羊种布鲁菌16M LPS的制备方法及其单克隆抗体的筛选鉴定方法和应用

摘要

羊种布鲁菌16M LPS的制备方法及其单克隆抗体的筛选鉴定方法和应用，涉及单克隆抗体制备领域。本发明用酚水法提取羊种布鲁菌16M的LPS，纯化后用其免疫Balb/c小鼠；将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合；间接ELISA方法筛选出两株阳性杂交瘤细胞株；制备两株羊种布鲁菌16M LPS单克隆抗体，亚型为IgG3和IgG1，轻链类型为κ型，浓度为1.02和2.10mg/ml，亲和常数为1.12×109和1.11×109，效价为1：6400和1：12800，其纯度和效价高，亲和性好，结合能力强，特异性和敏感性好，抗体包被10分钟便可与布鲁菌发生特异性结合，免疫荧光试验可观察到现明显的荧光。