基于TLR4/MyD88/NF-kB信号通路探讨木犀草素对MPTP诱导的帕金森病模型小鼠的炎症影响

摘要

为研究木犀草素(luteolin)抑制由甲基-4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetmhydropyridine,MPTP)所引起的帕金森病模型小鼠的抗炎反应的作用及机制,选取45只野生型小鼠,随机分为3组:对照组,腹腔注射生理盐水14d;MPTP模型组,先给予生理盐水3d,第4天开始腹腔注射30mg·kg-1·d-1MPTP(溶于生理盐水),共5d,最后腹腔注射生理盐水6d;木犀草素治疗组,先给予3d木犀草素(溶于生理盐水),第4天腹腔注射30mg·kg-1·d-1MPTP,共5d,继续腹腔注射木犀草素6d,每组15只.应用旷场试验和旋转杆试验检测3组小鼠的运动能力;然后利用免疫组织化学染色技术检测小鼠黑质多巴胺能神经元的凋亡情况;运用Western blot的方法考察小鼠黑质区TH、Bcl2、BAX、TLR4、MyD88和NF-kB的表达情况;使用ELISA检测小鼠黑质区中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量.结果表明:行为学试验结果证实,MPTP模型组小鼠旷场中心区域移动距离和旋转时间显著短于对照组(p<0.05),而与模型组相比,木犀草素处理后,旷场中心区域移动距离和旋转时间明显延长(p<0.05);免疫组织化学染色结果显示与对照组相比,MPTP模型组小鼠黑质区多巴胺能神经元死亡率明显增多,与模型鼠相比,木犀草素处理后,黑质区多巴胺能神经元死亡率明显减少;Western blot和ELISA结果显示,与对照组相比,TLR4、MyD88、NF-kB、TNF-α、IL-6和IL-1β表达显著增加(p<0.05),Bcl2/BAX比例显著降低(p<0.05);与MPTP模型组小鼠相比,木犀草素处理后,黑质区TLR4、MyD88、NF-kB、TNF-α、IL-6和IL-1β表达显著降低(p<0.05),Bcl2/BAX比例降低显著增加(p<0.05).木犀草素可缓解由MPTP诱导的帕金森模型鼠脑内多巴胺能神经元凋亡和炎症反应的作用,进而改善小鼠的运动能力,其机制可能是通过调控TLR4/MyD88/NF-kB信号通路发挥神经保护作用.