实时荧光定量PCR检测外源GhCAD6基因在棉花纤维中表达量的方法

摘要

本发明公开了一种采用实时荧光定量PCR检测外源GhCAD6基因在棉花纤维中的表达量的方法，首先采用热硼酸‑蛋白酶K法提取出棉花纤维的RNA，反转录成cDNA，利用特异性引物和内参基因，在特定的反应条件和反应程序下进行荧光RT‑PCR，检测外源GhCAD6基因在不同发育阶段棉纤维中的表达量，该方法自动收集荧光信号，避免了肉眼判断的主观性，提高了实验的灵敏度，保证了结果的可靠性和重复性，免除了常规PCR中的电泳、定量扫描等后续繁琐步骤，大大缩短了实验时间；本发明中棉花GhCAD6基因实时荧光RT‑PCR检测方法的建立，为研究棉花GhCAD6基因表达调控机理及利用其改良棉花纤维品质的研究奠定了基础。