摘要:人类基因组测序工作的完成是医学和生命科学发展史上一座重要的里程碑,许多科学家认为,这一工作能够为疾病的预测和预防提供基础信息,将会对21世纪的医学和公共卫生事业起到深远的影响。目前,新基因的发现及其结构、功能的研究进展几乎每天都在发生,其中的一部分被认为与疾病的发生有关,并且有望带来疾病诊断、治疗和预防各个层面的广泛变革。世纪之交,面对人类医学和生命科学史上最伟大的跨越,面对日新月异的基因医学进展,流行病学将在其中发挥怎样的功能,将处于何等的地位,2004年牛津大学出版社出版的《Human Geuome Epidemiology:A Scientific Foundation for Using Genetic Information to Improve Health and Prevent Disease》一书向我们系统的阐述了这一问题。
摘要:目的:建立HBV体外感染HepG2细胞的实验方法。rn 方法:培养HepG2细胞传至6孔板中,以3毫升含10%新生牛血清的DMEM培养基,在37℃,5%CO2条件下的孵箱中培养。24h后进行HBV体外感染HepG2的实验.感染组用HBV阳性血清(HBV DNA 3×109copy/ml,用DMEM按1:3稀释,滤过后使用)0.5m1,阴性对照组用HBV阴性血清.实验开始后HepG2细胞继续孵育24h,而后用0.01M PBS彻底清洗各细胞培养孔涤完毕后各孔加入舍2%新生牛血清的DMEM培养液。PBS洗后每隔12h收集各孔细胞培养上清一次.ELISA检测细胞培养上清中的HBsAg.PCR检测细胞培养上清和HepG2细胞中的HBVDNA,用荧光定量PCR检测感染组细胞上清中HBV DNA的含量.rn 结果:HBV阳性血清感染组,在PBS洗后12h的细胞培养上清中ELISA可检测到HBsAg阳性持续到84h.HBV阳性血清感染组细胞培养上清和HcpG2细胞中HBV DNA PCR阳性,阴性对照组和空白对照组HBV DNA PCR阴性.荧光定量PCR检测,感染组洗后的HBV定量为阴性,而在PBS洗后36小时、84小时的上清中HBV的量达到5×105和3×106(copy/ml).rn 结论:HBV阳性血清进行HBV感染体外培养的HepG2细胞是可行的.