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化学合成的转化生长因子α七肽的抗体制备及对BT_(325)细胞增殖的抑制作用

         

摘要

目的:转化生长因子α(TGFα)抗体可被用于识别和定位细胞产生的TGFα及抗肿瘤,作者以化学合成的七肽为抗原制备抗体,并观察其生物效应.方法:采用碳化二乙胺为交联剂,将人工化学合成的TGFα七肽(NH3-Val-Val-Ser-His-Phe-Asn-Asp-COOH)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,并以此作抗原免疫家兔制备TGFα抗体,观察此抗体的生物学效应.结果:TGFα七肽合成正确;七肽与BSA偶联率达12.58∶1;免疫动物抗血清先经硫酸铵沉淀分离,再经用连接有TGFα七肽胃蛋白酶(pepsin)偶联物的活化CNBr-Sepharose4B亲和层析柱纯化,TGFα七肽抗体得率为0.7g/L抗血清;免疫细胞化学染色显示该抗体能识别BT325细胞产生的TGFα;TGFα七肽抗体具有剂量依赖性抑制肿瘤细胞(BT325细胞)生长的作用.结论:作者制备的TGFα七肽抗体具有识别、定位细胞产生的TGFα和抗肿瘤的生物学效应.

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