小分子化合物诱导人胚胎干细胞分化为角膜上皮样细胞

摘要

背景 角膜缘干细胞缺乏是角膜盲的主要病因,种子细胞来源有限是细胞移植疗法的瓶颈.目的 诱导人胚胎干细胞(human?embryonic?stem?cells,hESCs)分化为角膜上皮祖细胞和成熟的角膜上皮细胞(corneal?epithelial?cells,CECs).方法 采用拟胚体联合小分子化合物(SB505124和IWP-2)及碱性成纤维细胞生长因子(basic?fibroblast?growth?factor,bFGF)对人胚胎干细胞H9系(hESCs?H9)进行诱导,分别于诱导10?d、15?d和20?d时观察细胞形态,用免疫荧光法和实时定量PCR法对特征性标志物OCT4、SOX2、ΔNp63、CK14、CK3和CK12进行基因及蛋白水平的检测.结果 小分子化合物诱导后胚胎干细胞形态改变,类似角膜上皮细胞形态.诱导后干性标志物OCT4和SOX2表达下调(P均<0.01),角膜上皮祖细胞及角膜上皮细胞标志物ΔNp63、CK14、CK3和CK12表达均上调(P均<0.05).结论 通过拟胚体联合小分子化合物的方法,可以将ESCs诱导为角膜上皮样细胞.