登革3型病毒prM-E基因重组质粒DNA的构建和真核表达

摘要

构建登革3型病毒prM-E基因的真核表达重组质料,并进行体外表达,为登革DNA疫苗的研究奠定基础.用RT-PCR法获得prM-E基因片段,然后将其克隆到真核表达载体中.用电穿孔法将重且质料DNA转入BHK细胞,通过免疫荧光法检测外源基因在真核细胞中的表达.结果,通过酶切和序列测定证实了构建的重组质粒DNA含序列正确的prM-E基因.用免疫荧光法检测到转染了重组质粒DNA的BHK细胞的胞浆中有登革3型病毒特异蛋白的表达.说明含有登革3型病毒prM-E基因的真核表达重组质粒可以在BHK细胞中表达,该结果为观察该重组质粒的免疫原性奠定了基础.