糖皮质激素对抗血清剥夺诱导的小鼠肝癌细胞凋亡作用及机制研究

摘要

目的 探讨糖皮质激素对血清剥夺条件下小鼠肝癌细胞系H22凋亡的影响及相关机制.方法 血清剥夺诱导H22细胞凋亡的同时分别添加不同浓度的糖皮质激素皮质酮(CORT)以及糖皮质激素受体拮抗剂RU486,将细胞依次分为:对照组、血清剥夺组、CORT组(0.25、0.5、1μmol/L)、RU486组(1μmol/L)、CORT+RU486组(1μmol/L CORT+1μmol/LRU486),24 h后流式细胞术染色检测H22细胞凋亡水平变化.同时,在正常血清培养条件下,CORT(1μmol/L)处理H22细胞48 h后提取细胞各组分蛋白进行蛋白质免疫印迹实验,检测糖皮质激素受体(GR)核转位以及Hsp90蛋白表达水平变化.结果 与对照组相比,血清剥夺组H22细胞凋亡水平显著升高(P<0.001);CORT处理后细胞凋亡水平与血清剥夺组相比又显著降低(P<0.05),并呈现剂量依赖性;CORT与RU486联合处理后H22细胞凋亡水平与CORT(1μmol/L)组相比又显著升高(P<0.001).在正常血清培养条件下,CORT处理后H22细胞中GR核转位增加,同时协助GR进行核转位的热休克蛋白(Hsp90)表达水平升高.结论 糖皮质激素可以对抗血清剥夺诱导的小鼠肝癌H22细胞凋亡,其机制可能与Hsp90协助下增强的GR核转位有关.