4种化学小分子联合诱导鼠胚胎成纤维细胞转化为施旺细胞效果观察

摘要

目的 观察转化生长因子-β抑制剂SB431542、骨形态发生蛋白抑制剂Noggin、腺苷酸环化酶抑制剂FSK、组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠联合诱导鼠胚胎成纤维细胞(MEF)转化为施旺细胞的效果.方法 将孕13.5 d雌鼠处死后取胎鼠分离MEF细胞,分为观察组和对照组;观察组置于含10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子、20 ng/mL表皮细胞生长因子、20 ng/mL胶质细胞源性神经营养因子、5μmol/L全反式维甲酸、10 μmol/LSB431542、200 ng/mL Noggin、10 μmol/L FSK、0.2 mmol/L丁酸钠的neurobasal培养基中诱导培养,隔天换液,共诱导3周,对照组不处理.在倒置相差显微镜下观察并记录两组转化细胞的形态,采用Q-PCR法检测两组施旺细胞标志物S100β、人蛋白脂质蛋白抗体(PLP) mRNA.结果 诱导培养3周后可见部分MEF细胞变成梭形,胞体较小,两侧突起纤长,呈旋涡状排列.观察组S100β、PLPmRNA相对表达量分别为34.100±5.657、18.980±2.031,对照组分别为0.985 ±0.015、0.995±0.005(P均＜0.05).结论 SB431542、Noggin、Forskolin和丁酸钠联合可诱导鼠胚胎MEF转化为施旺细胞.