繁茂膜海绵共附生假单胞菌属菌株DEH138A中脱卤酶的分离纯化及性质表征

摘要

用硫酸铵沉淀,Q-SepharoseHP离子交换层析,Superdex 200凝胶过滤层析和Mono-Q离子交换层析方法,对从大连潮间带繁茂膜海绵中分离得到的1株假单胞菌DEH138A(Pseudomonas sp.DEH138A)中的脱卤酶进行分离纯化和酶学性质表征.结果显示,假单胞菌菌株DEH138A中含有一种能降解L-2-氯丙酸的L-2-卤代酸脱卤酶(L-DEX).经纯化后,L-DEX亚基分子量为27.8 kDa,全酶分子量为42.5 kDa,推测其为一个二聚体蛋白.L-DEX最适pH值及最适反应温度分别为10.0和30℃,Km值为0.63 mmol/L.L-DEX能够作用于多种2-卤代酸,而且对单溴乙酸的脱卤效果最好.DTT和EDTA对L-DEX无抑制作用,Cu2+和Co2+对L-DEX有明显的抑制作用.L-DEX具有立体选择性等独特的酶学特性,在环境修复、精细化工等领域具有潜在的应用价值.