基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨黄芪多糖对肺癌小鼠免疫功能的影响及对Th1/Th2的调节作用

摘要

目的:探讨黄芪多糖(APS)对肺癌小鼠免疫功能的影响及对Th 1/Th2的调节作用及机制.方法:选取C57BL/6J野生型(TLR4+/+)和TLR4基因敲除(TLR4-/-)小鼠各50只,各随机分为5组:模型组、顺铂组(3 mg/kg)、APS高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组10只,皮下注射Lewis肺癌细胞建立小鼠肺癌移植模型.实验结束后测定小鼠体重、肿瘤组织、胸腺组织和脾组织重量,计算各组小鼠肿瘤抑制率、胸腺指数和脾指数.HE染色观察小鼠肿瘤组织病理变化;流式细胞术检测脾淋巴细胞亚群水平.ELISA试剂盒检测脾组织IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10含量.Western blot和qRT-PCR检测肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和mRNA表达水平.结果:与模型组相比,APS以剂量依赖性抑制Lewis肺癌移植瘤生长,提高肺癌小鼠胸腺指数和脾指数,促进肿瘤细胞凋亡,减少血管生成,提高脾组织CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞比例和CD4+/CD8+比值,逆转和平衡Th1/Th2漂移,提高肺癌小鼠免疫功能.APS剂量依赖性降低TLR4+/+组小鼠TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白和mRNA表达,增加Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ含量,降低Th2型细胞因子IL-4和IL-10含量(P＜0.05);与模型组相比,APS高、中、低剂量组TLR4-/-小鼠TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白和mRNA表达及Th1/Th2细胞因子含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:APS具有抗Lewis肺癌作用和免疫调节作用,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化有关.