一个用于构建NADH脱氢酶基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用

摘要

本发明公开了一个用于构建NADH脱氢酶基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括16个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因家族16个成员基因两侧的同源臂序列。本发明为了方便NADH脱氢酶基因功能研究及疫苗开发，构建了一个同源重组噬菌体文库，该文库可以用于结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因敲除，验证基因是否必需基因，构建NADH脱氢酶敲除菌株，用于BCG疫苗优化改良。利用本发明所述噬菌体文库进行敲除时，敲除特异性好，阳性率高。