激素(HCG)或20-40微克促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A2)或8-16 毫克地欧酮(DOM)或其它催产激素或组合使用，浸泡时间3.5±1小时，浸泡结束后换水1/3-2/3 体积，所述的产卵巢为玻璃管道，其内径为1.2-2.5cm。

虾虎鱼科中某些属鱼类，它们适应在泥海岸及淡水沿岸沼泽地空气潮湿中的生活，主要 与其皮肤薄，表皮下面分布了较多微血管、可进行皮肤呼吸有关。诸氏鲻虾虎鱼和裸项栉鰕 虎鱼饲养试验表明，在湿润条件下、大量个体密集于狭小空间仍可存活较长时间，表明其具 有上述特点。本发明经过试验发现，诸氏鲻虾虎鱼和裸项栉鰕虎鱼可以通过激素浸泡方式高 效催熟、催产。

本发明在充分掌握诸氏鲻虾虎鱼人工养殖条件及其性腺发育规律的基础上，通过筛选合 适亲鱼，控制适宜生态环境，浸泡激素，利用诸氏鲻虾虎鱼内在的生理变化和外在环境的协 同作用，促使性腺发育成熟、诱导自然产卵受精，达到提高亲鱼利用效率、缩短亲鱼培育周 期、孵出大量优质仔鱼的效果，节省人力、物力，取得较好的繁殖效果，并且能够克服现有 虾虎鱼人工繁殖常规方法的缺陷，无需打针催产或人工受精，从而为该鱼低成本全年大量繁 殖及应用推广奠定基础。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：

本实施例的诸氏鲻虾虎鱼性腺促熟和诱导产卵的方法，包括以下步骤：

(1)亲鱼筛选：2013年8月6日从广东省大亚湾水产试验中心广东省实验动物监测所 虾虎鱼保种基地采集无病、无伤、体格健壮、体长2～4cm，平均体长为(2.8±0.4)cm的诸 氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼。

(2)养殖条件：将诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼按照雌雄性别数量比为1：1.5的比例放入培 育容器的水中，所述的培育容器为0.04m³的白色塑料箱，箱高30cm，水深10cm；自然光 照，水温控制在(25±1)℃；pH8.3，溶解氧(5±1.5)mg/L，培养密度200-250尾/m²，水的 盐度为18‰。

(3)强化培育：亲鱼培育期间，每天上午9点和下午5点各投喂一次去壳、切碎新鲜虾 肉，投喂量以诸氏鲻虾虎鱼半小时摄食完毕为准，投喂后半小时及时清除残余饵料，换水1/3 体积。

(4)每隔4天，每升养殖水体直接添加30微克促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A2)， 浸泡4小时后换水1/2体积。

(5)产卵鱼巢：产卵巢设置5个，用玻璃管制作，两端与外界相通，内径2.4cm，长(4-6) cm，置于箱底。

(6)另设3箱对照组，分别为：体长对照组，其体长小于1.8cm，平均体长为(1.4±0.2) cm；盐度对照组，水的盐度为2‰；鱼巢对照组，管径为3.5cm的玻璃管，长度为6cm， 除对照因素不同外，其它因素相同。

(7)2013年9月18日试验箱有2尾雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有1-4尾雌鱼产卵，9 月21日，首次产的卵陆续孵出仔鱼，至11月6日结束，共孵出仔鱼42000尾，饲养15天成 活率86％。

(8)各对照组均无产卵。

取对照组性腺发育相对较成熟的40尾亲鱼，雌雄比例1:1，注射催熟激素促黄体素释放 激素类似物(LRH-A2)、马来酸地欧酮(DOM)和绒毛膜促性腺激素(HCG)，3种激素用生理盐 水溶解混合，每公斤鱼体重用的激素剂量为：LRH-A210微克、DOM4.2毫克、HCG1500IU(国 际单位)；3种激素剂量分两次催熟使用(雌雄鱼剂量相同)，相隔时间为15小时，第1次催熟 使用LRH-A23.5微克、DOM4.2毫克和1毫升生理盐水，第2次催熟使用LRH-A26.5微克、 HCG1500IU和1毫升生理盐水；经过12—14小时即进行挤卵、挤精，选取饱满、油球较多 且具有较好光泽度、卵膜外侧粘着丝发达的成熟卵和精巢饱满呈乳白色、精巢表面充满精液 的成熟精子人工授精，获得受精卵13000粒，孵化和仔鱼饲养条件相同，孵出仔鱼7600尾， 饲养15天成活率28％

