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痰耐药结核分支杆菌rpsL基因的快速检测及链霉素耐药机制研究

         

摘要

[目的]快速检测痰耐药结核分支杆菌rpsL基因及了解链霉素(SM)耐药的分子机制.[方法]用PCR方法直接从耐药肺结核患者痰及临床分离菌株扩增rpsL基因片段,对扩增获得的rpsL基因片段进行序列测定,比较分析全耐、对SM耐药的耐多药、对SM敏感的耐多药、全敏感或标准结核分支杆菌株之间的基因序列差异.[结果]于6h内从耐药肺结核痰中快速检测到rpsL基因.从所有临床分离菌珠均扩增获得267bp片段,序列测定比较发现,全耐菌和对SM耐药的MDR-TB菌株均检测有rpsL基因点突变,突变密码子为CCT突变为CTT,而全敏感株和标准菌株均未检测到基因突变.其中从一株对SM敏感的MDR-TB中也检测到突变.[结论]PCR及序列分析方法可快速、准确检测结核分支杆菌rpsL基因及其突变,结核分支杆菌对EMB的耐药性与rpsL基因点突变有关.

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