NSP9基因实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在感染细胞过程中表达量的变化

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒对养猪业危害巨大,未有有效的药物和疫苗,猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因编码RNA依赖的RNA聚合酶,在病毒复制中发挥重要作用.根据猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因序列设计引物，建立基于SYBR Green I检测模式的实时荧光定量PCR，扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰，无引物二聚体。该方法与猪戊肝病毒病毒(HEV)、猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病毒(PRV)基因组均无交叉反应，可重复性好，组内变异系数小，可用于临床检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。在病毒感染细胞过程中，NSP9基因表达量逐步升高，36h达到最高。