小麦TaTCTP蛋白的原核表达及抗体制备

摘要

为了阐明翻译控制肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)在小麦-叶锈菌互作中的作用及其机制,本研究克隆了TaTCTP的开放阅读框(ORF)全长,并经过原核表达、亲和纯化、动物免疫,制备了TaTCTP兔多克隆抗体.结果表明,该基因CDS区全长为507 bp,编码168个氨基酸,预期分子量为18.8 kD,并具有较高的可溶性.以纯化后的TaTCTP重组蛋白制备的抗体可以特异性识别TaTCTP,效价为1:6400.Western blotting检测发现TaTCTP在叶锈菌侵染后受诱导上调.本研究为进一步研究TaTCTP在小麦与叶锈菌互作过程中的功能及其作用机制奠定了基础.