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率80％。

实施例2：

本实施例的诸氏鲻虾虎鱼性腺促熟和诱导产卵的方法，包括以下步骤：

(1)亲鱼筛选：从广东省大亚湾水产试验中心广东省实验动物监测所虾虎鱼保种基地采 集无病、无伤、体格健壮、体长1.8～5.0cm的诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼。

(2)养殖条件：将诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼按照雌雄性别数量比为1：1的比例放入培育 容器的水中，所述的培育容器为0.04m³的白色塑料箱，箱高30cm，水深10cm；自然光照， 水温控制在18℃；pH8.3，溶解氧3mg/L，培养密度200-250尾/m²，水的盐度为5‰。

(3)强化培育：亲鱼培育期间，每天上午9点和下午5点各投喂一次去壳、切碎新鲜虾 肉，投喂量以诸氏鲻虾虎鱼半小时摄食完毕为准，投喂后半小时及时清除残余饵料，换水1/3 体积。

(4)每隔3天，每升养殖水体直接添加1500国际单位绒毛膜促性腺激素(HCG)，浸泡 2小时后换水1/3体积。

(5)产卵鱼巢：产卵巢设置5个，用玻璃管制作，两端与外界相通，内径0.5cm，长(4-6) cm，置于箱底。

(6)经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵 出仔鱼，饲养15天成活率78％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率79％。

实施例3：

本实施例的控制诸氏鲻虾虎鱼早繁的方法，包括以下步骤：

(1)亲鱼筛选：从广东省大亚湾水产试验中心广东省实验动物监测所虾虎鱼保种基地采 集无病、无伤、体格健壮、体长1.8～5.0cm的诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼。

(2)养殖条件：将诸氏鲻虾虎鱼雌雄亲鱼按照雌雄性别数量比为1：2的比例放入培育 容器的水中，所述的培育容器为0.04m³的白色塑料箱，箱高30cm，水深10cm；自然光照， 水温控制在32℃；pH8.3，溶解氧7mg/L，培养密度200-250尾/m²，水的盐度为35‰。

(3)强化培育：亲鱼培育期间，每天上午9点和下午5点各投喂一次去壳、切碎新鲜虾 肉，投喂量以诸氏鲻虾虎鱼半小时摄食完毕为准，投喂后半小时及时清除残余饵料，换水1/3 体积。

(4)每隔8天，每升养殖水体直接添加6000国际单位.绒毛膜促性腺激素(HCG)，浸 泡5小时后换水1体积。

(5)产卵鱼巢：产卵巢设置5个，用玻璃管制作，两端与外界相通，内径3cm，长(4-6) cm，置于箱底。

(6)经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵 出仔鱼，饲养15天成活率82％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率83％。

实施例4：

本实施例与实施例1基本相同，只是促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A2)的用量为 10微克。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率84％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率85％。

实施例5：

本实施例与实施例1基本相同，只是促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A2)的用量为 60微克。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率81％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率83％。

实施例6：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔4天，每升养殖水体直接添加3000国际单位. 绒毛膜促性腺激素(HCG)，浸泡2.5小时后换水1/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率84％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率82％。

实施例7：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔6天，每升养殖水体直接添加4800国际单位. 绒毛膜促性腺激素(HCG)，浸泡4.5小时后换水2/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率85％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率84％。

实施例8：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔4天，每升养殖水体直接添加20微克促黄体生 成素释放激素类似物，浸泡4.5小时后换水2/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率85％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率85％。

实施例9：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔4天，每升养殖水体直接添加40微克促黄体生 成素释放激素类似物，浸泡2.5小时后换水1/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率85％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率83％。

实施例10：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔4天，每升养殖水体直接添加8毫克地欧酮， 浸泡2.5小时后换水1/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率84％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率85％。

实施例11：

本实施例与实施例1基本相同，只是每隔4天，每升养殖水体直接添加16毫克地欧酮， 浸泡4.5小时后换水2/3体积。

经培育后，试验箱有雌鱼在鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔 鱼，饲养15天成活率85％。

按上述相同的方法对裸项栉鰕虎鱼进行实验，经培育后，裸项栉鰕虎鱼试验箱有雌鱼在 鱼巢内产卵，其后每天有雌鱼产卵，首次产的卵陆续孵出仔鱼，饲养15天成活率83％。